过刊目录

  • 1996年, 12卷, 第02期
    刊出日期:1996-04-20
      

    论文

  • 全选
    |
    论文
  • 陈红,王悦,颜茂恭,余明琨,姚启智
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 125-130.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    用HPLC和薄层层析等方法,分析了不同反应时间天花粉蛋白(TCS)和5'-AMP的反应产物成分,结果显示在0.5h内生成腺嘌呤核苷,随着反应时间的增加,同时有腺嘌呤核苷和腺嘌呤生成,48h后则反应产物主要是腺嘌呤,α-苦瓜子蛋白、肥皂草蛋白、丝瓜素毒蛋白和多花白树毒蛋白等单链核糖体失活蛋白也有类似结果,紫外差光谱研究结果也表明TCS与5'-AMP相互作用显示出明显的时间过程,提示单链核糖体失活蛋白除了N-糖苷酶活性外,还具有5'-AMP磷酸酯酶活性.
  • 王惠琛,邢瑞云,夏寿萱
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 131-137.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    正常人外周血用~(60)Co射线分别进行1~8Gy照射后,在含6-TG的培养基上克隆和筛选人淋巴细胞hprt突变细胞。细胞的突变频率与γ射线的照射剂量呈正相关.获得42个hprt突变细胞株,用8对hprt寡核苷酸引物进行多聚酶链反应(PCR)从细胞粗提物中分别扩增hprt各个外显子,分析突变细胞的hprt基因突变,约60%(25/42)的hprt基因突变为基因缺失,其中13个突变是hprt基因全部缺失,而12个是部分hprt基因外显子缺失,约有40%(17/42)的突变无明显的PCR扩增变化.同时显示hprt基因外显子的缺失突变与辐射剂量有关,实验结果提示,此方法有可能用于估计辐射剂量和进行辐射远后效果观察,进而揭示辐射致突的分子机理.
  • 王培京,马康涛,张迺蘅
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 138-142.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    利用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增人γ心钠素(γ-hANP)cDNA编码序列,在其5′和3′端分别引入EcoRⅠ和BamHⅠ限制性内切酶位点,定向克隆到表达质粒载体pMS-31b,在大肠杆菌pop2136中高效表达出人γ心钠素融合蛋白,表达产物占菌体总蛋白的30~40%。双向免疫扩散法测定证明表达产物与人α心钠素(α-hANP)抗血清呈阳性反应,纯化的表达产物经复性处理后能引起大鼠胸主动脉条舒张.
  • 杨景和,童裳伦,揭念琴,龚红宇,高祖泉
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 143-146.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    核糖核酸(RNA)与稀土铽离子在pH5.0~6.5条件下能形成具有较强荧光的络合物,其激发峰在288nm处,发射峰为494nm及545nm处.RNA在0.1~10mg/L范围内与其荧光强度呈线性关系,其检出限为6.0×10 ̄(-8)mol/L.腺苷酸,尿苷酸,胞苷酸对RNA的干扰比较小,因此可在其存在下选择性地测定RNA.
  • 周建新
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 147-152.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    用突变的c-erbB2/neu癌基因转染人类PC3细胞系,使转化克隆N35具有癌转移能力,在接种到裸鼠后能向肺、骨髓等远处转移.各项实验指标证实,外源性的neu基因已整合至人类细胞的染色质DNA中,并获得基因扩增和高表达.结果提示neu癌基因与肿瘤的发展和转移能力的形成有密切的关系.
  • 石缨,温进坤
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 153-156.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    构建可表达原癌基因c-jun正义和反义RNA的真核细胞表达载体,将其导入体外培养的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)后,经Northern分析证实,两种插入方向的cjun基因均在VSMC中大量表达; ̄3H-TdR参入实验表明,c-jun反义RNA对VSMC的增殖具有显著抑制作用.提示用反义核酸抑制c-jun表达对治疗某些由于VSMC增殖所引起的心血管病可能具有一定意义.
  • 胡静,温进坤
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 157-160.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    报道了内皮素A型受体反义寡聚核苷酸(ODNs)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及内皮素受体基因表达的影响.~3H-TdR参入结果显示,内皮素A型受体反义ODNs处理细胞可显著抑制内皮素诱导的VSMC的DNA合成,反转录-PCR及受体结合实验结果表明,ODNs的上述作用与降低VSMC内皮素A型受体基因表达活性有关.
  • 曹立环,秦慧,查锡良
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 161-164.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    人血浆纤连蛋白(Fibronectin,Fn)与人胎盘纤连蛋白两者在肽链结构上基本相同,但人血浆Fn的N-糖链结构为二天线结构,而人胎盘Fn不仅N-糖链的数量增加,同时还含有多天线结构,分别用~(125)I标记这两种具有不同糖链结构的Fn,观察两者与HT1080细胞的饱和结合的亲和性,结果发现,在4℃,人血浆Fn与HT1080细胞的饱和结合为129ng/10~5细胞,解离常数为2.83×10~(-8)mol/L,人胎盘Fn与HT1080细胞的饱和结合为133ng/10~6细胞,解离常数为2.64×10~(-8)mol/L.因而,人血浆Fn与人胎盘Fn上N-糖链的不同并未影响其与受体的结合.
  • 鲍锦库,曾仲奎,周红
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 165-170.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    囊丝黄精(PolygonatumcyrtonemaHua.)的根状茎,经浸取、用硫酸铵分级沉淀、猪甲状腺球蛋白-Sepharose4B柱亲和层析、CM-Sepharose柱离子交换层析和SephadexG-100凝胶过滤,可以分离纯化出黄精凝集素Ⅱ(PCLⅡ).纯化的PCLⅡ在聚丙烯酰胺凝胶电泳中显示单一蛋白染色带;在快速高效液相色谱中亦为单一蛋白峰,经分子筛层析测得分子量为15.9kD,最大紫外吸收值在278nm,PCLⅡ只凝集兔红细胞,当浓度为0.25μg/ml时,即可发生凝集反应,此凝集兔红细胞的能力可被D-甘露糖和猪甲状腺球蛋白所抑制.氨基酸组成分析表明PCLⅡ分子中富含酸性氨基酸,N末端为丙氨酸.经测定PCLⅡ分子中含有3个色氨酸和2.4%的中性糖.原子发射光谱分析表明,该凝集素分子中含有Mg和Ca两种金属元素.
  • 冯晓,魏淑敏,叶庆炜,董志伟
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 171-175.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    将诱变的αCD3杂交瘤(TK~-)与PD4杂交瘤(HGPRT~-)融合,获得分泌双功能抗体(BsAb)的四体杂交瘤C3.BsAbC3可分别与CD3分子及胃癌相关抗原P40反应.体外杀伤试验证实,当效靶比为40:1,BsAbC3浓度为1mg/L时,其杀伤效应可达77.6%.该杀伤效应具有明显的特异性,仅P40阳性表达的靶细胞可被溶解,体内杀伤试验证实,裸鼠接种胃癌细胞后5d,以BsAbC3活化的外周血淋巴细胞(PBLs)经局部皮下注射处理,可使移植胃癌完全消退(5/5).这一明显的治疗作用可能与局部注射途径有关,可供临床应用参考.
  • 张蔚文,焦瑞身
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 176-181.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    经硫酸铵沉淀,DEAE-纤维素吸附,磷酸纤维素吸附和Sepharose4B分子筛层析四步从地中海拟无枝酸杆菌纯化得到电泳纯MCT酶,酶比活力为3.21U/mg,纯化倍数178,酶活回收14.9%。酶反应的最适pH和温度分别为7.0和35℃。纯化MCT酶对底物丙酰CoA和草酰乙酸的米氏常数分别为0.027mmol/L0.03509mmol/L.经SephadexG-150测定酶分子量为200000,SDS-取丙烯酰胺电泳凝胶显示一条分子量68000的亚基蛋白带,说明该酶由三个等大小亚基组成.薄层等电聚焦测定酶等电点为pI6.0.二价金属离子Co ̄(2+)和Fe ̄(3+)促进酶活力.采用原生质体裂解的方法发现MCT酶是可能分布于胞浆和细胞膜上.
  • 曾仲奎,杨育红,鲍锦库,周红,罗亮,邓俊林
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 182-186.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    百合的鳞茎中含有一种对木瓜蛋白酶有强抑制作用的巯基蛋白酶抑制剂.百合的鳞茎经浸取加热处理,木瓜蛋白酶偶联的Sepharose4B柱亲和层析和SephadexG-100分子筛层析,可获得在PAGE和SDS-PAGE均为单一蛋白带的百合巯基蛋白酶抑制剂(CPI).此CPI为单链蛋白,含有0.307%的中性糖;N端氨基酸为Ile;SDS-PAGE测得亚基分子量为12000;SephadexG-100测得分子量为12500.百合CPI在100℃内和pH2~12范围内非常稳定;对木瓜蛋白酶的抑制属竞争性抑制类型,其Ki值为1.15×10~(-9)mol/L,对木瓜蛋白酶的抑制摩尔比为8.5:1.
  • 陈来同,黄春媚,张曼,杨志茹,胡美浩
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 187-190.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    将去B链羧端三肽人胰岛素原基因克隆到表达质粒pBV220上,在大肠杆菌系统中经温度诱导表达,表达产物占细胞总蛋白量的12%,表达产物经SephadexG-50柱层析分离以及胰蛋白酶和羧肽酶B的酶促转化等步骤,可得到去B链羧端三肽人胰岛素,其纯度达93%,其氨基酸组成与预期值相符,但其受体结合活性仅是标准猪胰岛素的45%.
  • 张春玲,丛祥凤,张英珊,邓卓霖
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 191-195.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    从动脉粥样硬化(AS)高(北京)、低(南宁)发区人正常胸主动脉内-中膜分离HSPG,观察其对体外培养的HASMC生长的影响,细胞计数、~3H-TdR参入及形态观察均表明AS高、低发区人主动脉HSPG都能剂量依赖性地抑制HASMC增殖,但抑制百分数未见显著差异,结果提示,人动脉壁中HSPG的含量可能与AS发病有关.
  • 周中军,金顺钱,罗贤懋,陈凤,魏慧娟
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 196-200.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    将反义GST-πRNA通过逆转录病毒载体介导的基因转移技术,导入人肺腺癌阿霉素耐受株细胞中,经G418筛选,克隆出抗性克隆,测定GST总酶活性,对活性最低的一株克隆,进行阿霉素药敏分析和GST-π基因表达的原位杂交分析.结果发现,GST-π基因表达受到明显抑制,总酶活性也大大降低,对阿霉素的抗药性下降了20%.
  • 徐慧显,李民勤,何炳林
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 201-205.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    合成了一系列丙烯酸甲酯-双甲基丙烯酸乙二醇酯、甲基丙烯酸羟乙酯-双甲基丙烯酸乙二醇酯、苯乙烯-双甲基丙烯酸乙二醇酯交联共聚物作为固定化酵母脂肪酶的载体,比较了这些载体固定化酵母脂肪酶催化橄榄油水解反应的效果,结果发现疏水性较强的苯乙烯-双甲基丙烯酸乙二醇酯交联共聚物固定化酵母脂肪酶的效果最好.比较了酵母脂肪酶溶液和苯乙烯-双甲基丙烯酸乙二醇酯文联共聚物固定化酶催化橄榄油水解反应的最适pH值、最适离子强度、最适温度和K_m值.同时考察了苯乙烯-双甲基丙烯酸乙二醇酯交联共聚物固定化酶在有机溶剂中催化十六酸戊酯合成反应的活力.
  • 艾华,陈吉棣,贺师鹏
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 206-210.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    通过观察具有不同睾丸金属结合蛋白(testismetalbindingprotein,TMBP)含量的对照和缺锌后补锌大鼠安静时和力竭性游泳后不同时间睾丸和血清睾酮和锌含量变化,以探讨TMBP含量对睾酮合成速率的影响.实验结果证实了如下推测:TMBP含量不同,睾酮合成的速率也不同,高起始含量TMBP的状况下,睾丸睾酮的合成加快.这一结果提示:TMBP可能参与睾酮的合成.
  • 陈淑娟,王镜岩,陈玉珍,周舒
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 211-214.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    报道了一种新的具有抗吗啡镇痛活性的肽的分离纯化,并进行部分一级结构测定.狗脑先经醋酸提取,冷冻成干粉,然后上SephadexG-50和S-SepharoseF.F柱,最后经RP-HPLC纯化,鉴定纯度后,测定其抗吗啡镇痛活性,通过SDS-PAGE法测得其分子量为8.9kD.氨基酸序列分析测得该肽的N端序列为:V-I-S-V-A-D-W-T-Q-I-F-T-M-R-Y-F-I-T-G-Y-H-Q-D-Y-X-G-L-H-I-G.经部分一级结构同源序列检索,未见与此有同源的蛋白质的报道,暂命名该肽为CC4肽
  • 高玉琼,刘建华,霍昕,单友谅,徐章雄
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 215-218.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    以猪牛眼玻璃体、鸡冠、人脐带为原料,利用水浸提,乙醇沉淀的方法,提取透明质酸粗品,经DEAE-纤维素纯化,获得高纯度的透明质酸.经测定,其蛋白含量0.38%~0.63%,分子量7.9×10~4~4.7×10~5,收率0.64%~2.4%,红外扫描图谱与文献报道一致
  • 刘彦,王寅,马克里,崔肇春
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 219-224.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    神经节苷脂GM_3对小鼠腹腔常驻巨噬细胞(R-M)和Ge-132体内激活的巨噬细胞(Ge-132-M)的磷脂代谢转换有显著的影响,当这两种M在体外用GM_3处理时,表现出[ ̄(32)P]Pi和[ ̄3H]肌醇参入PI降低,参入PIP、PIP_2增加;但在[ ̄(32)P]Pi和[ ̄3H]胆碱参入PC上,R-M与Ge-132-M不同,即GM_3促进同位素前体参入R-M的PC,抑制它们参入Ge-132-M的PC.以上结果表明GM3可能提高了PI或PIP的磷酸激酶的活性,致使[ ̄(32)P]PIP和[ ̄(32)P]PIP_2增多,[ ̄(32)P]PI减少.激活的M(Ge-132-M)本身PC代谢转换率较R-M高,当Ge-132-M再受GM_3刺激,PC代谢转换率降低,这提示GM_3对激活的M的PC代谢转换有调节作用.
  • 连少辉,杨士珍,林威,纽经义
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 225-228.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    研究了人体内源性卟啉──原卟啉Ⅸ(ProtoporphyrinⅨ简称PP)的发光特性,结果表明,它与癌组织抽提物的发光及目前用于临床研究所选用的癌固有荧光特征峰其本相类同
  • 司伊康,孔漫,沈宏略,贺文义,王映红
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 229-233.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    艾氏腹水癌细胞和肉瘤S-180细胞是抗肿瘤药物筛选常用细胞株.实验采用取自小鼠腹腔的第7~8天的艾氏腹水癌和S-180细胞,用31P磁共振谱测得了细胞内小分子含磷代谢成分;计算了细胞内pH值;还用31P谱探讨了作用机制不同的三种抗代谢物:碘乙酸、2,4-二硝基苯酚及棉酚对艾氏腹水癌细胞代谢的影响
  • 田维熙,董妍,权晖,陈文峰
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 234-236.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    不同生长期蛋鸡的体脂水平和肝脏脂肪酸合成酶活性的关系田维熙,董妍,权晖,陈文峰(中国科学院研究生院生物教学部,北京100039)动物体脂的控制是一个复杂过程.不同种类不同年龄的动物体脂水平有很大差异,控制机制是什么,哪些是关键的控制因素?不久前我们曾...
  • 高音,王志珍
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 237-239.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    用质粒pUC18在大肠杆菌中表达人蛋白质二硫键异构酶高音,王志珍(中国科学院生物物理研究所,生物大分子国家重点实验室,北京100101)蛋白质二硫键异构酶(proteindisulfideisomerase,PDI)催化蛋白质分子内天然二硫键的形成,...
  • 陈克敏,朱锡华
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 240-242.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    抗人Clq单克隆抗体轻链可变区基因的克隆及序列测定陈克敏,朱锡华(第三军医大学免疫学教研室,重庆630038)目前国内外对基因工程抗体的研究较多,但尚未见补体基因工程的研究报道.一般的方法是经RNA反转录合成cDNA,再以PCR扩增,克隆Ig可变区基...
  • 龚笑海,孙册
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 243-245.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    蚕豆β-半乳糖苷酶活性必需氨基酸残基分析龚笑海,孙册(中国科学院上海生物化学研究所,上海200031)化学修饰作为一种研究酶活性基团的方法,对研究糖苷酶的催化机理有其独到的优点,并已有这方面的报道.从蚕豆纯化的β-半乳糖苷酶,分子量为70kD,由两个...
  • 梁俊峰,郑昌学
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 246-248.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    加热对IgG结合DNA能力的影响梁俊峰,郑昌学(清华大学生物科学与技术系,北京100084)聚集免疫球蛋白G(AggregatedlgG)是指在某些条件(如温度、自由基等)影响下,IgG自身聚集所形成的IgG的多聚体.聚集不仅影响IgG的免疫反应活性...
  • 李庆生,郭建平,陶其敏
    中国生物化学与分子生物学报. 1996, 12(02): 249-251.
    摘要 ( ) PDF全文 ( )   可视化   收藏
    “双退火温度”多聚酶链反应扩增丙型肝炎病毒NS_5基因李庆生,郭建平,陶其敏(北京医科大学人民医院肝病研究所,北京100044)我们在扩增丙型肝炎病毒NS5基因中,探讨了退火温度与扩增产物特异性之间的关系,发现“双退火温度”多聚酶链反应可很好地解决目?..