中国生物化学与分子生物学报

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邹承鲁

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 351-354.

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１分子酶学１．１结构研究截至１９９９年１月在Ｂｒｏｏｋｈａｖｅｎｐｒｏｔｅｉｎｄａｔａｂａｎｋ中已有的８０００多个结构中，有４８００个是酶的结构，其中绝大部分是晶体结构，但用ＮＭＲ方法解出的结构正在迅速增长．多标记和多维技术的发展使得用ＮＭＲ方法解出...

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睾丸特异抗原C_2B细胞抗原决定簇的定位

王桂玉,梁志国,Ａ．Ｏ．ＰＡＴＲＩＣＩＡ,Ｓ．ＴＥＫＵＲ,ＥｒｗｉｎＧＯＬＤＢＥＲＧ

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 355-358.

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免疫性不育病人的血清（ＩＰＳ）能１００％地抑制人体外受精．用该血清筛选人睾丸ｃＤＮＡ基因表达文库，发现了一种新的睾丸特异抗原（称作Ｃ２）．通过ＤＮＡ顺序研究，并与基因库中的有关同源性基因数据进行比较，证实Ｃ２是一个新的特异蛋白．Ｃ２基因仅与睾丸组织的ｍＲＮＡ杂交．该克隆在大肠杆菌中所表达的融合蛋白能够被３个不同的不育病人血清识别．利用嵌套缺失和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹的方法研究其抗原决定簇定位，发现Ｂ细胞抗原决定簇在羧基端２９个氨基酸范围内．用ＧＣＧ软件分析该抗原的氨基酸的亲水性和疏水性以及其存在于蛋白表面的可能性，确定其中的１５个氨基酸为抗原决定簇所必需，并合成了多肽

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人PSP94全长cDNA的获得及PSP94-TNF~Δ融合蛋白的构建

刘庆鑫,刘丽,刘建香,刘立忠,王颖,谢宝树,冷爱军

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 359-364.

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利用ＲＴ－ＰＣＲ从人肥大前列腺组织钓取９４个氨基酸的人前列腺分泌蛋白（ＰＳＰ９４）全长ｃＤＮＡ，序列分析结果与文献报道的完全一致．将ＰＳＰ９４成熟肽与人ＴＮＦα衍生物（ＴＮＦΔ）通过Ｌｉｎｋｅｒ－ＳＡＰＧＴＰ在基因水平上融合成５′ＰＳＰ９４－ＴＮＦΔ，融合基因ＤＮＡ序列分析结果与设计的相符合．５′ＰＳＰ９４－ＴＮＦΔ在大肠杆菌中表达产物分子量约为３１ｋＤ，表达量约占菌体总蛋白量的３５％．以Ｌ９２９细胞和人前列腺癌细胞株ＰＣ－３为靶细胞进行细胞毒分析结果表明，５′ＰＳＰ９４－ＴＮＦΔ融合蛋白既具有ＴＮＦ的细胞毒活性，又具有对前列腺癌细胞ＰＣ－３的杀伤作用

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北京医科大学基础医学院生物医学教学实验中心1999年开始全面启动

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 364-364.

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根据教育部《世界银行贷款高等教育发展项目实验教学建设方案》的要求和《北京医科大学世界银行贷款高等教育发展项目实验室建设方案》的安排，基础医学院生物医学教学实验中心的建设将在１９９９年全面启动。生物医学教学实验中心由机能实验室（生理学、病理生理学和药理...

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茶尺蠖核型多角体病毒多角体蛋白基因核苷酸序列及其在Baculoviridae中的地位(英文)

张传溪,胡萃,吴祥甫

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 365-371.

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茶尺蠖核型多角体病毒（ＥｏＳＮＰＶ）基因组的ｐｏｌｈ和ｅｇｔ基因区约１４．２ｋｂ的酶切图谱被构建．ｅｇｔ基因位于ｐｏｌｈ基因上游约４．８ｋｂ处，但转录方向与ｐｏｌｈ基因相反．ＥｃｏＲⅤ－Ｌ片段ｐｏｌｈ基因及其旁侧的１１２５核苷酸序列被测定．ｐｏｌｈ基因编码区长７３８核苷酸，可编码２４６氨基酸的多肽．起始密码子ＡＴＧ上游是一个富含ＡＴ（ＡＴ占７１．２％）的启动子区，在－５２核苷酸处有杆状病毒晚期基因启动子转录起始基序ＡＴＡＡＧ．在终止密码子下游２０８核苷酸有一个ｐｏｌｙ（Ａ）信号，ＡＡＴＡＡＡ．但ＥｏＳＮＰＶｐｏｌｈ基因起始密码子ＡＴＧ相邻核苷酸序列为ＧＴＡＡＴＧＴ，其－３是个Ｇ，这与已知的１６种其它杆状病毒ｐｏｌｈ基因－３位置均是Ａ不相同．在分析了ＥｏＳＮＰＶ和ＨａＳＮＰＶ多角体蛋白基因核苷酸序列的基础上，通过ＭＡＬＩＧＮ程序，比较了目前已发表的２６种杆状病毒包涵体蛋白的序列，ＥｏＳＮＰＶ与黄杉毒蛾核型多角体病毒（ＯｐＳＮＰＶ）的同源性为最高，核苷酸序列的同源性为８３．０％，氨基酸序列达９４．７％；与其它２０种鳞翅目ＮＰＶ的同源性也很高，核苷酸序列同源性为７２．６％～８１．９％，氨基酸序列为８３．７％～９３

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胶质细胞源神经营养因子cDNA全序列的克隆及其生物学功能的研究

段峰海,张瑛,夏另朝,邱蓉,邓巍,李金照,陈燕

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 372-377.

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为了研究ＧＤＮＦ在神经系统中的生物学功能，通过ＲＴ－ＰＣＲ方法从大鼠睾丸总ＲＮＡ中扩增出ＧＤＮＦｃＤＮＡ全序列，序列分析表明与ＧｅｎＢａｎｋ中的顺序完全相同．将ＧＤＮＦｃＤＮＡ以非融合方式连接在真核表达载体ｐＥＧＦＰ－ＮⅠ的绿色荧光蛋白的上游，在ＣＭＶ启动子控制下表达．通过绿色荧光蛋白报告基因的表达表明ＧＤＮＦｃＤＮＡ能在真核细胞ＨｅＬａ中很好表达．采用裸ＤＮＡ转染方法研究ＧＤＮＦ对损伤的坐骨神经的修复作用，在雏鸡出生后３ｈ切断其右侧坐骨神经，将ｐＥＧＦＰ－ＧＤＮＦ与Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ的混合物注射到坐骨神经切断位点附近肌肉内，５ｄ后追补一次．２０ｄ后进行实验检测，观察到ＧＤＮＦｃＤＮＡ的转染阻止了切断神经侧的腰脊髓内［Ｌ４－Ｌ６］运动神经元的大量死亡，并显著促进了切断坐骨神经的再生．

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人血小板生成素重组载体的构建与体外表达

韩安平,陆爱丽,伏爽,王申五,侯纬敏,王德炳

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 378-382.

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应用基因克隆技术，以人ＴＰＯｃＤＮＡ为目的基因，构建真核细胞表达重组体ＶＲＴＰＯ，藉脂质体将其转染于ＮＩＨ３Ｔ３细胞，应用ＰＣＲ、ＲＴ－ＰＣＲ及Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹等技术对其转染及表达情况进行鉴定．结果表明：ＶＲＴＰＯ构建成功，在ＮＩＨ３Ｔ３细胞可表达人ＴＰＯ，为应用人ＴＰＯｃＤＮＡ进行质粒ＤＮＡ骨骼肌直接注射于动物体内的基因治疗研究奠定了基础

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在大肠杆菌中表达可溶的多串心钠素

赵明,马康涛

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 383-386.

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为获得大量的α心钠素，构建了含α心钠素多拷贝基因的重组表达载体ｐＭａｌ－ｎＡＮＰ．经ＩＰＴＧ诱导后，在Ｅ．ｃｏｌｉＪＭ１０９中稳定表达融合蛋白．优化诱导条件后，重组蛋白主要以可溶形式存在．利用ａｍｙｌｏｓｅ亲和柱初步纯化后的融合蛋白具有较好的生物学活性

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家蚕抗菌肽CMIV基因结构改造及表达产物的研究

李秀兰,戴祝英,张双全,张林元

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 387-391.

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参照天然抗菌肽ＣＭＩＶ组分的氨基酸序列，作了近５０％的改动，根据大肠杆菌偏爱的密码子，设计并人工合成了抗菌肽基因片段．将人工合成的抗菌肽类ＣＭＩＶ基因先重组到测序载体ｐＵＣ１１８上，经过序列分析，发现克隆于载体ｐＵＣ１１８上的基因片段与设计的序列完全一致．再将该基因片段重组到表达载体ｐＥＴ２８（ａ）上，抗菌肽以融合蛋白的形式表达．融合蛋白经镍－金属离子胶亲和层析纯化后，再用ＣＮＢｒ裂解，最终产物具有与天然抗菌肽相同的生物学活性

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辣根过氧化物酶同功酶C基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

蒋太交,吉鑫松,黄艳红,洪民,吴祥甫,袁中一

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 392-397.

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无论从应用还是从理论研究角度，辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）是一种非常重要的酶．ＨＲＰ基因克隆与表达将有利于更深入研究ＨＲＰ的结构与功能．利用反转录ＰＣＲ从天然植物辣根中分离和克隆编码辣根过氧化物酶同功酶Ｃ（ＨＲＰ－Ｃ）一个ｃＤＮＡ，并测定其序列．结果发现，从基因推导出的氨基酸序列与Ｗｅｌｉｎｄｅｒ报道的辣根过氧化物酶序列有９０．６％的同源性．将该基因连接到表达载体ｐＥＴ－２４ｂ上，利用抗ＨＲＰ多克隆抗体进行Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，检测有少量目标产物表达．在诱导表达过程中，没有发现细菌生长受抑制或受明显的毒害

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人白细胞介素-17基因的克隆、表达及其表达产物的分离纯化

王建勋,陈松森,狄旭,宋卫华

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 398-402.

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利用ＲＴ－ＰＣＲ方法成功地从ＰＩ（ＰＭＡ，Ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ）、ＰＨＡ活化的人Ｔ细胞中扩增出ｈＩＬ－１７编码区ｃＤＮＡ（４６８ｂｐ），克隆测序证实得到该基因．用特殊设计的引物扩增ｈＩＬ－１７成熟肽编码区（４１４ｂｐ），接入表达载体ｐＥＴ３０ａ质粒中．ｐＥＴ３０ａ－ｍｈＩＬ－１７在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中获得高效表达，目的蛋白占总菌体蛋白５０％左右．经凝胶过滤和阴离子交换层析两步分离纯化和复性，得到单体型ｒｍｈＩＬ－１７，纯度达９８％以上，Ｎ端１６个氨基酸序列分析，结果与文献报道一致．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测定分子量为１６ｋＤ，薄层丙烯酰胺凝胶等电聚焦分析该蛋白等电点为ｐＨ８．８～８．９，３ＨＴｄＲ参入法测定ｒｍｈＩＬ－１７单体的体外活性，实验结果表明ｒｍｈＩＬ－１７对ＰＨＡ活化人的ＰＢＭＣ细胞具有抑制作用，结果同可溶型ＩＬ－１７Ｒ性质相似

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凝血酶激活的单链尿激酶型纤溶酶原激活剂的构建、表达、纯化和性质研究

张彦斌,徐长法

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 403-408.

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用Ｋｕｎｋｅｌ突变法，将单链尿激酶型纤溶酶原激活剂（ｓｃｕ－ＰＡ）ｃＤＮＡ基因中编码Ｐｒｏ１５５—Ｌｙｓ１５８的片段定点突变，并将此突变的ｓｃｕ－ＰＡ（ｔｓｃｕ－ＰＡ）的ｃＤＮＡ克隆到表达载体ｐＣＭ－β－ｎｅｏ中，与ｐＣＭ－ｄｈｆｒ共转染ＣＨＯ／ＤＨＦＲ－细胞．获得的稳定表达株在无血清培养基中２４ｈ的表达量为６２０ＩＵ／１０６细胞．经锌离子螯合Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ亲和层析得到ｔｓｃｕ－ＰＡ纯品．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示ｔｓｃｕ－ＰＡ分子量为５３ｋＤ左右，与预期的结果相符．ｔｓｃｕ－ＰＡ是由凝血酶激活而不是由纤溶酶激活，但激活后也能转变为双链分子（ｔｃｕ－ＰＡ）．ｔｓｃｕ－ＰＡ仍保持了ｓｃｕ－ＰＡ的血纤维蛋白亲和性．酶动力学研究表明，激活后的ｔｓｃｕ－ＰＡ水解Ｓ２４４４的Ｋｍ和Ｋｃａｔ值与高分子量尿激酶（ＨＵＫ）相似．体外溶栓实验结果表明，ｔｓｃｕ－ＰＡ可以选择性地溶解富含凝血酶的血凝块，对贫凝血酶的血凝块作用不大

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鲤鱼(Cyprinus carpio)生长激素基因克隆及原核表达

白俊杰,马进,简清,李新辉,罗建仁

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 409-412.

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采用逆转录—聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，从鲤鱼脑垂体总ＲＮＡ中扩增出编码鲤鱼生长激素（ＧＨ）成熟肽基因序列．定向克隆至质粒ｐＵＣ１８，克隆的鲤鱼ＧＨｃＤＮＡ不含信号肽序列并以新的起始密码子ＡＴＧ取代鲤鱼ＧＨｃＤＮＡ第１个密码子ＴＣＡ．序列分析表明，与Ｋｏｒｅｎ报道的鲤鱼ＧＨｃＤＮＡ相比有两个碱基差异，但推断的氨基酸序列完全一致．将鲤鱼ＧＨｃＤＮＡ定向克隆至原核表达载体ｐＢＶ２２０，构建成重组鲤鱼ＧＨ基因表达载体ｐＢＶｃＧＨ８．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和薄层扫描分析表明：经４２℃诱导，ｐＢＶｃＧＨ８在大肠杆菌中可表达一分子量约２２０００的特异蛋白，表达量占细胞总蛋白的２９．２％．该基因重组的鲤鱼ＧＨ添加到饲料中投喂罗非鱼，证实有明显的促进生长作用

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从织锦芋螺中克隆α芋螺毒素序列

卢柏松,于芳,王建华,赵东,赵四清,黄培堂

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 413-416.

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为了从我国南海产织锦芋螺（Ｃｏｎｕｓｔｅｘｔｉｌｅ）中分离新的毒素序列并研究其应用价值，进行了织锦芋螺毒素基因的分离工作．从织锦芋螺毒管中提取ｍＲＮＡ，以Ａ族芋螺毒素的信号肽编码部分和３′端非翻译部分的保守序列为引物，通过ＲＴ－ＰＣＲ扩增和序列分析方法获得新的芋螺毒素序列．结果得到两种不同的α芋螺毒素序列，两者都属于α４／７亚型芋螺毒素，预测其成熟肽序列分别为Ｐｒｏ－Ｇｌｕ－Ｃｙｓ－Ｃｙｓ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－Ｃｙｓ－Ａｓｎ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｈｉｓ－Ｐｒｏ－Ｇｌｕ－Ｌｅｕ－Ｃｙｓ－Ｇｌｙ（Ｃ端Ｇｌｙ可能被酰胺化）和Ｐｒｏ－Ｇｌｕ－Ｃｙｓ－Ｃｙｓ－Ｓｅｒ－Ｈｉｓ－Ｐｒｏ－Ａｌａ－Ｃｙｓ－Ａｓｎ－Ｖａｌ－Ａｓｐ－Ｈｉｓ－Ｐｒｏ－Ｇｌｕ－Ｉｌｅ－Ｃｙｓ－Ａｒｇ．采用传统的生化分离手段尚未从织锦芋螺中获得过α芋螺毒素序列，这两种α芋螺毒素作用的种属特异性、受体类型特异性和在小细胞肺癌的诊断和治疗中的应用价值有待进一步研究

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草鱼(Ctenopharyngodon idellus)线粒体DNA控制区及其两侧tRNA基因的克隆与结构分析

张方,米志勇,毛钟荣,吴乃虎

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 417-422.

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动物线粒体ＤＮＡ控制区是线粒体基因组复制与基因表达的最主要的调控区．采用杂交和测序的方法对草鱼线粒体ＤＮＡ控制区进行定位、克隆并测定了控制区及其旁侧的ｔＲＮＡＰｈｅ、ｒＲＮＡＰｒｏ和ｒＲＮＡＴｈｒ三个基因的序列，与多种脊椎动物的相应序列进行了比较，并进行了结构分析．草鱼线粒体控制区全长９２７ｂｐ，含有与酵母和爪蟾线粒体启动子相似的序列，其ＣＳＢⅠ、ＣＳＢⅡ和ＣＳＢⅢ序列与其他几种动物的ＣＳＢ比较相当保守，ＴＡＳ与其回文基序可形成稳定的茎环结构，成为Ｈ－链复制的终止信号．草鱼线粒体ｔＲＮＡＰｈｅ、ｔＲＮＡＰｒｏ和ｔＲＮＡＴｈｒ可折叠成三叶草形二级结构，其基因具有许多不同于细胞质ｔＲＮＡ基因的结构特点，可能反映了线粒体ｔＲＮＡ与线粒体核糖体具有不寻常的作用方式

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金属硫蛋白与单抗SZ51重组蛋白在大肠杆菌菌株BL21(DE3)pLysS中表达的研究

孙艳,张沛川,茹炳根

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 423-427.

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从基因工程水平构建了小鼠金属硫蛋白与抗人活化血小板单抗ＳＺ５１单链抗体的重组基因产物，并在大肠杆菌菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）ｐＬｙｓＳ中成功地进行了表达．该重组蛋白以包涵体形式存在于菌体蛋白中，分子量为３８ｋＤ，ＥＬＩＳＡ实验证明该重组蛋白既具有血栓部位活化血小板的单抗活性，又具有小鼠ＭＴ单抗的活性

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HCV非结构蛋白(NS2/NS3)基因表达载体的构建及其一级结构分析

范涛,高建恩,梁庆华,陶其敏

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 428-431.

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应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，从ＨＣＶ感染者血清中扩增编码ＨＣＶ病毒蛋白酶的ＮＳ２－ＮＳ３ｃＤＮＡ片段，在其５′和３′端分别引入ＥｃｏＲⅠ和ＸｂａⅠ限制性内切酶位点，定向克隆至真核表达载体ｐｃＤＮＡ３，构建重组载体ｐｃＤＮＡ－ＮＳ２３，重组表达载体经限制性内切酶消化鉴定．用ＳＰ６和Ｔ７通用引物对目的基因片断进行序列分析．序列同源性分析结果表明，与ＨＣＶ－Ｊ、ＨＣ－Ｃ２有高度的同源性，与ＨＣＶ－１、ＨＣＶ－Ｊ６、ＨＣＶ－Ｊ８同源性差，提示所克隆的基因属ＨＣＶⅡ型．该区内重要的功能位点如Ｚｎ２＋依赖性金属蛋白酶催化中心、丝氨酸蛋白酶催化中心等均高度保守

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Taq DNA聚合酶功能区域的定位

季朝能,杜汉森,郑佐华,黄啸宇,毛裕民

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 432-435.

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通过参Ｕ法定点突变产生了ＴａｑＤＮＡ聚合酶Ｎ端分别缺失３个，２３５个，２８７个和４４３个氨基酸的４个缺失体，利用Ｂａｌ－３１连续缺失法产生了ＴａｑＤＮＡ聚合酶的Ｃ端分别缺失了２个、１６个、２９个、３２个、３４个氨基酸的５个缺失体．经ＤＮＡ聚合酶活性测定表明Ｎ端缺失３个，２３５个，２８７个氨基酸后活力和完整的Ｔａｑ相近，而缺失４４３个氨基酸后则失去了ＤＮＡ聚合酶活力；Ｃ端的５个缺失体都失去了ＤＮＡ聚合酶活性．据此ＴａｑＤＮＡ聚合酶的功能区域被定位在２８７～８３２氨基酸之间．

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蟾蜍细胞溶素的纯化及其生化特性研究

樊廷俊,片桐千明

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 436-439.

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利用阴离子交换和凝胶过滤柱层析等方法对蟾蜍卵黄外被细胞溶素进行了分离纯化，获得了高纯度的样品．该酶的质量为３２ｋＤ，其特异性ＭＣＡ－人工合成底物为Ｂｏｃ－Ｇｌｎ－Ａｒｇ－Ａｒｇ－ＭＣＡ，能被ＤＦＰ、ＳＢＴＩ、ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ和ｐ－ＡＭＰＳＦ等蛋白酶抑制剂所强烈抑制，但不受ｃｈｙｍｏｓｔａｔｉｎ、ｂｅｓｔａｔｉｎ、Ｅ－６４和ＥＤＴＡ等的影响，表明该酶是一种丝氨酸类型的蛋白酶

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去B链羧端七肽人胰岛素的分离纯化及性质研究

陈来同,扬志茹,胡美浩

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 440-443.

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在大肠杆菌温度诱导体系中以非融合方式进行去Ｂ链羧端七肽人胰岛素原基因的表达，获得去Ｂ链羧端七肽人胰岛素原，表达产物占细胞总蛋白量的１３％，表达产物经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０柱层析分离及胰蛋白酶和羧肽酶Ｂ的酶促转化等步骤，可得到纯度达９４％以上的去Ｂ链羧端七肽人胰岛素，其氨基酸组成与预期值相符，受体活性是标准猪胰岛素的１％．

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化学修饰抗体增加模拟酶的GPX活性

刘俊秋,时成波,姜明守,罗贵民,闫岗林,沈家骢

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 444-447.

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将丝氨酸共价偶联到兔抗人ＩｇＭ（Ｆｃμ）抗体上，以增加抗体结合部位丝氨酸残基含量．在中性条件下，丝氨酸被对苯甲基磺酰氟活化，再经ＮａＨＳｅ亲核取代，将丝氨酸诱变为硒代半胱氨酸（ＳｅＣｙｓ）．其谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＸ）活性由未增加丝氨酸前的诱变抗体的７０Ｕ／μｍｏｌ提高到２１８Ｕ／μｍｏｌ，其活性为模拟物ＰＺ５１的２００多倍．

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纤维二糖脱氢酶生成羟自由基和还原各种自由基的研究

方靖,曲音波,高培基

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 448-452.

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利用电子顺磁共振（ＥＳＲ）技术和硫代巴比妥酸（ＴＢＡ）反应研究了纤维二糖脱氢酶（ＣＤＨ）生成·ＯＨ和还原各种自由基的能力．以纤维二糖为电子供体时，ＣＤＨ可以生成·ＯＨ．·ＯＨ生成量与ＣＤＨ、Ｆｅ３＋和Ｏ２的浓度有关．加入过氧化氢酶可使·ＯＨ的生成明显减少．ＣＤＨ可以还原自旋加合物［ＰＢＮ－ＯＨ］·、氮氧自由基和天然木素分子中的自由基．结果表明，ＣＤＨ具有生成·ＯＨ和还原各种自由基的能力．对该酶在木质纤维素降解中的作用进行了探讨

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适于非水相催化用细菌脂肪酶基本性质的研究

高修功,曹淑桂,章克昌

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 453-456.

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对假单胞菌产脂肪酶的基本酶学性质进行了研究．该酶水解油脂时的最适作用ｐＨ为９．０，最适作用温度为４５℃；在ｐＨ７．０～１０．０范围内稳定，在６０℃以下热稳定性良好．Ｋ＋、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋等金属离子对酶有明显的激活作用，而Ｈｇ２＋、Ｃｕ２＋、Ｓｎ２＋等重金属离子却对酶有较强的抑制作用；几种表面活性剂和胆汁盐均使酶发生不同程度的失活．该酶在水解油脂时表现出１，３－位置专一性，且对不同种类和来源的油脂水解作用速率不同

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叶酸受体基因转染细胞诱导后的类脂改变对叶酸摄取的影响

唐建华

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 457-461.

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用胆固醇合成抑制剂Ｌｏｖａｓｔａｔｉｎ（洛伐他汀，暂译名）和神经鞘脂类合成抑制剂ＦｕｍｏｎｉｓｉｎＢ１（抑鞘脂素Ｂ１，暂译名）处理能表达糖基化磷脂酰肌醇锚定叶酸受体（ＧＰＩＦＲ）的基因转染细胞（ＦＲα·ＴＲＶＢ－１）３ｄ，发现前者可使细胞的胆固醇含量减少约３５％，而后者可使神经鞘脂类减少４４％以上；同时发现，处理组细胞结合叶酸的能力减少约４０％，其对５－甲基四氢叶酸的摄入率减少逾８０％．这主要是由于细胞质膜中胆固醇和神经鞘脂类含量减少，从而导致膜内ＧＰＩＦＲ结合叶酸功能降低及ＧＰＩＦＲ摄入叶酸的内化过程障碍所致．其详细作用机制尚待进一步研究

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铽(Ⅲ)与人血清脱铁转铁蛋白结合的荧光光谱研究

杨斌盛

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 462-466.

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在ｐＨ７．４０．１ｍｏｌ／ＬＨｅｐｅｓ及室温条件下，使用荧光光谱进行了Ｔｂ３＋对人血清脱铁转铁蛋白的滴定．结果表明Ｔｂ３＋与人血清脱铁转铁蛋白结合后，其５４９ｎｍ处的荧光强度增强约１０５倍．在５４９ｎｍ处Ｔｂ３＋－脱铁转铁蛋白络合物的摩尔荧光强度是（９．６５±０．０５）×１０４ｍｏｌ－１Ｌ，Ｔｂ３＋可占据脱铁转铁蛋白的两个金属离子结合部位，优先占据脱铁转铁蛋白的Ｃ端结合部位，条件平衡常数是ｌｇＫＣ＝９．９６±０．２０，ｌｇＫＮ＝６．３７±０．１６．Ｔｂ３＋与Ｒ３＋Ｅ（ＲＥ＝Ｎｄ、Ｓｍ、Ｅｕ和Ｇｄ）间的线性自由能关系表明稀土离子占据脱铁转铁蛋白的Ｃ端结合部位时受离子大小的影响

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寡糖8-氨基萘基-1,3,6-三磺酸衍生物在毛细管区带电泳中迁移时间相互关系

车发云,王克夷,夏其昌

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 467-470.

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确定了寡糖８－氨基萘基－１，３，６－三磺酸（ＡＮＴＳ）衍生物在毛细管区带电泳中迁移时间的相互关系．分别将葡聚糖、甘露聚糖、木聚糖和甲壳质部分酸水解产生的不同聚合度寡糖的混合物，用ＡＮＴＳ胺化还原衍生，然后用毛细管电泳，在５０ｍｍｏｌ／Ｌ，ｐＨ２．５磷酸缓冲液中分离衍生物，分别得到１至２１个聚合度的寡聚葡糖衍生物电泳梯度图，以及聚合度均为１至７的寡聚甘露糖、寡聚木糖和寡聚Ｎ－乙酰氨基葡糖衍生物电泳梯度图．同类寡糖衍生物相对迁移时间（ｔｍ）ｒ与聚合度ｎ均成线性关系．寡聚葡糖衍生物相对迁移时间与其他３类寡糖衍生物的相对迁移时间存在线性关系

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无机磷和叠氮钠对线粒体F_1-ATPase构象的不同影响

杨树长,李生广,林治焕

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 471-474.

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用εＡＤＰ作荧光探针，用荧光猝灭的方法证明无机磷（Ｐｉ）能影响Ｆ１－ＡＴＰａｓｅ的构象从而使酶结合ＡＤＰ的能力降低．用ａｕｒｏｖｅｒｔｉｎＢ作荧光探针研究了Ｐｉ和叠氮钠对Ｆ１－ＡＴＰａｓｅ构象的影响，发现Ｐｉ能影响洗去催化位点核苷酸的Ｆ１的构象，而叠氮钠对其没有影响，但却能影响结合有ＡＤＰ的Ｆ１的构象．因此Ｐｉ和叠氮钠对酶构象的影响是不同的，二者可能有不同的作用位点．

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RT-PCR测定组织纤溶酶原激活剂突变体(La-tPA)在转基因鼠乳腺表达的研究

卢一凡,邓继先,程萱,黄培堂

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 475-478.

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利用所构建的乳腺表达组织纤溶酶原激活剂突变体（Ｌａ－ｔＰＡ）载体．对５４０枚小鼠受精卵进行显微注射，经ＰＣＰ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测，获得６只整合有人Ｌａ－ｔＰＡ转基因小鼠．为了精确研究转基因在小鼠体内的表达，采用ＲＴ－ＰＣＰ方法测定转基因鼠在泌乳期１～２０ｄＬａ－ｔＰＡ基因的转录，结果表明，在转基因鼠乳腺的Ｌａ－ｔＰＡｍＲＮＡ水平在１０～１５ｄ最高，在２０ｄ时降为最低．外源基因在转基因小鼠乳腺的表达规律研究为未来利用转基因动物生产Ｌａ－ｔＰＡ提供依据

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黄花蒿培养细胞中青蒿素合成代谢的体外调节

李弘剑,张毅,郭勇,姚汝华

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 479-483.

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黄花蒿培养细胞通过两步培养积累青蒿素．第１步在含有０．２～０．４ｍｇ／Ｌ６－苄基氨基嘌呤（６－ＢＡ）和３～４ｍｇ／Ｌ吲哚乙酸（ＩＡＡ）的Ｎ６培养基中进行细胞的增殖培养，第２步将培养好的细胞转入含０．２～０．４ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ和０．２～０．４ｍｇ／ＬＩＡＡ的改良Ｎ６培养基中进行青蒿素的合成．青蒿素的合成量为１９０μｇ／ｇ干细胞左右．当在第２步培养中加入青蒿素合成前体青蒿酸，青蒿素合成量比仅靠激素诱导提高了３倍多．青蒿素的合成途径是植物固醇合成途径的分支途径，当在青蒿素合成过程即第２步培养中加入固醇生物合成抑制剂双氯苯咪唑和氯化氯胆碱处理，可使代谢向合成青蒿素的方向移动，青蒿素合成量明显提高．经２００ｍｇ／Ｌ氯化氯胆碱处理２ｄ，黄花蒿细胞合成青蒿素量为３７２μｇ／ｇ干细胞；经２０ｍｇ／Ｌ双氯苯咪唑处理４ｄ，黄花蒿细胞合成青蒿素量为１５４０μｇ／ｇ干细胞，比靠激素诱导提高了８倍多，与诱导脱分化细胞的黄花蒿叶中所含的青蒿素（３０００μｇ／ｇ干细胞）处于同一个数量级．以上结果表明：在通过植物激素调节可以合成青蒿素的黄花蒿培养细胞中，缺乏青蒿素合成前体是青蒿素合成量低的重要原因．因此，在青蒿素合成的过程中通过体外调节，

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反义凝血酶受体基因的表达对人ASMC增殖的影响

张茜,孟宪敏,姜玉新,丁金凤,汤健,陈光慧

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 484-487.

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介入治疗后再狭窄的发生严重降低了该治疗手段的最终疗效．为探讨再狭窄的发生机理、寻找有效的预防手段，利用反义ＲＮＡ技术构建了含有部分反义凝血酶受体（ＡＴＲ）ｃＤＮＡ片段的真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３／ＡＴＲ，并观察了其对培养的人主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）增殖的影响．结果表明ｐｃＤＮＡ３／ＡＴＲ的瞬时转染即能显著抑制人ＡＳＭＣ的３Ｈ－ＴｄＲ参入量，且该作用与导入的ＤＮＡ量呈剂量依赖性．说明部分反义凝血酶受体基因的表达可以抑制ＡＳＭＣ的增殖

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酶降解法精制肝素钠

周先碗,何伟

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 488-490.

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肝素钠在哺乳动物的脏器和体液如：肝、肺、脾及胃肠粘膜等中含量很高．肝素钠作为一种有效的抗凝剂已广泛应用于临床，生物学功能在于阻止血液中凝血酶的作用．其衍生物还具有降血脂、消炎、抗过敏、利尿及调节免疫功能等多种用途．肝素钠属于多糖类化合物，作为溶栓类药...

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大鼠老化过程小脑神经元染色质核小体线性和空间排布特征分析

茆象千,彭家和,邱平

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 491-494.

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阐明真核细胞染色质核小体线性和空间排布特征及其机制是染色质结构和功能研究的核心内容．近年来随着染色质分子生物学研究的深入，人们发现染色质核小体不仅作为真核基因组三维结构的基本结构单元，而且在细胞核内线性和空间排布（ｌｉｎ－ｅａｒａｎｄｓｐａｃｉａｌａ...

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北京大学生物信息中心的分子生物信息资源

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 494-494.

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随着人类基因组计划等大型国际项目的实施，分子生物信息的研究、开发和应用，已经成了当前一个前沿领域和研究热点。一门新兴的边缘学科——分子生物信息学应运而生。它以核酸、蛋白质等生物大分子数据库为主要对象，以数学、信息学、计算机科学为主要手段，以计算机硬件...

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PKC刺激与抑制对HeLa细胞G_1/S期进程的影响

胡江,柳惠图

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 495-497.

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蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣ，ＰＫＣ）是一类分布广泛的丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶，在真核细胞的跨膜信号传递中发挥重要的作用［１］．而细胞周期进程是一个复杂的调控过程，受控于多种磷酸酶与磷酸激酶作用下的中心调控体系［２］．大量报道表明ＰＫＣ信号...

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Ox-LDL和天然LDL诱导人动脉平滑肌细胞增殖中蛋白激酶A作用的初步研究

李载权,刘秉文

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 498-500.

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汪浩川等研究表明一定量Ｏｘ－ＬＤＬ能刺激培养人动脉ＳＭＣ细胞的增殖［１］，Ｄｅｊａｇｅｒ等采用交叉抑制实验证明兔ＳＭＣ细胞膜上有能结合Ｏｘ－ＬＤＬ的清道夫受体［２］，因此Ｏｘ－ＬＤＬ诱导培养人ＳＭＣ细胞增殖可能是Ｏｘ－ＬＤＬ作用于ＳＭＣ膜清道夫受体后...

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先天性红细胞生成性卟啉症患者酶活性的研究

李存保,王美玲,王文礼,高建萍,郭晓宇,马界荣

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 501-503.

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先天性红细胞生成性卟啉症（ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌｅｒｙ－ｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｃｐｏｒｐｈｙｒｉａ，ＣＥＰ）是Ｇｕｎｔｈｅｒ于１９１１年首先提出并加以描述，有时亦称Ｇｕｎｔｈｅｒ病．该病是因遗传性缺陷所致卟啉代谢中有关酶的异常造成的卟啉代谢紊乱而发生的一...

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第4届全国医学生化与分子生物学学术会议成功召开

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 503-503.

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第四届全国医学生化与分子生物学学术会议于１９９９年４月２２～２４日在重庆市第三军医大学举行，这是本世纪的最后一次聚会。会议共收到论文摘要２３１篇，并编印成册。本届会议以大会报告为主，共邀请了１２位教授会言，包括中国生物化学与分子生物学会副理事长强伯勤...

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红细胞生成素基因在大鼠体内的表达及表达产物的生物学效应

温进坤,韩梅,郭庆,汤健

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 504-506.

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红细胞生成素（ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ，ＥＰＯ）是一种由胎儿肝脏和成人肾脏产生的多肽类生长因子，在体内的表达具有严格的组织特异性，因此，慢性肾病所引起的贫血常常难以得到有效的治疗．随着基因治疗技术的不断成熟与完善，尤其是近年一些实验室先后发现质粒...

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尖吻蝮蛇出血毒素Ⅲ三维荧光光谱研究

陈真龙,刘清亮,张祖德,王守业,余华明

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 507-509.

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蛇毒中含有多种金属蛋白质，它们具有不同的生物学活性，如抗凝血因子（ＡＣＦ）、糖苷水解酶（ＮＡＤａｓｅ）、纤溶组分（ＦＰ）及出血毒素等，它们的许多生物活性、荧光光谱和结构的性质等方面的研究已见报道［１］．徐洵等［２］从皖南尖吻蝮蛇蛇毒中分离出３种出血毒...

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MicroLumatPlus——生物化学发光仪

中国生物化学与分子生物学报. 1999, 15(03): 510-512.

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本文介绍一种新的生物及化学发光测定仪器——美国ＥＧ＆Ｇ公司的ＭｉｃｒｏＬｕｍａｔＰｌｕｓ（生物化学发光测定仪），该仪器在临床检验、分子生物学和细胞生物学方面有着广泛的应用前景。本文就其基本原理以及其在生物医学方面的主要应用做一简单介绍。１ＭｉｃｒｏＬ...

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