过刊目录

  • 全选
    |
    综述
  • 卢杰,张珈敏,林美娟,曹旭,胡远扬
    中国生物化学与分子生物学报. 2007, 23(07): 513-518.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    真核生物大多数蛋白质合成采用了依赖帽子结构的翻译起始方式.但一组缺乏帽子构的RNA病毒的蛋白质合成起始是依赖其5′端非翻译区(untranslated region,UTR)翻译调控的顺式作用元件——内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site, IRES).它 们能够在一些反式作用因子的辅助下,招募核糖体小亚基到病毒mRNA的翻译起始位点.前,依赖IRES元件翻译起始的RNA病毒在哺乳动物,无脊椎动物及植物中均有发现.因此,对RNA病毒IRES元件的深入研究,不仅有助于阐明相关疾病的发生机理,而且为工业应用和疾病治疗提供借鉴意义.本文对RNA病毒IRES元件发现、分类、结构与功能等作了综述.
  • 秦成峰,秦鄂德
    中国生物化学与分子生物学报. 2007, 23(07): 519-524.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    TAT蛋白转导域是源自人类免疫缺陷病毒Tat蛋白的一段碱性氨基酸多肽,能够将与之共价连接的多肽、蛋白、核酸等生物大分子快速而高效地转导入细胞内部,在药物转运和疾病治疗等领域有着巨大的应用潜力.TAT蛋白转导域首先通过电荷相互作用吸附于细胞膜,然后通过脂筏介导的巨胞饮作用进入细胞.随着体外研究的不断成熟,应用TAT蛋白转导域治疗人类肿瘤、卒中、炎症等疾病的动物模型也获得了成功,TAT蛋白转导域进入临床指日可待.
  • 李淑晶,程智逵,伍会健
    中国生物化学与分子生物学报. 2007, 23(07): 525-530.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    许多调控基因转录的重要蛋白质能被SUMO (small ubiquitin-related modifier)化修饰,这些蛋白质包括转录因子,转录辅助因子和染色质修饰酶.SUMO化修饰对底物蛋白的活性产生影响,在大多数情况下,与转录活性的抑制有关.最近,对SUMO化调控转录的机制有了新的认识,认为SUMO化的一个重要作用是促进转录因子与转录抑制因子之间的相互作用.另一方面,已经发现转录共抑制因子HDAC (组蛋白去乙酰化酶)可以作为SUMO化的底物、效应因子和调控因子,说明乙酰化和SUMO化之间复杂的相互作用对基因转录调控起着非常重要的作用.
  • 研究论文
  • 宁云山,李妍,周明乾,周宏伟,王小宁,曾溢滔
    中国生物化学与分子生物学报. 2007, 23(07): 537-541.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    人血小板生成素(thrombopoietin,TPO)基因组包括6个外显子和5个内含子,内含子在其表达过程中可能扮演着重要作用.为了研究人TPO基因组中不同内含子对TPO表达的影响,构建可在转基因动物乳腺中高水平表达人TPO的乳腺特异性表达质粒.本研究以65 kb的山羊β-casein启动子为调控元件,构建了包括人TPO cDNA(pTPOA)、TPO intronⅠ-TPO cDNA (pTPOB)、ΔTPO intronⅠ-TPO cDNA (pTPOC)、TPO intronⅤ-TPO cDNA (pTPOD)和TPO gDNA (pTPOE)等5种TPO乳腺特异性表达质粒,并在人乳腺细胞HC-11细胞上进行了瞬间表达研究.在转染48 h后,通过双抗体夹心的ELISA方法定量分析上述质粒在HC-11细胞上的表达水平.结果表明,含有内含子Ⅴ的 pTPOD的表达量最高,而含有整个基因组TPO的pTPOE表达水平最低.为了进一步证实pTPOD可在乳腺细胞中高水平表达,将pTPOD经脂质体包埋后注射到泌乳期山羊的乳腺中.结果显示,在山羊乳汁中可连续14 d检测到人TPO的表达.上述实验证实,人TPO基因组中的内含子V可显著提高TPO在HC-11细胞内的表达水平,并提示内含子Ⅴ中可能含有特殊的调控序列.
  • 信息交流
  • 中国生物化学与分子生物学报. 2007, 23(07): 541-541.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    自从20世纪30年代开始,科学家就已知道小鼠和其他动物喂饲低热量但营养完全的饮食时, 其寿命可延长30%~50%.但限制热量对人类来说是否同样可以延年益寿尚属未知.为了取得成功延长人类寿命的证据,科学家们化了10多年时间.不过,科学家现在已证明人类的低热量饮食经历了许多在小鼠研究的报道中所述及的细胞变化.这些细胞变化是否能延长人寿命尚未能确定.当人到老年,称为线粒体的能量转化细胞器的数量大为减少,并产生大量有害的副产品,称为自由基.许多科学家假定,由这些副产品造成的DNA损伤可引起老年人的慢性疾病,如癌症.研究者随机选定了36个超重的人,将他们分成3组.第1组人规定的饮食热量比开始试验时减少25%.第2组人规定的饮食热量比开始试验时少12.5%,并进行运动,减去另存的12.5%的热量.以上2组人都有足够的营养.第3组人吃维持体重的饮食.研究者在2007年3月的PLoS Medicine上作了报道.在试验的6个月期间,限制热量饮食的2组人的肌肉细胞中,线粒体数量增加,而且DNA损伤减少60%.线粒体似乎变得更为年轻而有效.2组限制热量饮食的人也表现为与线粒体功能有关的数个基因活性增加.科学家始终认为,这些基因中的SIRT1是动物对限制热量的反应的关键基因.有科学家说,这不仅是一项上佳的研究,实际上也是我们所能做到的唯一的研究.有几家公司准备开发活化SIRT1的药物.从线粒体中找到SIRT1基因是值得兴奋的,但对该项研究结果可做的阐释是有限的,因为该项研究的参与者都是超重的人,而超重的人会加速组织老化.研究者只选定部分超重的人做试验,因为超重的人可能会接着便严格控制饮食.该研究组计划做一个试验,该试验由体重正常的人参与,并持续2年.
    (李潇摘译自P.Barry:Science News,March 10,2007,Vol171,p.147)
  • 研究论文
  • 杨西建,丛丽娜,路美玲,刘恒,朱蓓薇
    中国生物化学与分子生物学报. 2007, 23(07): 542-547.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    通过RT-PCR 和 RACE PCR技术,从海参(Stichopus japonicus)体壁中克隆得到一种溶菌酶基因(GenBank:EF036468).生物信息软件分析表明,其中全长cDNA为 713 bp,5′非编码区(UTR)246 bp,3′UTR 29 bp,开放阅读框438 bp,编码145个氨基酸,包括溶菌酶成熟肽124个氨基酸和信号肽21个氨基酸.对海参溶菌酶与多种无脊椎动物的c、g和i型溶菌酶进行分析比较,发现它与i型溶菌酶有较高的同源性,并具有i型溶菌酶高度保守的2个活性位点,即Glu34和Ser50.活性位点附近具有i型溶菌酶的一段特有的氨基酸保守序列MDVGSLSCG(P/Y)(Y/F)QIK,所以推断克隆的海参溶菌酶为i型.另外,通过搜索蛋白保守结构域数据库,发现海参溶菌酶与医用水蛭失稳酶相似性最高,并且这2个酶的三级结构模型也极其相似.因此推测,海参i型溶菌酶具有双功能特性,既能作用于细菌细胞壁的糖苷键使细胞裂解,又具有失稳酶的一些生化功能,能够水解纤维蛋白,这些特点在海参自溶过程中发挥重要的作用.
  • 郑丽端,童强松,杨渝珍,侯晓华,杨秀萍,董继华
    中国生物化学与分子生物学报. 2007, 23(07): 548-553.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    为克隆人类抵抗素样分子β(resistin-like molecule beta, RELMβ)基因的上游启动子序列,并观察其不同截短片段的启动子活性,以人类基因组DNA为模板,通过PCR扩增方法获得-871~+50 bp、-729~+50 bp、-471~+50 bp、-438~+50 bp、-371~+50 bp大小的RELMβ启动子片段,将其定向克隆入pGL3-Basic载体,构建荧光素酶报告基因载体,并制备转录因子CDX-2结合位点的突变或缺失体.在阳离子脂质体的介导下,报告基因载体分别瞬时转染人胚肾293细胞、结肠癌HCT116和SW480细胞、宫颈癌HeLa细胞.结果发现,各RELMβ启动子片段在293、HCT116、SW480细胞中均有活性,但在HeLa细胞中活性缺失;-471~-438 bp区存在RELMβ启动子的核心调控元件.针对该区域CDX-2转录因子结合位点进行突变,能导致RELMβ启动子活性显著降低;凝胶电泳迁移率实验表明,该区段能结合CDX-2.结果提示,成功克隆了具有活性的RELMβ启动子序列,CDX-2为其重要的转录因子,为研究RELMβ基因的转录调控机制奠定了实验基础.
  • 章倩倩,刘松财,戴建威,任晓慧,,张永亮,
    中国生物化学与分子生物学报. 2007, 23(07): 554-559.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    构建分别含有CMV、肌肉特异启动子SP及双启动子CMV-SP的真核报告基因EGFP表达载体(pCMV-EGFP、pSP-EGFP及pCMV-SP-EGFP)和生长激素释放因子(GRF)表达载体(pCMV-GRF、pSP-GRF和pCMV-SP-GRF).将3种EGFP表达质粒分别注射至小鼠骨骼肌.注射后1周、2周、3周以及4周时,分别提取肌肉组织RNA,应用半定量RT-PCR检测报告基因(EGFP)的表达量,发现pCMV-SP-EGFP组EGFP表达量显著高于pCMV-EGFP组和pSP-EGFP组(P<0.01);经荧光检测得到了较强的荧光信号.将3种GRF表达质粒分别注射至小鼠骨骼肌,在注射后每10 d记录小鼠累积增重,采血并用RIA法测定血清胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)浓度,结果pCMVSP-GRF组累积增重、IGF-I浓度分别高于生理盐水组、pCMV-GRF组和pSP-GRF组(P<0.05).结果表明:CMV与SP两种启动子组合,在小鼠骨骼肌内使外源基因表达效率提高.本研究为提高外源基因在肌肉组织的表达提供了新的途径.
  • 于春晓,刘闻闻,吴伟芳,陈蔚文,张鹏举,张琦,姜安丽,张建业
    中国生物化学与分子生物学报. 2007, 23(07): 560-565.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    NKX3.1是前列腺特异表达的同源盒基因,在前列腺癌的发生发展中起重要作用,而在前列腺癌进展中常会发生p53的基因突变.为研究两者之间的关系,构建NKX-3.1启动子(1 040bp)-荧光素酶报告基因重组质粒(pGL3-1040)及其缺失突变体,瞬时转染前列腺癌细胞LNCaP.通过荧光素酶表达活性分析,检测p53过表达对NKX3.1启动子活性的影响.结果表明:p53在LNCaP细胞中过表达可明显抑制NKX3.1启动子活性;RT-PCR及Western印迹检测p53过表达对NKX3.1表达的影响.结果表明,p53过表达可以明显抑制同源盒基因NKX3.1的表达.通过TRANSFAC软件分析,在NKX3.1基因上游-526至-507区存在一个p53反应元件的5′核心序列.缺失pGL3-1040中的p53反应元件核心序列并不能消除p53对NKX3.1启动子的抑制作用,表明p53不是通过p53反应元件直接抑制NKX3.1启动子活性.进一步通过5′缺失突变分析,发现NKX3.1启动子-140~+8 bp区仍受p53负调控.此148 bp区域中含有一个Sp1和一个CREB元件,瞬时共转染Sp1表达载体或CREB表达载体的结果表明,p53并不是通过与Sp1或CREB相互作用对NKX3.1启动子发挥抑制作用的.上述结果表明,p53过表达可以抑制同源盒基因NKX3.1启动子活性,下调NKX3.1基因的转录,其调控机制有待进一步研究.
  • 韩为东,伍志强,臧丽,赵亚力,孟元光,李琦,司艺,郝好杰,母义明
    中国生物化学与分子生物学报. 2007, 23(07): 566-573.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    LRP16是一个雌激素(E2)通过受体α(ERα)诱导表达的靶基因,LRP16不仅促进人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,而且促进细胞的侵袭生长,但对LRP16作用的分子机制尚不清楚.首先,检测到LRP16表达缺陷明显削弱了MCF-7细胞对E2的反应性增殖能力;采用Northern 印迹与Western印迹法,进一步检测到抑制LRP16表达,明显损害了ERα靶基因对E2诱导上调的反应性,这些基因包括了cyclin D1, c-myc, c-fosMTA3, pS2和维甲酸受体α基因(RARα)等;以上结果提示,LRP16参与了ERα介导的信号途径.将ERα模式启动子报告基因3×ERE-TATA-luc,ERα以及LRP16表达载体共转染MCF-7与HeLa细胞.结果发现,LRP16增强了ERα对报告基因的转录激活,并呈现对LRP16的剂量依赖性;进而采用GST-pull down以及免疫共沉淀方法证实了LRP16与ERα之间的直接相互作用,该作用不依赖于E2的存在,但可被E2增强;采用哺乳动物双杂交方法进一步证实了ERα与LRP16相互作用位点存在于A/B区的激活功能域-1(AF1).以上结果表明,LRP16是ERα的一个共激活因子,通过相互作用,LRP16增强了ERα介导转录活性.该研究为LRP16促进ERα阳性乳腺癌细胞增殖与侵袭生长提供了合理的分子解释.
  • 蒋菊香,,马珍妮,,胡晓慧,董宁征,白霞,吴士良,阮长耿
    中国生物化学与分子生物学报. 2007, 23(07): 574-580.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    为探讨不同恶性血液病中膜型基质金属蛋白酶(memberane-type matrix metalloproteinases, MT-MMPs)和基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)的表达差异,用半定量RT-PCR检测了13株不同谱系恶性造血细胞株中MT-MMPs和MMP-2的mRNA表达差异.明胶酶谱法分析各细胞株MMP-2的酶活,并用流式细胞术检测了MT1-MMP蛋白的表达,用SPSS10.0分析了各基因的表达与细胞来源的相关性和各基因相互间表达的相关性.结果提示,各种MT-MMPs和MMP-2在13株细胞中呈现不同的表达谱,其中MT2、MT4、MT1-MMP和MMP-2表达较广泛,而MT3、MT5、MT6-MMP在检测的细胞株中较少表达.统计分析显示,MT-MMPs和MMP-2的表达与细胞的来源无明显的相关性(P>0.1),而MT1-MMP和MMP-2的表达有相关性(P<0.05).同时也发现,MT3-MMP和MT5-MMP的表达有相关性(P<0.05).MT-MMPs在恶性造血细胞中的表达差异,提示它们在不同类型的血液系统肿瘤发展中发挥各自独特的作用.另外,MT1MMP和MMP-2,MT3-MMP和MT5-MMP之间表达的相关性提示,它们在功能上密切相关.
  • 信息交流
  • 中国生物化学与分子生物学报. 2007, 23(07): 580-580.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    相同的蛋白质研究者指出,基因序列中个别碱基的转换可以修饰该基因所编码的蛋白质,即使转换并未改变由哪一个氨基酸组成蛋白质.该发现搅乱了一个中心观点,即由相同的氨基酸制造的蛋白质是完全相同的.DNA含有称为核苷酸的组分,它由A、T、C、G四个字母符号表示.这些字母中的3个字母组成1个密码子,密码子中任何1个字母发生阻断时,便会向制造细胞蛋白质的机器发出信号,并加上1个特别的氨基酸来延长蛋白质的链.在20个氨基酸中,每个氨基酸都能由两个或两个以上的密码子编码.生物学家长期以来认为,一个密码子转换成另一个密码子时,不会改变最终蛋白质的结构,只要这两个密码子都是指导制造蛋白质的机器插入相同的氨基酸.然而,研究者的实验使他们怀疑这种沉默的突变会导致极大的差异.研究者研究了为什么某些癌对化疗不起反应.他们发现有一个小泵,称为P-糖蛋白,位于细胞表面,可以将药物从细胞中推出去.某些药物对癌无效是因为其具有某种形式的P-糖蛋白.研究者注意到个别癌症患者的泵有时表现出不同的功能,尽管这些泵的蛋白质由完全相同的氨基酸组合而成.为了研究沉默的突变是否起作用,研究者研究了称为MDR1的基因的不同变体,该基因制造P-糖蛋白.MDR基因的这些变体含有制造相同氨基酸的不同密码子,研究者将该变体插入人或猴的细胞后,正常时不会制造出该泵.研究者发现,特殊的密码子组合会影响细胞泵出不同癌症药物的速度.有一个突变体的密码子称为C3435T,似乎特别重要.该密码子制造异亮氨酸,正如其副本,即该泵的基因以大多数通常形式制造异亮氨酸一样.然而,细胞具有组合MDR1的两种突变的典型密码子,一种在有效的平均水平之上泵出某些药物,而另一种则在有效的平均水平之下泵出某些药物.研究者在即将出版的2006年12月21日的Science上报道,他们推测一个典型的密码子会影响该细胞装配P-糖蛋白的速度.改变了一种蛋白质的制造速度,便塑造了该蛋白质稍有差异的最终形态.有人指出,含有相同氨基酸的蛋白质的差异可能非常普遍,只是我们现在还未完全认识.
    (李潇摘译自C.Brownlee:Science News Doc 23.9.30,2006,Vol.170,p.
  • 研究论文
  • 龚小卫,李涛,杨婷,李煜生,魏洁,邓鹏,姜勇
    中国生物化学与分子生物学报. 2007, 23(07): 581-585.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    为研究HSP27的磷酸化与其细胞内定位之间的关系,利用定点突变和DNA重组技术构建EGFP融合的HSP27野生型和第82位丝氨酸突变体的真核表达载体并转染NIH 3T3细胞,观察两者在静息状态和亚砷酸盐刺激下的细胞内定位情况.利用p38 MAPK特异性抑制剂SB203580预处理细胞后,观察对HSP27磷酸化和细胞内定位的影响.结果发现,野生型HSP27受到NaAsO2刺激后移位入核,而其突变体HSP27(S82A)不能入核.同时,SB203580的预处理使HSP27的磷酸化和NaAsO2诱导的移位入核都被阻断.这些结果表明,p38介导的HSP27磷酸化在其细胞内定位中具有重要作用
  • 戴雪,孙雅煊,姜招峰
    中国生物化学与分子生物学报. 2007, 23(07): 586-591.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    老年斑中存在大量β淀粉样蛋白(β-amyloid, Aβ)是老年痴呆症(Alzheimer′s disease, AD)的重要病理特征.大量数据表明,Aβ上具有与过渡态金属离子共价结合的位点,二者能结合成为寡聚复合物. Aβ1-40Cu(Ⅱ)复合物通过Cu2+的还原催化O2产生H2O2但反应机制不清.本文尝试以天然抗氧化剂维生素C(VC)来对抗Aβ1-40及Aβ1-40Cu(Ⅱ)复合物产生的H2O2对原代培养的神经细胞的毒性.结果表明,VC能够起到显著的保护作用,其有效浓度为1mmol/L.本文用胞外乳酸脱氢酶泄漏量和H2O2生成量的数据证实了细胞存活率(MTT实验)的实验结果.这些结果表明,Aβ1-40Cu(Ⅱ)复合物能够释放更多的H2O2,引发细胞膜破裂并最终引起细胞死亡.加入VC后,神经元受到的损伤较轻,提示VC在保护细胞免受氧化损伤方面发挥了重要作用.
  • 信息交流
  • 中国生物化学与分子生物学报. 2007, 23(07): 591-591.
    摘要 ( )   可视化   收藏
    顾问(Advisors)
    郑 集ZHENG Ji 张昌颖 ZHANG Chang-Ying 邹承鲁ZOU Cheng-Lu(Chen-lu TSOU)
    主 编(Editor-in-Chief)
    贾弘禔JIA Hong-Ti
    副主编(Associate Editors-in-Chief)
    昌增益 CHANG Zeng-Yi 李 林 LI Lin 尚永丰 SHANG Yong-Feng
    孙志贤 SUN Zhi-Xian 王琳芳 WANG Lin-Fang 王志珍 WANG Zhi-Zhen
    杨福愉 YANG Fu-Yu 查锡良 ZHA Xi-Liang
    编 委(Members of the Board,alphabetically)
    昌增益CHANG Zeng-Yi 陈清西CHEN Qing-Xi 耿运琪 GENG Yun-Qi
    顾 军 GU Jun 杭海英HANG Hai-Ying 赫荣乔 HE Rong-Qiao
    黄 力 HUANG Li 贾弘禔JIA Hong-Ti 蒋澄宇 JIANG Cheng-Yu
    焦炳华 JIAO Bing-Hua 柯 扬 KE Yang 金由辛 JIN You-Xin
    李伯良 LI Bo-Liang 李 刚 LI Gang 李根喜 LI Gen-Xi
    李桂源 LI Gui-Yuan 李 林 LI Lin 李 宁 LI Ning
    李载平 LI Zai-Ping 梁爱华 LIANG Ai-Hua 梁宋平 LIANG Song-Ping
    林其谁 LIN Qi-Shui 刘德富 LIU De-Fu 刘德培 LIU De-Pei
    刘国琴 LIU Guo-Qin 刘进元 LIU Jin-yuan 缪时英 MIAO Shi-Ying
    彭景(木便)PENG Jing-Pian 钱关祥QIAN Guan-Xiang 强伯勤QIANG Bo-Qin
    屈良鹄 QU Liang-Hu 饶子和 RAO Zi-He 施蕴渝 SHI Yun-Yu
    阮康成RUAN Kang-Cheng尚永丰SHANG Yong-Feng 寿成超SHOU Cheng-Chao
    孙志贤SUN Zhi-Xian 王嘉玺WANG Jia-Xi 王琳芳WANG Lin-Fang
    王志珍WANG Zhi-Zhen 魏 群WEI Qun 温进坤WEN Jin-Kun
    许根俊XU Gen-Jun 杨福愉YANG Fu-Yu 杨克恭YANG Ke-Gong 杨晓明YANG Xiao-Ming 药立波YAO Li-Bo 姚仁杰YAO Ren-Jie 叶棋浓YE Qi-Nong 袁勤生YUAN Qin-Sheng 查锡良ZHA Xi-Liang
    张 今 ZHANG Jin 张乃蘅ZHANG Nai-Heng 张旭家ZHANGXu-Jia
    张 翼ZHANG Yi 周春燕ZHOU Chun-Yan 周海梦ZHOU Hai-Meng 周筠梅ZHOU Jun-Mei 朱大海ZHU Da-Hai 朱卫国ZHU Wei-Guo
    朱玉贤ZHU Yu-Xian
    特邀编委(Specially Invited Members of the Board) 吴 瑞 Ray WU(USA) 于宽仁Robert K.YU(USA)
  • 研究论文
  • 刘希成,梁恒,田真,刘颖,陈阳,张霖
    中国生物化学与分子生物学报. 2007, 23(07): 592-599.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    利用双向电泳(2-DE)优化分离了除去高丰度蛋白(白蛋白和IgG)的老年体虚肾阳虚患者(以健康组为参照)的血清样本,对比分析pH 4~7范围的2-DE谱图,肾阳虚患者和参照组的平均蛋白点分别为(393±32)和(455±19)个. 其中肾阳虚证候表达量上调2倍(P<0.05)以上的蛋白点有26个,下调2倍以上的有33个. 用质谱获得上述差异蛋白的肽质量指纹图谱,并经数据库检索共鉴定出了49种差异蛋白质,其中有10种在肾阳虚血清中特异表达,有6种在健康组血清中特异表达. 蛋白功能分析发现,其中33种蛋白质的差异表达与肾阳虚证密切相关. 蛋白质TCRβ及transthyretin的蛋白印迹实验验证了2-DE 的结果. 该研究结果为阐明中医肾阳虚证的机理提供了一条新途径.
  • 刘翳雯,何怡青,杨翠霞,龙莉,高锋
    中国生物化学与分子生物学报. 2007, 23(07): 600-604.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    近年来,透明质酸寡糖片段(hyaluronan oligosaccharides, o-HA)的生物学活性引起国外学者的重视,因为o-HA具有一定的生物学活性,如参与免疫调节、刺激新生血管形成等.本研究建立一种经济、简便的ANTS(8-氨基奈-1,3,6-三磺酸)荧光标记电泳对透明质酸寡糖片段大小鉴定的新实验方法.实验原理为,ANTS能与糖分子发生还原反应,在反应时提供3个电子和1个荧光基团,通过高浓度PAGE分离,在特定波长下呈现颜色反应.采用酶消化法得到不同分子量大小的o-HA片段,测得不同片段大小的o-HA聚合度,分别与高效液相色谱(high-performance liquid chromatography, HPLC)和静电喷雾电离质谱(electrospray ionization mass spectrometry, ESI-MS)进行比较,结果吻合.研究提示,用荧光标记电泳法分析寡糖分子量,操作简单、设备低廉、灵敏度较高且检测速度快,是一种检测鉴定寡糖分子的较好方法.