徐舜, 吴维佳, 杨海清, 黄海姣, 叶丽文, 朱跃, 沈佳恩, 郑晓丽, 黄晓璐, 沈汉连, 李雨婷
基因组不稳定性与DNA损伤修复异常是肿瘤细胞的核心特征,亦是多种化疗药物的作用靶标。长非编码 RNA(long non-coding RNA)作为基因表达的关键调控因子,参与调节多种生物学过程。本研究利用顺铂(DDP)、过氧化氢(H2O2)、新制癌菌素(NCS)及紫外线(UV)辐照构建了4种DNA损伤模型,并鉴定发现lnc-DUSP6在顺铂诱导DNA损伤反应中特异性上调。功能获得与缺失实验结果表明,lnc-DUSP6能显著提高顺铂诱导的DNA修复能力与细胞存活率,进而引起顺铂耐药产生。检测发现,lnc-DUSP6在顺铂耐药的A549/DDP细胞中的表达水平显著高于顺铂敏感的A549细胞,并且沉默lnc-DUSP6可有效提高A549/DDP细胞的顺铂敏感性。Lnc-DUSP6临近基因DUSP6与与顺铂敏感性密切相关,RIP结果证实,lnc-DUSP6与DUSP6直接相互作用,并且沉默lnc-DUSP6后DUSP6的表达水平显著下调,提示lnc-DUSP6可能通过与DUSP6的相互作用提高其蛋白质稳定性。此外,过表达DUSP6可显著逆转lnc-DUSP6沉默对顺铂处理后DNA修复及细胞存活的抑制作用。综上所述,本研究阐明了lnc-DUSP6在顺铂耐药中的调控机制:lnc-DUSP6通过与DUSP6相互作用增强其蛋白质稳定性,促进顺铂诱导的DNA损伤修复,从而引起顺铂耐药的产生。本论文的研究,不仅加深对顺铂耐药产生机制的理解,也为提升顺铂的临床抗肿瘤疗效提供新的策略。