中国生物化学与分子生物学报

Select

陈伟, 罗辽复

中国生物化学与分子生物学报. 2011, 27(9): 791-796.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

RNA剪接是真核生物基因表达过程中的重要环节，增加了蛋白质的多样性和基因表达的可调节性. 日益增多的研究表明，RNA剪接并不是独立的生物过程.RNA Ⅱ型聚合酶(RNA polymerase-Ⅱ, RNA Pol Ⅱ)、核小体定位和组蛋白修饰等因素都与RNA剪接过程密切相关.阐明RNA Pol Ⅱ、核小体定位和组蛋白修饰等因素在RNA剪接过程中的作用，将为剪接位点的准确识别和剪接调控机制的研究提供新思路.本文综述了RNA Pol Ⅱ、核小体定位和组蛋白修饰等因素对RNA剪接的影响以及它们在RNA剪接过程中的调控作用.

Select

单极纺锤体蛋白激酶1一个可能的新型抗肿瘤靶标

凌有国钟辉曹诚胥全彬

中国生物化学与分子生物学报. 2011, 27(9): 797-801.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

纺锤体装配检验点是有丝分裂分裂过程中一个非常重要的监督机器，其作用在于有丝分裂中期向后期转化前将所有的染色体排列到中期板上.近年来的研究表明,该检验点缺陷与肿瘤发生密切相关.单极纺锤体蛋白激酶1是纺锤体装配检验点的必需基因，存在于正常分裂细胞，并在肿瘤组织中高表达.最近研究发现,单极纺锤体蛋白激酶1的表达水平与乳腺癌恶性程度相关. 更有意思的是抑制其激酶活性或降低其蛋白水平将会导致多种肿瘤细胞的纺锤体装配检验点功能缺陷和细胞死亡.这表明,单极纺锤体蛋白激酶1是一个潜在的抗癌药物新靶标.本文对单极纺锤体蛋白激酶1如何调控纺锤体装配检验点以及其在抗肿瘤应用研究中的最新进展进行了回顾.

Select

牙本质基质蛋白1及其对骨形成的调控作用

张永英, 崔亚洲, 周小艳, 韩金祥

中国生物化学与分子生物学报. 2011, 27(9): 802-807.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP1)是一种高度磷酸化的偏酸性非胶原蛋白, 属于小整合素结合配体N端连接糖蛋白（small integrin-binding ligand, N-linked glycoprotein, SIBLINGs）家族.和SIBLINGs家族其它成员一样，DMP1基因定位于人类染色体4q21除存在于牙组织外，该蛋白还普遍分布于骨组织中.在骨组织与细胞中已发现4种DMP1的主要存在形式，即全长DMP1、57 kD C-DMP1、37 kD N-DMP1、DMP1-PG.它们的分布与功能均不相同，但对骨的正常形成均有重要意义. DMP1的氨基酸序列拥有大量的酸性结构域,携带负电荷，与钙离子有较强的结合能力.它在体外能够促进羟基磷灰石形成，并调控细胞分化,在体内参与硬组织的矿化过程.另外，DMP1的水解过程对其调控矿化的功能十分关键.人体内DMP1基因的突变可导致常染色体隐性低血磷性佝偻病.本文就近几年对DMP1基因结构与调控、蛋白结构与代谢、在骨组织与细胞中的分布及其对骨形成调控作用的研究进展作一综述.

Select

REIC/Dkk-3蛋白在肿瘤发生发展中作用

徐小燕 , 夏蒲, 杨雪, 聂小毳, 郑华川

中国生物化学与分子生物学报. 2011, 27(9): 808-811.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

REIC基因在永生化的细胞系和部分肿瘤细胞系中发现并且表达下调，在许多人的肿瘤组织中表达也减少.目前研究认为,REIC/Dkk-3表达下调可能与启动子的甲基化有关.异常REIC/Dkk-3表达所致细胞表型异常在恶性肿瘤发生和演进过程中发挥重要作用.细胞浆型和分泌型REIC与靶蛋白作用后启动细胞信号传导，但是REIC/Dkk-3的生物学功能尚未深入阐述.对REIC/Dkk-3的研究在理论上可以大大推动肿瘤病因学的发展，为肿瘤的诊断和治疗提供一个新的分子靶点，对提高肿瘤患者生存率和生存质量具有很大的促进作用.如果能研发REIC/Dkk-3抗肿瘤重组多肽及增强REIC/Dkk-3作用的化疗药物，也将为肿瘤患者治疗开辟新的途径和思路.本文就REIC/Dkk-3蛋白在肿瘤发生发展中作用进行综述.

Select

蛋白质翻译过程中的忠实性机制

谢兆辉

中国生物化学与分子生物学报. 2011, 27(9): 812-819.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

蛋白质合成的忠实性对细胞活力非常重要，否则会干扰细胞的生理过程，甚至导致疾病. 生物已经进化出多种机制以维持翻译的准确性，包括底物选择、校对和转肽后的质量控制机制.这些机制在氨基酸活化、翻译起始、延伸和终止等不同阶段发挥作用. 现在,对蛋白质合成的研究已经延伸到了其它领域，如病原体致病机制、耐药性，以及药物开发等. 本文主要综述了蛋白质合成起始、延伸和终止过程的忠实性机制，以及mRNA的质量控制方式，并对相关研究在抗生素药物及药物靶点开发方面的应用前景做了展望.

Select

Aurora 激酶A调节小鼠受精卵早期发育

许琳王国丽刘彤韩峰于秉治张杰

中国生物化学与分子生物学报. 2011, 27(9): 820-826.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

Aurora激酶是参与细胞周期调节的重要激酶，已成为肿瘤研究领域的热点．近年来有研究表明, Aurora激酶A(Aurora kinase A，AURKA)对卵母细胞减数分裂也起到重要的调节作用，但对其在哺乳动物早期胚胎发育中的研究鲜有报道．本研究利用显微注射向受精卵中导入干扰AURKA表达的质粒，观察了AURKA表达敲低对小鼠受精卵早期发育的影响，并检测丝裂原活化蛋白激酶（mitogenactivated protein kinase，MAPK）通路抑制后,小鼠受精卵卵裂及AURKA表达与活性变化．实验结果表明，干扰AURKA的表达可导致受精卵发育停滞和异常分裂．MAPK通路的抑制亦可破坏受精卵正常卵裂，并下调AURKA的蛋白表达及活性．实验结果提示,AURKA是小鼠受精卵早期发育所必需的，并与MAPK通路的激活相关．

Select

沙利度胺通过诱导G1阻滞和凋亡抑制血管内皮细胞增殖

迟晓艳曲明娟王艳华韩立亚

中国生物化学与分子生物学报. 2011, 27(9): 827-832.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

沙利度胺是一种抗血管生成药物，临床上用于治疗多种肿瘤，但其抗肿瘤血管生成机制尚不十分清楚. 本文采用MTT法观察沙利度胺对体外培养的血管内皮细胞增殖的影响. 结果发现，沙利度胺能够抑制血管内皮细胞的增殖，其IC50为16.47 μg/mL；然后采用Hoechst染色和流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期，发现沙利度胺能够诱导内皮细胞凋亡，并干扰细胞的周期，出现G0/G1期阻滞. 最后，通过Western印迹方法分析沙利度胺对血管内皮细胞Bcl-2蛋白表达的影响，发现抗凋亡的Bcl-2蛋白表达水平随沙利度胺浓度增大而降低. 初步结果提示，沙利度胺可能通过阻遏抗凋亡分子Bcl-2表达，激活诱导G1期阻滞的信号通路而抑制内皮细胞新生，从而抑制肿瘤生长. 诱导内皮细胞凋亡及G1期阻滞的具体分子机制正在研究中.

Select

共表达外源OCT4/SOX2能够激活人胚肾细胞中内源NANOG的转录

李珍珍成德高祎王华岩

中国生物化学与分子生物学报. 2011, 27(9): 833-840.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

自2006年诱导多能干细胞（iPS）技术诞生以来，采用病毒等载体进行的诱导方法已取得了成功，但是其致瘤性的影响限制了病毒载体的推广与应用，而采用非病毒载体诱导iPS细胞成为研究的热点. 本研究通过两个启动子的独立启动，构建了带有绿色荧光标记的OCT4/SOX2共表达诱导载体(pOct4/Sox2-EGFP). 将该载体转染HEK 293FT 细胞后，阳性克隆明显表达绿色荧光，并通过RT-PCR，免疫荧光等方法证明其中的转录因子OCT4和SOX2能在转染细胞中高效表达，同时诱导受体细胞中内源NANOG的转录表达. 本研究说明OCT4/SOX2共表达载体能激活NANOG基因的内源表达，暗示着非病毒不整合载体pOct4/Sox2-EGFP本身或与其它转录因子和小分子结合可用于诱导成体细胞的重编程. 因此，本研究为下一步应用质粒载体诱导体细胞重编程为iPS细胞的研究奠定了工作基础.

Select

鼻咽癌细胞系CNE2中NPCEDRG基因mRNA剪接变异体的分析

侯德富, 关勇军, 关瑞, 万恂恂, 李国庆, 欧阳咏梅, 余艳辉, 陈主初

中国生物化学与分子生物学报. 2011, 27(9): 841-850.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

NPCEDRG基因是采用基因定位候选克隆策略获得的1个鼻咽癌候选抑瘤基因. NPCEDRG在鼻咽癌细胞和组织中表达下调，重新恢复NPCEDRG基因在CNE2细胞系的表达，可部分逆转CNE2 的恶性表型. 本研究对CNE2细胞所表达的NPCEDRG基因mRNA剪接变异体克隆、鉴定，发现NPCEDRG基因至少有7个转录起始位点，其中NM_032316的TSS位于ATG上游-85 nt处,AF538150和AK094248的TSS位于-25 nt处;AF538150不存在第2外显子中6核苷酸序列（5′-TTGCAG-3′）的缺失，其CDs为516 bp，编码1种由171个氨基酸组成的蛋白质（而非GenBank中公布的CDs为510 bp，1种由169个氨基酸组成的蛋白质）. 本研究成功克隆得到1种新的NPCEDRG基因的mRNA剪接变异体V2，其TSS位于-23 nt处，其CDs为297 bp，编码1种由98个氨基酸组成的蛋白质.

Select

厚壳贻贝足丝黏附蛋白mfp-3的重组表达及黏附功能分析

李楠楠, 谭亮, 王智平, 王信超, 廖智

中国生物化学与分子生物学报. 2011, 27(9): 851-857.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

厚壳贻贝（Mytilus coruscus）中富含各种黏附蛋白分子，其中贻贝足丝蛋白3（mussel foot protein-3, mfp-3）是贻贝用以与外界基质进行黏附的主要蛋白分子.贻贝足丝中天然的mfp-3的含量低，水溶性差，因此纯化困难.本文以厚壳贻贝足丝蛋白mfp-3的cDNA序列为目的基因，用PCR法扩增Mfp-3基因,并成功构建含有多聚组氨酸标签的重组mfp-3原核表达载体pET-21a/ Mfp-3.经IPTG（isopropylthio-β-D-galactoside）诱导表达出重组蛋白，利用亲和层析和反相高效液相色谱分离纯化，获得分子量为9.18 kD的重组蛋白.经酪氨酸酶催化、玻璃包被和石英晶体微天平（quartz crystal microbalance，QCM）分析.结果表明,重组厚壳贻贝mfp-3蛋白经酪氨酸酶催化后,L-3,4-二羟基苯丙氨酸(即多巴,L-3,4- dihydroxyphenylalanine, DOPA) 含量较高并且具有较好的黏附性能.上述研究为开发以mfp-3黏附蛋白为来源的生物粘合剂奠定了良好的基础.

Select

Rac1、Rac2参与调节人单核细胞趋化和NADPH氧化酶活性

谭运年成海恩金亚平

中国生物化学与分子生物学报. 2011, 27(9): 858-863.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

为了探讨小分子GTP酶蛋白Rac1和Rac2在人单核细胞中趋化迁移以及还原型辅酶II（NADPH）氧化酶活性中的作用，采用小分子干扰siRNA对人单核细胞中RAC1、RAC2分别进行特异性抑制，采用实时定量PCR技术、免疫印迹技术在RNA和蛋白质水平上确认抑制效果，使用甲酰三肽(formyl-met-leu-phe，fMLP)、人单核细胞趋化因子（monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1）诱导单核细胞趋化；用血清调理的酵母多糖（serum opsonized zymosan,ZOP)、佛波酯（phosphomolybdic acid, PMA）激活单核细胞NADPH氧化酶活性，诱导活性氧(Reactive oxygen species, ROS)产生，以此对Rac1和Rac2作用进行研究. 结果表明，小分子干扰siRNA能够在mRNA水平和蛋白质水平分别有效抑制目的基因表达；使用Chamber assay方法发现，仅Rac1参与了fMLP、MCP-1诱导的人单核细胞趋化. Rac激活实验确证，Rac1参与MCP-1诱导的趋化；细胞色素C还原法表明，Rac1和Rac2均参与PMA和ZOP诱导人单核细胞ROS生成. 在人单核细胞中，RAC1和RAC2基因沉默模型的成功建立以及初步研究显示，Rac1和Rac2的不同作用结果将为深入研究它们在人单核细胞中的功能奠定了良好基础.

Select

利用酵母双杂交筛选豌豆叶绿体镁离子螯合酶D亚基相互作用蛋白

余静, 罗韬, 罗美中*

中国生物化学与分子生物学报. 2011, 27(9): 864-872.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

植物叶绿体镁离子螯合酶是四吡咯化合物生物合成途径中合成叶绿素分支(镁分支)的第一个酶，它催化镁离子螯合到原卟啉IX中，形成镁原卟啉IX. 镁离子螯合酶是1个由3个亚基H、D和I组成的多亚基酶，3个亚基均由细胞核编码，进入叶绿体发挥功能.该酶不仅控制着叶绿素的合成，其各个亚基还具有很多其它的功能：H亚基既是ABA受体，又参与叶绿体到细胞核的反向信号传导；D亚基也与叶绿体到细胞核的反向信号传导有关. 本文利用酵母双杂交技术，将编码豌豆镁离子螯合酶D亚基的cDNA片段构建到诱饵载体pGBKT7中，分别用共转化的方法筛选豌豆叶片细胞核编码的均一化cDNA文库和用Mating的方法筛选豌豆叶片叶绿体编码的均一化cDNA文库，共得到121个候选克隆，其中有60个克隆共编码21个叶绿体蛋白质，19个来自于核基因编码，2个来自于叶绿体基因编码. 这些候选蛋白参与叶绿素合成、卡尔文循环、叶绿体蛋白质翻译和叶绿体基因转录等多个代谢过程. 酵母点对点和GST-pull down对其中的4个蛋白做了进一步的验证.这些结果将为D亚基的功能研究提供进一步的线索.

Select

采用报告基因检测HSV-1潜伏相关启动子在神经细胞的特异性激活

郭景霞李永鑫朱慧史茜张彩荣朱红娟马正海

中国生物化学与分子生物学报. 2011, 27(9): 873-878.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

1型单纯疱疹病毒（herpes simplex virus type 1, HSV-1）潜伏相关转录本启动子（latency associated transcripts promoter，LATP）在病毒于神经组织中潜伏感染期间保持活性.本研究利用PCR技术扩增获得HSV-1的LATP，并将LATP分别插入增强型绿色荧光蛋白 (enhanced green fluorescent protein, EGFP) 基因和荧光素酶基因前，获得真核表达质粒pcDNA/LATP/EGFP和pGL3/LATP/Luc. pcDNA/ LATP/EGFP转染293T细胞后，检测到绿色荧光蛋白基因的表达，表明LATP具有启动子活性，其活性低于PCMV. 继而以pcDNA/LATP/EGFP和pGL3/LATP/Luc分别转染HeLa细胞、Eca109细胞、U251细胞和SK-N-SH细胞.结果表明,绿色荧光蛋白基因和荧光素酶基因在U251和SK-N-SH两种神经细胞中表达水平极显著(P＜0.01),高于其在HeLa和Eca109两种非神经细胞中的表达.说明LATP能够驱动基因在神经组织细胞中高效表达，可作为神经组织特异性表达元件.

Select

Janus激酶1/胞外信号调节激酶通路参与C反应蛋白诱导的心肌细胞MMP-10活性上调

崔传珏魏英杰史强刘晓艳白媛媛

中国生物化学与分子生物学报. 2011, 27(9): 885-888.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

为探讨心肌细胞中Janus 激酶1（JAK1）在C反应蛋白（CRP）诱导的基质金属蛋白酶（MMP）-10活性上调过程中的作用，本研究以炎症细胞因子CRP诱导MMP-10上调的原代乳鼠心肌细胞为研究对象，使用JAK1的特异磷酸化抗体，用Western 印迹技术检查JAK1的磷酸化水平的激活情况.应用Western 印迹技术和酶谱法分别检测胞外信号调节激酶（ERK）的磷酸化水平和MMP-10的活性变化.实验分为4组：对照组，CRP组，CRP+抑制剂组和抑制剂组. 结果显示，磷酸化的JAK1在CRP刺激后1/12 h即可出现，在1 h达到高峰，而总的JAK1不改变；JAK1抑制剂piceatannol可以使磷酸化的ERK水平减弱，也可以使MMP-10的活性明显降低（P <0.01）. 研究结果提示，JAK1是通过激活ERK，从而上调MMP-10的活性，为心力衰竭提供了一个可能的治疗靶点.

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

过刊目录

模态框（Modal）标题

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

过刊目录