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| 野花生豆凝集素的化学修饰与荧光光谱研究 |
| 周红,曾仲奎,刘嘉,鲍锦库 |
| 四川联合大学生物系生化教研室 |
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摘要 野花生豆凝集素（ＣＭＬ）经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００测得分子量为１０３．ＯｋＤ．用对二甲基氨基苯甲醛（ＤＡＢ）为显色剂，测得每个ＣＭＬ分子含有５．９个色氨酸残基．在ｐＨ５．１，含８ｍｏｌ／Ｌ脲的醋酸缓冲液中，Ｎ－溴代丁二酰亚胺（ＮＢＳ）可修饰ＣＭＬ分子中的５．６个色氨酸（Ｔｒｐ）残基，同时使ＣＭＬ的凝血活性完全丧失．用焦碳酸二乙酯（ＤＥＰＣ）和Ｎ－乙酰顺丁烯酰胺（ＮＥＭ）分别修饰ＣＭＬ的组氨酸残基和半胱氨酸巯基后，ＣＭＬ的活性均无变化．ＣＭＬ在天然状态下荧光发射峰位于３３６ｎｍ处，用ＣＭＬ的专一性抑制糖Ｎ－乙酰半乳糖胺研究色氨酸的微环境，发现Ｎ－乙酰半乳糖胺可以淬灭ＣＭＬ中８８％的色氨酸残基萤光，Ｓｔｅｒｎ－Ｖｏｌｍｅｒ常数Ｋ＝１．７３Ｌ／ｍｏｌ．同时发现Ｎ－乙酰半乳糖胺能够保护ＣＭＬ，避免ＮＢＳ对ＣＭＬ的修饰作用，表明色氨酸可能是ＣＭＬ维待活性所必需，并直接参与和专一性抑制糖的结合，其微环境较为疏水．
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| 关键词 ：
野花生豆凝集素,
化学修饰,
荧光光谱
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收稿日期: 1997-10-20
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