陈尊,孔维,周慧,李惟,沈家聪
中国生物化学与分子生物学报. 1995, 11(02): 150-154.
合成了淀粉接枝丙烯腈及丙烯酰胺的两亲性高分子化合物,并以此为载体,用物理吸附方法固定化了糖化酶。最适偶联条件研究表明:缓冲液的浓度,pH值及吸附时间和加酶量都对固定化酶活力,比活有一定的影响。在最适固定化条件下,固定化酶的活力为1500U/g干胶,蛋白载量为25mg/g干胶,比活为60U/mg蛋白,比天然酶的比活(8.0U/mg蛋白)提高6倍。最适反应温度比天然酶提高10℃(天然酶最适反应温度为50℃).无底物存在下,固定化酶在55℃的半衰期为24h,而天然酶只有1h;有底物存在下,固定化酶在55℃的半衰期为220h,45℃的操作半衰期由外推法算得为69天,而且该载体对糖化酶有一定的保护作用,当固定化酶在低于55℃热处理一段时间后,对酶活力有激活作用,酶活力最大可提高40%。该载体合成简单,固定化方法简单,步骤少,因而为工业上应用提供了一种新的可能性。