Nrf2/ARE是近年新发现的机体抵抗内外界氧化和化学等刺激的防御性转导通路．生理条件下，NF-E2相关因子2(Nrf2，NF-E2-related factor 2)在细胞质中与Keap1结合处于非活性、易降解的状态.在内外界自由基和化学物质刺激时，Keap1的构象改变或者Nrf2直接被磷酸化，导致Nrf2与Keap1解离而活化．活化的Nrf2进入细胞核，与抗氧化反应元件(ARE)结合，启动ARE下游的Ⅱ相解毒酶、抗氧化蛋白、蛋白酶体/分子伴侣等基因转录和表达以抵抗内外界的有害刺激．MAPK、PI3K/AKT、PKC等信号通路分子广泛参与了Nrf2的活化和核转位过程，但是具体何种通路被激动、何种通路发挥主导作用，取决于刺激物种类、刺激方式和细胞类型．本文就Nrf2分子结构、Nrf2活化机制、Nrf2/ARE调控的下游基因、与Nrf2相关的信号通路分子以及其在肿瘤、炎症、衰老等应用领域的最新进展进行综述．

GEO(Gene Expression Omnibus)数据库包括高通量实验数据的广泛分类，有单通道和双通道以微阵列为基础的对mRNA丰度的测定；基因组DNA和蛋白质分子的实验数据；其中包括来自以非阵列为基础的高通量功能基因组学和蛋白质组学技术的数据也被存档，例如基因表达系列分析（serial analysis of gene expression,SAGE）和蛋白质鉴定技术.迄今为止，GEO数据库包含的数据含概10 000个杂交实验和来自30种不同生物体的SAGE库.本文概述了GEO数据库的查询和浏览，数据下载和格式，数据分析，贮存与更新，并着重分析GEO数据浏览器中控制词汇的使用，阐述了GEO数据库的数据挖掘以及GEO在分子生物学领域中的应用前景.GEO可由此公众网址直接登陆http://www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/geo/.

泛素（ubiquitin, Ub）是一类高度保守的小蛋白, 可与靶蛋白的赖氨酸残基共价连接, 形成多聚泛素链行使功能. 类似于泛素化修饰过程, 小泛素相关修饰物(small ubiquitinrelated modifier, SUMO）也可以共价修饰靶蛋白的赖氨酸残基, 从而影响靶蛋白的定位、稳定性以及蛋白间的相互作用, 发挥重要的生理功能. 尽管在多数情况下, 靶蛋白发生的是单SUMO化修饰, 但最近研究发现,SUMO依赖自身的赖氨酸也可以形成多聚链. 与单SUMO化修饰不同的是, 多聚SUMO化修饰的靶蛋白可以进一步被泛素化修饰, 进而诱导靶蛋白的降解. 这是一种新的、特殊的化学修饰形式, 弄清它的生理功能,对于了解细胞的生长、分化以及凋亡等生理过程将具有重要的意义. 本文将就此方面的最新研究进展做一综述.

疟原虫抗原B表位NKND是由本课题组首先报道的一个新的疟疾抗原表位．它是存在于多种不同疟原虫分离株中的保守序列．以减毒沙门氏菌为载体制备口服活疫苗，方法简单，使用方便，其鞭毛蛋白有较强的免疫原性，有利于激发人体的细胞和体液免疫．人工合成8肽的实验中[2]发现NKNDD可增强NKND对相应抗体的亲和力．将人工合成的NKNDD寡核苷酸片段插入鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白表达体系中，经Western杂交鉴定，表达出具有多拷贝NKNDD表位的重组鞭毛蛋白．

细胞自噬(autophagy)是细胞依赖溶酶体对蛋白和细胞器进行降解的一条重要途径.目前,将通过细胞自噬降解线粒体的途径称为线粒体自噬(mitophagy).最近几年的证据表明,线粒体自噬是一个特异性的选择过程，并受到各种因子的精密调节，是细胞清除体内损伤线粒体和维持自身稳态的一种重要调节机制.自噬相关分子，如“核心”Atg 复合物，酵母线粒体外膜分子Atg32、Atg33、Uth1和Aup1，哺乳细胞线粒体外膜蛋白PINK1、NIX和胞质的Parkin等，在线粒体自噬中起关键的作用. 线粒体自噬异常与神经退行性疾病如帕金森氏病（Parkinson’s disease，PD）的发生密切相关. 本文就线粒体自噬的研究进展做简要的介绍.

ABC (ATP-binding cassette) 转运蛋白广泛存在于各种生物体细胞中，例如细菌的内层细胞浆膜和真核生物的细胞膜和细胞器膜.其利用与ATP的结合和水解供能进行底物的跨膜转运，其中一部分ABC转运蛋白能转运多种疏水性分子.P-糖蛋白隶属于ABC转运蛋白超家族，是研究最为透彻的一员，主要功能是防止机体对外来有害物质的摄入.P-糖蛋白(P-glycoprotein)由4 个基本结构域组成，2 个跨膜区和2 个位于细胞浆内的核苷酸结合区.核苷酸结合区参与ATP的结合和水解，而各由6 个α 跨膜螺旋组成的2个跨膜区联合构成了底物跨膜转运的通道.P糖蛋白能转运多种不同结构的底物，包括脂类、胆汁酸、多肽和外源性化学物质，这对机体的生存至关重要，但同时也存在不利的一面，包括干扰了药物的运输，从而导致了多药耐药现象的产生.本文就P-糖蛋白的分子结构和作用机制的最新研究进展进行综述.

当细胞外基质 (ECM)组分被破坏时 ,基质金属蛋白酶 (MMPs)影响发育过程并和许多疾病如关节炎及肿瘤相关联 . ECM的正常转换是发育所需要的 . ECM的调节异常却能引起过多的损伤 ,并导致疾病如关节炎 .因此 ,更好地了解 MMP介导的 ECM的水解作用 ,有可能从机理方面为疾病诊断学与治疗学的介入提供依据 .本文介绍了 MMP生物学以及它的 ECM的相关的转换方面的最新进展 .随着新的 MMPs的发现 ,MMP家族正在迅速地扩大 .并且开始向已经确立的基因结构、潜伏期、底物专一性和功能调节方面的范例提出挑战 .即将完成的基因组测序将无容置疑地确定人类 MMPs的有限的数字 .揭示每个 MMP的功能所进行的努力可能标志我们在寻求最终了解细胞与它们的环境之间的相互作用的开始 ,这个过程对于哺乳类物种例如人类的进化是至关重要的 .

靛玉红是一种新型抗癌药物,治疗慢性粒细胞白血病(CML)有较好的疗效。本文通过体内及体外实验采用靛玉红—脂质体为剂型,观察药物对CML细胞的作用。据荧光偏振度的测定结果表明,此药物分子能降低大白鼠白细胞膜流动性。还测定服药3天的患者外周白细胞中DNA聚合酶Ⅰ的活性,比治疗前降低74±1％。为靛玉红抑制CML细胞DNA合成的机理提供依据。此外,还使用载有靛玉红的脂质体进行体外实验,表明靛玉红可以直接降低细胞膜的流动性以及抑制CML细胞中DNA聚合酶Ⅰ活性。对靛玉红治疗CML的作用机理提出一些看法和讨论。

鼠疫耶尔森菌外部蛋白E（YopE）是鼠疫耶尔森菌的6种分泌蛋白之一，主要通过其144位的”精氨酸手指”结构与细胞膜耦联蛋白RhoGTP酶相互作用发挥功能.本文构建YopE及其144位突变体YopE(R144A)的可诱导表达系统，并优化了诱导条件. 用该系统结合流式细胞技术检测YopE和YopE(R144A)对细胞凋亡、细胞周期和细胞活性氧(ROS)水平的影响.结果显示：YopE(R144A)促进HeLa细胞凋亡|使G0/G1期细胞比例上升,G2/M期细胞比例下降;随着YopE(R144A)表达量增加，p21蛋白的表达量也增加| YopE(R144A)也能抑制细胞ROS的产生.研究结果提示,YopE在细胞内可能存在新的致病靶点.

我们提取了酵母(Saccharomyces cerevisiae)的α因子基因,并组建了一系列含有α因子引导肽编码序列的质粒。这些质粒可用于外源基因在酵母中表达的研究。

I型聚酮合酶（PKSI）的模块型分子结构组织方式非常适合于组合生物合成研究.结构域和模块通过二级组织方式构成了PKSI的催化单元，其它结构多肽则作为“支架”.在“支架”上对结构域和模块两个水平进行突变、替换、插入、缺失等基因操作形成重组PKS，可以理性设计并获得复杂多样的新活性或高活性的聚酮化合物.利用PKSI进行组合生物合成以期获得新聚酮化合物的研究迄今已有约25年，但是目前仍不能够对PKS进行完美的理性设计，快速合成目标活性的新聚酮化合物.PKS中的酰基转移酶结构域的研究在PKS的组合生物合成研究中一直发挥着重要作用.本文结合本课题组的研究基础，对AT结构域的结构、功能及在组合生物合成研究中的最新研究成果作以分析总结.

光敏感通道(channelrhodopsin-2,ChR2）是一种受光脉冲控制的具有7次跨膜结构的非选择性阳离子通道蛋白，自1991年从莱茵衣藻中发现后被许多实验室所关注.依据ChR2可以快速形成光电流,使细胞发生去极化反应的电生理特性，ChR2已被广泛应用于神经系统的研究.与传统的神经系统研究方法如电生理技术、神经药理学方法相比，用光脉冲控制带有ChR2的神经元的活动，具有更高的空间选择性和特异性.ChR2作为光基因技术的核心组成部分，对神经科学是一个崭新的应用前景广泛的研究工具.近年来ChR2不仅应用于视觉、躯体感觉、听觉和嗅觉等多条感觉神经回路的形态和功能研究，还被应用于各种临床神经系统疾病的研究.本文总结了目前ChR2在神经系统中的研究进展，并对ChR2未来的应用前景作了进一步展望.

无义介导的mRNA降解(nonsense-mediated mRNA decay，NMD）作为真核细胞中重要RNA监控机制，识别并降解开放阅读框中含有提前终止密码子（premature termination codon，PTC）的mRNA，以避免因截短的蛋白产物积累对细胞造成毒害. NMD还调控正常生理基因的表达，暗示其在真核细胞中扮演重要角色. NMD途径的关键是PTC的识别.本文通过3种模型来分别阐述发现于哺乳动物、酵母等不同有机体的识别机制.通常由NMD因子UPF1（up-frameshift）等被招募至含PTC的mRNA上，借助这些因子组装形成“功能复合体”并激活降解.但目前对于PTC识别后的过程仍认识有限，本文通过综述NMD途径的分子机制以更好地理解其生物学意义.

心肌梗死是威胁人类健康的重要疾病之一，胚胎干细胞来源的心肌细胞移植是目前治疗心肌梗死的研究热点. 但是由于受到分化的心肌细胞纯度的影响，限制了心肌分化的机理研究以及临床应用. 本实验构建含有心肌特异性启动子αMHC启动的灭瘟素（Blasticidin，简称Blar）抗性基因及增强绿色荧光蛋白（EGFP）的慢病毒表达载体αMHC-Blar-2A-EGFP-Rex-mCherry-2A-neo. 应用慢病毒转染技术将慢病毒转染到人胚胎干细胞（hESCs），胚胎干细胞特异性启动子Rex启动mCherry和neo抗性蛋白的表达. 经过G418药物筛选，建立G418和mCherry阳性的细胞系. 通过PCR及流式细胞术，进一步鉴定稳定转染的hESCs细胞系；核型分析表明，该细胞系在建立过程中仍保持细胞核型的稳定. 在诱导稳定转染的hESCs向心肌细胞分化的实验中，分化的心肌细胞表达心肌细胞特异的肌钙蛋白(cTnT)，同时具有EGFP和Blasticidin药物筛选的双标记.本实验建立的这一细胞系可用于心肌细胞的纯化，为深入研究心肌发生发育的关键调控机制及临床应用奠定基础.

肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-alpha,TNF-α）是一种具有多效生物学效应的细胞因子.TNF的生物学效应都是通过细胞表面的2种TNF受体（TNFR）引发，其信号传导通路主要包括caspase家族介导的细胞凋亡、衔接蛋白TRAF介导的转录因子NF-κB和JNK蛋白激酶的活化.TNFR1和TNFR2的生物学功能不是独立的，许多生物学活性由二者共同完成.3条信号传导通路之间及各通路内部含有各种调节机制，使TNF的各种生物学功能协调发挥出来.本文评述了3条信号传导通路最新进展、关键激酶的研究状况及其在整个信号网络中的作用机理，如IKK的激活以及重要的信号转导分子RIP、TRAF2、TRUSS的结构、相互作用的方式等

根据伪狂犬病病毒 (PRV)gB基因的序列 ,设计并合成了一对引物 ,以闽A株细胞培养毒为模板 ,筛选最佳反应条件 ,建立了检测PRV的PCR方法 应用该方法对Fb、Bartha、BJ、GD、V2F4、S、S3、SR、Buk、Shope、Norden、MinkⅢ、HB、F8、F9、F12等毒株的细胞培养液进行基因扩增 ,均获得了分子量为 2 81bp的特异性目的DNA片段 ,而对Vero细胞与FMDV、SVDV、HCV、PRRSV、JEV、PPV等病毒进行检测 ,结果均为阴性 ,没有出现交叉反应 对PRV毒株扩增的产物测序 ,结果序列与文献报道一致 ,证明PCR扩增产物和方法的特异性 对 1994～ 2 0 0 0年期间送检的临床样品和保存的PRV毒种 ,用病毒分离、双抗体夹心ELISA和PCR等 3种方法进行检测 ,结果前 2种方法检测为阳性的 ,PCR检测均为阳性 ;PCR检测为阴性 ,前 2种方法检测也为阴性 ;可是 ,前 2种方法检测为阴性的 ,PCR却检测出部分阳性 ;经x2 检验 ,证明PCR检出率明显高于前 2种方法的检出率 对PRV闽A株细胞毒提取物DNA进行检测 ,其最低检出量为 15 8pg 对 1999～ 2 0 0 0年期间广东、福建、海南等省的 31个大中型猪场送检的 191份病料进行检测 .结果病料阳性率为 2 6 2 % ( 50 191) ,猪场阳性率为 71% ( 2 2 31) 实验结果表明 ,所建立的PCR技术可用于伪狂犬病的快速诊断

反向染色质免疫共沉淀技术（reverse chromatin immunoprecipitation assay，Reverse ChIP）是一种在体内状态下分析DNA-蛋白质相互作用的新方法. 它用特异的核酸探针捕获靶DNA片段及与其相结合的蛋白质，蛋白质用质谱仪检测，以达到确定靶DNA位点全部相关蛋白质的目的.其可对靶DNA位点相关蛋白质进行全面、系统地鉴定，特别是寻找已知DNA元件相应的调节蛋白.在发现、鉴定靶DNA位点相关蛋白质和研究DNA-蛋白质相互作用中有重要应用价值.

线粒体自噬（mitochondrial autophagy, or mitophagy）指的是细胞通过自吞噬作用，降解与清除受损线粒体或者多余线粒体，其对整个线粒体网络的功能完整性和细胞存活具有重要作用。线粒体自噬过程受多种途径调控，PINK1/Parkin通路是其中的一条，其异常与多种疾病的发生密切相关，如心血管疾病、肿瘤和帕金森病等。在去极化线粒体中，磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)诱导的激酶1（PTEN-induced kinase 1，PINK1）作为受损线粒体的分子传感器，触发线粒体自噬的起始信号，并将Parkin募集至线粒体；Parkin作为线粒体自噬信号的“增强子”，通过对线粒体蛋白质进一步泛素化介导自噬信号的扩大；去泛素化酶和PTEN-long蛋白参与调控该过程，并对维持线粒体稳态具有重要作用。本文主要对PINK1与Parkin蛋白质的分子结构和其介导线粒体自噬发生的分子机制，以及参与调控该途径的关键蛋白质进行综述，为进一步研究以线粒体自噬缺陷为特征的疾病治疗提供理论基础。

糖基化是一种古老的蛋白质翻译后修饰，常见于细胞外的糖被结构和细胞内部的内质网和高尔基体内。近年来，一种细胞内的糖基化修饰逐渐被大家所认识，这就是氧连接的N-乙酰葡糖胺（O-linked β-N-acetylglucosamine, O-GlcNAc）。它是唯一发生在细胞内的参与信号转导的糖修饰，一般发生于细胞质和细胞核中。自从20世纪80年代发现O-GlcNAc以来，生物学家和化学家一直在研究它修饰的位点和行使的生物学功能。O-GlcNAc 修饰发生在丝氨酸和苏氨酸上，因此可以与磷酸化之间形成阴阳关系并参与信号转导过程。但由于其低丰度易水解的特点导致难以鉴定位点，又使研究人员难以见其真容。本文将回顾O-GlcNAc 修饰的发现历史，介绍近年来发展的化学生物学手段对其位点的鉴定，并着重阐释该修饰在细胞周期以及表观遗传等生物过程中的功能。随着学科交叉及质谱技术的发展，古老而弥新的糖基化修饰将绽放出新的花蕾。

真核生物中的许多蛋白质分子包含锌指结构区，这类蛋白称为锌指蛋白.锌指蛋白因其包含特殊的指状结构，在对DNA、蛋白质和RNA的识别和结合中起重要作用.许多锌指蛋白的锌指结构域包含能与DNA特异结合的区域，并与某些效应结构域（如KRAB、SCAN、BTB/POZ、SNAG、SANT和PLAG等）相连，这类锌指蛋白常作为转录因子起作用,可调控靶基因的转录.一些锌指蛋白包含蛋白质识别结构域（如LIM锌指、MYND锌指、PHD锌指和RING锌指等），它们能够特异地介导蛋白质之间的相互作用，因此被称作蛋白适配器.此外，某些锌指蛋白还可以结合RNA，起转录后调控作用.本文就锌指蛋白与DNA、RNA以及蛋白质分子间的相互作用作一综述.

为阐明Ⅱ型糖尿病（ Ｎ Ｉ Ｄ Ｄ Ｍ ）患者红细胞膜的化学组成在非酶糖基化（ Ｎ Ｅ Ｇ）影响下发生的变化，采用毛细管气相色谱法和分光光度法测定了 ２０ 名正常人和 １９ 例Ⅱ型糖尿病患者红细胞膜的 ４ 种结合中性糖与 ２ 种氨基糖和唾液酸含量以及 ４ 种寡糖链上的末端中性糖和唾液酸含量．结果表明， Ｎ Ｉ Ｄ Ｄ Ｍ 患者红细胞膜几种结合单糖（ Ｇｌｃ， Ｆｕｃ， Ｇｌｃ Ａ， Ｇａｌ Ａ）与游离单糖（ Ｇｌｃ， Ｇａｌ， Ｍａｎ， Ｆｕｃ）含量以及唾液酸含量均较正常对照组明显降低（ Ｐ＜ ００１ 或 ００５）．据此推测，由于患者红细胞膜蛋白的重度糖基化导致某些膜结构蛋白的氧化损伤，细胞膜糖类含量的减少，可能是重度糖基化的继发后果．

脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)是近年来研究发现的启动脂肪动员的又一关键脂肪酶. ATGL能特异性地水解甘油三酯(TAG)的第一酯键,被认为是TAG水解过程的限速酶. ATGL在脂肪组织和非脂肪组织脂代谢过程中都发挥着重要作用,其活性和表达在细胞内受到转录水平、翻译后水平等调控.ATGL介导的脂解过程可能与肥胖、糖尿病、脂肪肝等代谢疾病存在关联.本文主要就ATGL的结构特征、生物学功能及其调控机制进行综述,并对今后的研究方向和应用进行了展望.

用pVAX1载体构建抗肿瘤核酸疫苗 .将鸡贫血病病毒 (CAV)的VP3基因和鸡新城疫病毒(NDV)HN基因插入载体pVAX1的多克隆位点 ,构建了 2个重组基因疫苗pVVP3和pVHN .转染OS732细胞 ,Western印迹及血凝试验检测HN基因表达状况及表达产物的活性 .RT PCR、DNALadder、TUNNEL染色检测VP3基因的表达及表达产物诱导OS732细胞凋亡作用 .酶切鉴定证实成功地构建了两个核酸疫苗 ,并能在真核细胞内表达 .含HN的核酸疫苗pVHN表达后具有血凝活性并致肿瘤细胞表面唾液酸含量降低 (P <0 0 5 ) .pVVP3的转染能导致OS732细胞凋亡 ,凋亡率可达87% .试验结果表明 ,pVVP3和pVHN两个核酸疫苗体外应用后能诱导肿瘤细胞凋亡并显著降低肿瘤细胞表面唾液酸含量

小RNA (microRNA)是一类新发现的长度约为21～25个核苷酸的RNA，它在转录后水平调节靶基因表达.已有研究表明，小RNA在发育、细胞增殖、凋亡、脂类代谢、激素分泌及肿瘤发生等多种生理和病理过程中发挥重要作用.针对小RNA的研究方法主要包括两大类:一是以传统实验技术方法为基础建立起来的小RNA特有的技术方法，二是已成熟应用的生物信息学技术.前者侧重于小RNA表达的检测和功能机制的阐明，后者则包括新小RNA基因及小RNA靶基因的预测.两者相辅相成，互为补充，为深入地研究这类分子的功能和分子机制提供了大量功能线索，及确凿的实验证据.

FoxO1转录因子属于Fox家族成员，主要参与细胞凋亡、应激、DNA损伤/修复、肿瘤发生、血管生成和糖代谢等生命过程. PI-3K和Akt信号通路可磷酸化FoxO1，使其由胞核转运至胞质，导致转录活性灭活，从而抑制FoxO1所调控的下游基因表达. FoxO1的乙酰化可削弱FoxO1结合同源DNA序列的能力，同时加强FoxO1的磷酸化，进一步降低其转录活性. 正是由于FoxO1本身的翻译后修饰可调节FoxO1的功能，使得其在肿瘤发生、免疫反应、细胞周期、分化、代谢、应激和凋亡中都起着重要的作用. 本文对FoxO1及其翻译后修饰的生物学意义进行综述.

芳香族氨基酸羟化酶(AAAH）家族是一类单加氢酶，包括苯丙氨酸羟化酶(PAH)、酪氨酸羟化酶(TH)和色氨酸羟化酶(TPH). 在辅因子四氢生物蝶呤、铁原子及氧存在下，分别催化苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸的羟化反应. 多种疾病如苯丙酮尿症、帕金森氏病以及神经相关疾病的发病机制均与这类酶有关. 本文综述近年来对芳香族氨基酸羟化酶家族蛋白结构功能、底物特异性、催化机制等方面的研究进展，为该类酶的定向进化及功能应用提供新思路.

蓝细菌Anabaena PCC 7120的DNA聚合酶DnaE由2个断裂基因dnaENI和dnaECI编码.通过纯化它们的部分基因在大肠杆菌中的表达产物DnaENI′和DnaECI′来免疫家兔获得抗体，用于对断裂的DnaE在体内和体外的反式剪接活性进行鉴定.在体外实验中，将2个断裂的DNA聚合酶DnaENI′和DnaECI′混合，进行反应，并利用它们的抗体对反应产物进行鉴定；在体内实验中，利用以上抗体对Anabaena PCC 7120细胞总蛋白进行免疫杂交分析.实验结果表明，蓝细菌Anabaena PCC 7120中断裂的2个DnaE多肽在体内和体外均能进行反式剪接.体外实验中，纯化的DnaENI′和DnaECI′的混合反应产生新的蛋白产物，既有成熟的反式剪接产物DnaEN′-C′，又有剪切了内含肽后的副产物DnaEN′和DnaEC′，且DTT的存在对剪接反应具有促进作用；此外体内实验中，在Anabaena PCC 7120细胞中既能检测到完整的DnaE，也能检测到未作用的DnaENI，但未能检测到DnaECI.

RNA沉默是由小RNA特异向导和RNA诱导的沉默复合物（RISC）切割或者抑制靶标mRNA翻译的一种调控系统. 作为RISC的核心成分，AGO蛋白(argonaute proteins)由N末端、PAZ、MID和PIWI 4个结构域组成. PAZ区能非序列特异性识别结合双链小RNA 3′末端悬垂的2个核苷酸，MID与PIWI界面处的“保守口袋”识别结合小RNA 5′端第1位核苷酸，PIWI区具有切割mRNA的催化中心. 根据系统进化学分析，AGO蛋白家族分为3个组：AGO like、PIWI-like和GROUP3. 拟南芥共编码10种AGO蛋白.目前已经证实,具有切割活性的为AtAGO1、AtAGO4和AtAGO7，三者参与的小RNA通路也已得到确认. 在拟南芥10种AGO蛋白中，AtAGO1与AtAGO10、AtAGO1与AtAGO7、AtAGO4与AtAGO6存在功能上的部分冗余.

近年来随着蛋白质组学的迅速发展,其相应的方法学研究也取得了巨大的进步, 一系列新技术融入了蛋白质组学研究中,极大地促进了这门学科的发展.相对和绝对定量同位素标记(iTRAQ)技术与高度敏感性和准确性的串联质谱及多维液相色谱联用技术已成为蛋白质定性和定量研究的主要工具之一. 该技术可对复杂样本、细胞器、细 胞裂解液等样本进行相对和绝对定量研究，具有较好的定量效果、较高的重复性.由于其能够同时对多达8种样品进行标记分析,故在生命科学的各个领域得到了广泛的应用.本文对iTRAQ的原理、实验流程、优缺点及近几年的应用进展进行综述.

为探讨禁食和胰岛素对解偶联蛋白 - 1、2、3基因 (UCP1 ,2 ,3)表达的影响 ,应用 RT- PCR方法观察了在不同禁食时间和应用胰岛素条件下大鼠白色脂肪组织、棕色脂肪组织和骨骼肌中 UCP1 ,2 ,3m RNA水平的变化 .UCP1基因只在大鼠棕色脂肪组织中表达 .UCP2 ,3基因在三种组织中均有表达 ,在白色脂肪组织中以 UCP2表达为主 ;在骨骼肌中以 UCP3表达为主 .过夜禁食使棕色脂肪组织 UCP1 ,3m RNA水平明显下降 (P<0 .0 1 ) ;UCP2 m RNA水平在三种组织中均呈上升反应 ,以白色脂肪组织中表现最为明显 (P<0 .0 5) ;而对白色脂肪组织和骨骼肌中 UCP3基因表达无明显影响 .禁食时间延长至 48h,除棕色脂肪组织中 UCP2 ,3基因有明显下降外 ,各组织中UCPs基因表达基本调节至正常或高于对照组水平 .胰岛素对 UCPs基因表达水平有一定的上调作用 ,这一作用对棕色脂肪组织 UCPs各基因及骨骼肌中 UCP3基因表现得尤为明显 (P<0 .0 5) .大鼠 UCPs基因表达有一定的组织特异性 ;禁食时间对三种组织中 UCPs各成员基因表达的影响有时相上的区别 ;胰岛素可以调 UCPs各成员基因的表达 .结果反映了 UCPs各成员在能量代谢调节上的不同作用 ,这为理解膳食 -产热与体重调节的关系 ,及其能量代谢平衡与疾病关系提供了实验依据

为探索一条研制猪血红蛋白 (pHb)为基础的血液代用品新途径 ,开发了干膜超声法将猪血红蛋白和别构效应剂、超氧化物歧化酶等联合包埋于脂质体的技术 .考察了氢化大豆卵磷脂、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、胆固醇、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺 甲氧基聚乙二醇和维生素E等在制备脂质体包埋血红蛋白 (LEH)中的作用 .通过控制磷脂与其他成分的配比 ,制得包埋率为 10 3%,pHb浓度达 16 %的稳定的LEH ;进一步将pHb微囊通过小鼠尾静脉多次注入其体内 ,检测受试小鼠血液中红细胞和白细胞数、抗体滴度、血小板聚集率及肾脏组织学等方面的变化 .小鼠体内试验表明了所制备的LEH具有低免疫原性、对肾脏无明显损害等特点 .脂质体包埋pHb是一种极具开发前景的稳定的人工载氧系统

用落球粘度计测量低剪切粘度的方法研究了纽带蛋白-肌动蛋白的相互作用。与以前关于纽带蛋白可使肌动蛋白粘度降低并推测它抑制微丝间相互作用的报道不同,10—50μg/ml的纽带蛋白引起肌动蛋白细丝溶液粘度略有增加。电镜观察表明,由于纽带蛋白的作用,肌动蛋白丝聚集成束。 远紫外圆二色谱显示,在pH7.0下,220和207nm处呈双负峰,190nm处有一正峰。按三波长法计算,其α螺旋和β折叠含量分别占41％和22％。研究了pH,磷脂和去垢剂对其构象的影响。疏水性结合的和水溶性的纽带蛋白相比,存在少量构象差别。联系这一蛋白处在细胞骨架与质膜相联系的特殊位置,推测在体内,纽带蛋白与脂结合后也可能发生类似的构象变化。

以 S-腺苷酰 - L-甲硫氨酸 (SAM)为诱导物 ,在 1 0 μmol/L最佳浓度下造成 1 6%的 HL- 60细胞分化 .HPLC检测结果表明 ,细胞基因组 DNA甲基化水平升高 .通过3H甲基同位素参入法研究细胞 DNA甲基化酶活力 ,则发现在细胞分化过程中酶活力未见升高 .说明细胞基因组甲基化水平升高并不是胞内 DNA甲基化酶催化能力改变的结果 ,而是由于 SAM进入细胞提供过量甲基造成的 .

大部分已克隆的植物抗病基因都包含有核苷酸结合位点区 (NBS)和富含亮氨酸的重复序列区 (LRR) .利用来自节节麦的抗禾谷孢囊线虫基因Cre3位点NBS区保守序列设计特异引物 ,从含有来自易变山羊草的抗禾谷孢囊线虫基因的小麦品系E 10的基因组中PCR扩增得到一条约 5 30bp的单一条带 .将扩增条带克隆和序列分析发现 ,该克隆 (Rccn4 )的编码区长 5 2 8bp ,含一个不完整的开放读码框 ,没有起始密码子、终止密码子和内含子结构 ,它编码一个 176个氨基酸残基的蛋白质 ,分子量为 2 0 4kD .Rccn4含有NBS LRR类抗病基因NBS区共有的保守模体I(V)LDD、T(T S)R、G(L S)PLA(A I L)、RCF(A L)Y ,并且与Cre3基因的NBS编码区核苷酸和氨基酸同源性分别为99 4 %和 98% .它是一个新的含NBS编码区核苷酸的抗禾谷孢囊线虫基因

转运必需内体分选复合物（endosomal sorting complex required for transport, ESCRT）系统是真核细胞中完成内体（endosome）膜内陷以形成多囊泡体（multi-vesicular body, MVB）的分子机器.其主要功能是促进被泛素（ubiquitin）标记的膜蛋白的降解, 还与细胞分裂、病毒出芽、细胞自噬以及真菌pH感知相关. ESCRT系统包括ESCRT-0，-Ⅰ，-Ⅱ，-Ⅲ和Vps4-Vta1共5个蛋白蛋白复合物.晶体学研究已经解析了大部分复合物的结构. 其促使膜内陷的分子机理一般认为分3步. 首先是ESCRT-Ⅰ和-Ⅱ在内体膜上结合并促使内体膜内陷形成初始芽体. 之后，ESCRT-Ⅲ在芽体颈部聚合并导致芽体的剪切，从而将内腔囊泡（intralumenal vesicles, ILVs）释放到内体腔内，形成MVB. 最后，Vps4/Vta1复合物则以水解ATP提供能量将聚合的ESCRT-Ⅲ解聚以循环使用，完成更多的出芽过程.本文将对ESCRT系统的结构、出芽机理和生物功能几方面做一个综述.

为阐明中枢神经系统中胆囊收缩素 8(CCK8)受体的信号传递机制 ,以分离的大鼠大脑皮质神经细胞为材料 ,观察了CCK8对细胞内钙调素 (CaM)、3′ ,5′ 环腺苷酸 (cAMP)、蛋白激酶C(PKC)活性的影响 研究结果表明 ,CCK8可刺激大脑皮质细胞CaM、PKC活性的增加 ,并有剂量依赖关系 但CCK8在 10 -12 ～ 10 -6mol L范围内 ,细胞内cAMP含量无显著变化 利用受体亚型L 364,718和L 365,2 60的研究表明 ,两种拮抗剂均可抑制CCK8引起的CaM和PKC活性变化 ,但两者IC50 不同 对于CaM ,CCKB 受体拮抗剂L 365,2 60的IC50 比CCKA 受体拮抗剂L 364,718低 4 0倍 ;而对于PKC ,L 365,2 60的IC50 比L 364,718低 60倍 因此认为 ,CCK8主要是通过CCKB 受体介导了CaM和PKC活性的变化

细胞自噬（autophagy）是将细胞内受损、变性或衰老的蛋白质以及细胞器运输到溶酶体进行消化降解的过程.正常生理情况下，细胞自噬利于细胞保持自稳状态；在发生应激时，细胞自噬防止有毒或致癌的损伤蛋白质和细胞器的累积，抑制细胞癌变；然而肿瘤一旦形成，细胞自噬为癌细胞提供更丰富的营养，促进肿瘤生长.因此，在肿瘤发生发展的过程中，细胞自噬的作用具有两面性.尽管大多数抑癌蛋白可以激活细胞自噬这一结论被广泛接受，但p53作为重要的抑癌蛋白，在细胞核和细胞浆不同的亚细胞定位中对细胞自噬有着截然相反的调控.对于细胞自噬和癌症发生之间关系亟待深入的研究，这将会有助于人类更好地认识并最终攻克癌症.本文将针对细胞自噬与肿瘤发生过程中主要的信号调节通路展开介绍.

宏基因组学诞生于上世纪90年代，是指不经过微生物培养阶段，采用直接提取环境中总DNA的方法，对微生物基因总和进行研究的一门新学科.宏基因组技术的出现，使得人们对占微生物总体99 %以上不可培养微生物的研究成为现实，微生物基因的可探测空间显著增大.总的来说，目前宏基因组技术的应用主要分为两个方面：一方面是筛选功能基因，开发具有所需功能的蛋白；另一方面是通过对宏基因组文库进行分析，探讨在各种环境下微生物间相互作用和微生物与周围环境间相互影响的规律，以便我们能更加客观、全面地认识微生物世界.在宏基因组技术的应用范围被不断扩展的同时，围绕着宏基因组文库的构建和筛选、测序和分析等方面的研究已成为宏基因组学发展的主要推动力，宏基因组技术的进步将不断提升其应用价值.

本文报道波叶大黄多糖(Rheum hotaoense polysaccharide,RHP)对胰腺五种酶的抑制作用。结果表明。(1)RHP对胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉酶、胰弹性蛋白酶和胰激肽释放酶均有很明显的抑制作用。IC_(50)分别为250μg/mL、21μg/mL、18μg/mL,189μg/mL和300μg/mL。(2)动力学研究表明,RHP对胰蛋白酶和胰脂肪酶的抑制均是非竞争性的,Km值分别为1.2×10~(-4)μmol/mL和1.2mg/mL,Ki值分别为355.0μg/mL和63.85μg/mL。(3)牛血清白蛋白(BSA)对RHP抑制胰蛋白晦和胰脂肪酶具有拮抗作用。当BSA浓度达72.0mg/mL时,对胰蛋白酶活性的恢复率为71.54％。当BSA浓度达20.0mg/mL时,对胰脂肪酶活性的恢复率为63.64％。上述结果表明,RHP对胰腺五种酶的抑制作用,可能是大黄治疗急性胰腺炎作用的生化机制之一,预示RHP在临床上将有重要应用前景。

真核细胞核膜上的核孔复合体 (nuclear pore complex, NPC) 是细胞核内外进行物质交换的主要通道, 分子量较小的化合物可自由通过NPC或采取被动扩散的方式进入细胞核, 而分子量为50 kD以上的蛋白质则只能通过主动转运进入细胞核. 以这种方式进入细胞核的 蛋白质必须在其氨基酸序列上拥有特殊的核定位信号(nuclear localization signal, NLS)以被相应的核转运蛋白(karyopherins) 识别. 核定位信号具有多样性, 包括经典核定位信号(classical NLS,cNLS), 内输蛋白β2识别的核定位信号（又称PY模体-NLS）和其它类型的NLS. 每一类NLS具有相似的特征, 但并不具有完全保守的氨基酸组成. 不同的NLS, 往往对应着各不相同的核输入机制. 而对同一蛋白质来说, 也可能同时拥有几个功能性的NLS. 研究核定位信号一方面可以帮助揭示新的大分子物质核转运机制, 另一方面也有助于发现一些蛋白质的新功能. 本文对常见NLS的分类进行了总结, 并介绍了两种常用的NLS预测软件及鉴定NLS的一般策略.