中国生物化学与分子生物学报

Select

王冰梅曾金镇刘英

中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(8): 731-738.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

Wnt信号通路在脊椎动物的胚胎发育过程中发挥重要作用. Dkk1(Dickkopf1)是Dkk基因家族的成员之一，通过编码一种分泌型的糖蛋白与Wnt信号蛋白竞争细胞表面受体,来维持Wnt信号通路的稳态，从而调控胚胎器官的正常发育. 同时，在人类成体中，Dkk1基因活性的改变与肿瘤、代谢性骨病和骨关节炎等疾病的发生密切相关. 本文对Dkk1在头部、肢、眼和牙齿等器官的胚胎发育过程中的相关分子调控机制以及Dkk1与肿瘤发生的关系进行综述.

Select

miRNA的异构体—isomiR

谢兆辉李学贵许禔森

中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(8): 739-745.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

最近，深度测序技术揭示：同一个miRNA前体可能由于Drosha或Dicer的剪切位点改变，外切核酸酶介导的miRNA末端缩短，miRNA编辑或miRNA 3′ 末端无需模板的核苷酸添加等4种原因,而形成多种长度或序列不同的miRNAs异构体—isomiR．因为这些isomiR与已注解的miRNA可以调节同一个靶标，也可以靶向不同的靶标，所以它们不仅扩大了miRNA调节的范围，而且还有可能代表了每种miRNA基于isomiR的一种微型调节网络．研究发现,isomiR的表达具有细胞、组织、发育和疾病状况等特异性，并且很多人类疾病的致病机制也与它们有关，推测isomiR将来不仅有可能成为疾病诊断或治疗的生物学标记或靶标，而且相关的研究还对于RNA干扰技术也具有重要的指导意义．本文主要综述了isomiR的研究进展，并对isomiR应用前景做了展望．

Select

长链非编码RNA与细胞多向分化

卢旱云左长清吴铁

中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(8): 746-751.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

本文重点概述LncRNA参与细胞分化的相关机制,列举了LncRNA在不同细胞系中参与调控的各种作用方式,如LncRNA参与维持胚胎干细胞多潜能状态、胚胎干细胞分化、神经细胞分化、肌肉分化、表皮细胞分化、成骨细胞分化、脂肪生成的机制等.

Select

植物Rab蛋白的分类与功能

王芳刘超

中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(8): 752-760.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

Rab蛋白构成小G蛋白超家族中最大的1个家族，广泛存在于动物、植物和微生物中.Rab调控细胞内的囊泡形成、转运、锚定及囊泡与质膜的融合等过程，在细胞内吞和分泌途径中发挥分子开关的作用.不同生物中Rab的结构和作用机制非常保守，但Rab的分类和生理学功能存在差异.植物Rab不仅行使类似于动物或微生物同源Rab的细胞学功能，而且在植物生长发育、激素信号调节、生物或非生物胁迫应答等方面表现出功能特异性.本文结合近年的研究进展，对植物Rab的分类、结构、调节机制和功能进行了综述，并对当前植物Rab功能研究的难点和方向进行了
讨论.

Select

GUS在植物基因功能研究中的应用和优化

杨丹丹王俊杰梁卫红

中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(8): 761-768.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

β-葡糖醛酸酶(GUS)报告系统是现代分子生物学研究领域中被广泛使用的一种重要工具，在解析基因时空表达调控的研究中发挥着重要作用.本文概述了报告基因GUS的生化特性及检测手段,从启动子元件鉴定、基因诱捕、无标记转基因技术等方面论述GUS的应用现状和优势,并针对内源GUS、GUS抑制因子等问题和改进优化手段进行了分析,为该技术在植物功能基因研究中进一步拓展提供新线索和思路.

Select

rBTI联合紫杉醇通过激活NFκB/p65促进MCF-7细胞凋亡

李玉英吴燕子白崇智崔晓东王转花

中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(8): 769-777.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

rBTI、紫杉醇均有抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡等作用，但两者联合用药对肿瘤细胞的影响尚不明确. 本文通过MTT比色法检测rBTI与紫杉醇联合作用对MCF-7细胞增殖的影响; 采用流式细胞术分析, 对MCF-7细胞凋亡以及ROS水平进行检测; 利用qRT-PCR和 Western印迹方法，检测rBTI与紫杉醇联合作用后凋亡因子表达情况. 结果表明，rBTI( 2.5 μmol/L)与紫杉醇（0.05～0.5 μmol/L）联合作用于MCF-7细胞后，能显著抑制其增殖. 将rBTI与紫杉醇进行联合协同用药，诱导了MCF7细胞凋亡及ROS的产生；同时与rBTI单独作用时相比，联合作用明显上调了p53、Bax的表达，促进了IκBα蛋白的磷酸化以及NFκB/p65的核转位；与rBTI组和紫杉醇单独作用组相比，两者联合用药明显下调了Bcl-2和CyclinD1的表达. 本研究证实，rBTI联合紫杉醇通过诱导ROS的产生，激活NFκB/p65信号转导途径，协同促进MCF-7细胞的凋亡.

Select

CHIR-99021与FGF8协同诱导人表皮干细胞牙向分化

王冰梅刘英林程琳张彦定胡雪峰

中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(8): 778-786.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

人表皮干细胞(human keratinocyte stem cells, hKSCs)可作为上皮源性的成体干细胞应用于牙齿再生，但是其诱导效率较低.本研究利用小分子化合物CHIR-99021提高hKSCs的Wnt/β-catenin信号活性，再与具有诱导成牙潜能的小鼠牙胚间充质重组，构建嵌合体,并移植裸鼠肾囊膜下培养20 d. 将嵌合体组织切片，并利用组织染色和免疫组化等方法鉴定牙齿结构. 结果显示，经FGF8诱导处理的hKSCs与小鼠牙胚间充质构成的嵌合体的成牙率为27.80%，其中成釉率仅为40.00%；经CHIR99021诱导处理的hKSCs与小鼠牙胚间充质构成的嵌合体的成牙率仅为18.20%，其中成釉率高达100%；而CHIR99021与FGF8协同作用，则进一步提高嵌合体成牙率至40.00%，其中成釉率也达75.00%. 进一步的研究发现，经CHIR-99021处理后，hKSCs的Wnt/β-catenin信号活性明显提高，同时FGF8的表达水平也显著上调. 以上结果表明，CHIR-99021可通过上调Wnt/β-catenin信号活性水平，同时促进FGF8表达，与FGF8协同，高效诱导hKSCs分化为具有分泌釉质功能的成釉质细胞. 研究结果对利用hKSCs作为上皮来源的成体细胞应用于人类牙齿再生的研究具有重要意义.

Select

益肾填精中药拮抗环境内分泌干扰物引致青春前期大鼠性腺发育不良的作用机制

高连连蔡德培谢长明李祥婷

中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(8): 787-796.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

邻苯二甲酸二(2乙基己基)酯(di2ethylhexylphthalate，DEHP)及氯氰菊酯(cypermethrin, CYP)是我国广泛存在的两种环境内分泌干扰物(environmental endocrine disruptors, EEDs)，具有显著的抗雄激素活性及生殖毒性，可致雄性性腺发育不良. 祖国传统医学认为,性腺发育不良属肾精亏虚、肾气不足，临床采用益肾填精中药治疗取得显著疗效，但其具体机制尚不清楚.本实验主要研究益肾填精中药拮抗EEDs——DEHP及CYP引致青春前期大鼠性腺发育不良的作用机制. 实验中染毒组分别饲喂 500 mg/kg DEHP，80 mg/kg CYP及500 mg/kg DEHP+80 mg/kg CYP，治疗组采用40 mg/kg 益肾填精中药与相应染毒物质同时饲喂. 研究结果显示，DEHP、CYP单独及联合染毒组的青春前期大鼠睾丸重量、睾丸系数及血清睾酮水平均显著下调；睾丸氧化应激指标MDA含量、GSH-Px活性明显上升；病理组织及超微结构显示睾丸形态萎缩；睾丸支持细胞功能相关的基因与蛋白表达均出现不同程度的下调. 益肾填精中药治疗干预后，睾丸重量、睾丸系数及血清睾酮水平均显著增加并接近对照组水平；睾丸形态明显改善，细胞数量增加；睾丸氧化应激水平下降；实时荧光定量PCR及Western印迹显示睾丸支持细胞功能相关的基因与蛋白的表达水平显著上调. 本研究证实,益肾填精中药对DEHP及CYP的抗雄激素活性及生殖毒性有显著拮抗作用，可明显拮抗染毒物质诱导的氧化应激作用，促进睾酮分泌，并改善睾丸支持细胞功能，这可能是益肾填精中药有效拮抗EEDs抗雄激素活性及其生殖毒性的主要作用机制之一.

Select

大鼠肝再生过程中肝细胞质膜微区差异蛋白质鉴定与分析

蔡乃旋李江林姜淼王紫珺李梅香王迎王贤纯陈平

中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(8): 797-806.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

动物肝是具有极强再生能力的器官,研究并阐明肝再生的机制可为肝移植等与肝损伤相关的疾病治疗提供理论依据.质膜包括“脂筏(lipid rafts)”和“质膜微囊(caveolae)”的微区，具有参与胞吞胞饮、信号转导、运输胆固醇等重要功能.肝再生过程中，肝质膜微区脂筏蛋白质受到内部调控的影响会发生改变. 捕获脂筏微区信号蛋白分布的变化，对于理解和阐明肝再生过程中信号通路途径有重要意义.本研究应用成熟的大鼠2/3肝切除模型结合蔗糖密度梯度离心法，提取假手术组与肝再生组大鼠肝细胞质膜，并进一步纯化获得质膜微区蛋白质.通过SDS-PAGE分离以及ESI-Q-TOF质谱鉴定，对获得的质膜微区蛋白质进行差异分析. 结果显示，有30个微区蛋白质差异表达，其中13个上调、17个下调.生物信息学分析表明，所鉴定到的蛋白质主要参与细胞增殖、程序性死亡、细胞凋亡等调控，同时涉及到与肝再生密切相关的血管生成等信号通路.本文为质膜微区蛋白质的研究提供了方法上的参考以及相关基础数据，为后续临床肝再生的研究奠定了一定的基础.

Select

基于ChIP-Seq进行肿瘤睾丸抗原XAGE-1b基因表达蛋白的DNA结合位点鉴定

高学鹏朱嗣博赵瑞华朱乃硕

中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(8): 807-814.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

XAGE-1b（X antigen family member 1B）属于XAGE亚家族，是一种肿瘤睾丸抗原（cancer/testis antigen，CTA），表达于正常人睾丸组织和多种类型的肿瘤细胞中.本实验室前期研究发现,该基因在涎腺腺样囊性癌高转移细胞系中呈高表达.为了进一步研究XAGE-1b下游调控基因，本实验采用ChIPSeq技术筛查XAGE1b蛋白质可能存在的DNA结合片段. 结果发现,XAGE-1b下游调控基因富集于细胞分裂（cell division，P-Value＝7.95e-04）、细胞周期调控（cell cycle，P-Value＝5.532e-03）、及癌症相关基因（GESA/MSigDB module_11，P-Value＝2.010e-06）中．同时发现,XAGE-1b下游调控多个基因的表达产物（NCBI/interactions 22827，P-Value＝4.678e-06）能与原癌基因c-Myc的启动子抑制蛋白PUF60发生蛋白质相互作用，并通过qPCR进行了验证．这些研究对阐明XAGE-1b在肿瘤细胞的增殖和转移中的作用有重要意义.

Select

卡铂通过抑制ERK1/2通路诱导人卵巢癌细胞S和G0/G1期阻滞

刘丹郑立红李兴媚

中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(8): 815-823.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

卡铂(carboplatin, CBP)是一种抗肿瘤活性较强的化疗药物, 通过诱导细胞周期阻滞抑制肿瘤细胞生长, 但其诱导细胞周期阻滞的报告不甚一致. 本研究探索卡铂对卵巢癌HO-8910细胞生长及细胞周期进程的影响. MTS结果显示, 卡铂以浓度和时间依赖方式抑制卵巢癌HO-8910细胞生长, 联合使用ERK1/2通路抑制剂PD98059可使卡铂抗卵巢癌细胞增殖作用增强. 采用Giemsa染色法观察到, 卡铂与PD98059单用或联用均能致卵巢癌细胞发生明显的形态学变化. 流式细胞术检测细胞周期发现, 随卡铂浓度的增高, S期阻滞作用增强; 抑制ERK1/2通路可拮抗卡铂对HO-8910细胞S期阻滞作用, 增加G1期阻滞作用, 而对G2/M期细胞影响不明显. Western印迹结果显示, 随卡铂浓度的增高, p-ERK1/2、Cdc2(Y15)和pCdc2(T161)的表达逐渐升高, Cyclin E1和Cyclin B1的表达逐渐降低; 抑制ERK1/2通路可将卡铂上调,p-ERK1/2和p-Cdc2(T161)的作用反转为下调作用, 上调Cdc2(Y15)的表达受阻, 抑制Cyclin B1的下调作用, 促进Cyclin E1的下调作用. 本研究结果提示, 卡铂通过抑制ERK1/2激活, 诱导人卵巢癌HO-8910细胞S和G1期阻滞, 抑制卵巢癌细胞生长.

Select

鸡Apo-AI基因g.-163 A>T单核苷酸多态性的功能性分析

乔书培王维世荣恩光于莹莹闫晓红李辉王宁

中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(8): 824-830.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

鸡Apo-AI基因g.-163 A>T单核苷酸多态性(SNP)与鸡腹脂重和腹脂率显著相关. 生物信息分析显示，该SNP位于鸡ApoAI基因转录起始位点，提示它可能是一个功能性SNP. 为确定该SNP的功能性, 本研究分别构建了含该SNP位点A和T等位基因的启动子报告基因载体，分别在DF1细胞和HepG2细胞中比较这2个等位基因对鸡ApoAI基因启动子活性的影响. 研究发现，T等位基因的启动子报告基因活性及报告基因mRNA表达水平均显著高于A等位基因（P<0.05），表明该SNP影响基因表达,是1个功能性SNP. 本研究结果提示,鸡Apo-AI基因g.-163 A>T有望作为优质鸡育种的功能性分子标记.

Select

一种新的以影像为基础的细胞增殖和细胞毒性检测方法

卢瑶王献慧李淑艳

中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(8): 831-836.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑盐)（MTT）比色法是传统上检测细胞增殖和细胞毒性的常用方法.
CloneSelectTM成像系统是一种以影像为基础的用于分析细胞生长的可视检测系统.本研究采用人结直肠癌HCT116细胞系，运用CloneSelect成像系统和MTT方法分别检测药物阿的平的细胞毒性，并采用BlandAltman作图法比较两种实验方法获得的pEC50值，分析两种研究方法获得的结果的一致性. 结果表明，CloneSelectTM成像系统和MTT法获得的pEC50值具有较好的一致性.与MTT方法相比，基于影像的CloneSelectTM成像分析技术检测快速、无损伤且结果更准确，获取资料不损伤细胞，允许后续其它时间点或动力学检测. 研究提示,这种新的以影像为基础的检测技术可以替代MTT方法，用于分析不同药物的抗细胞增殖活性.

Select

利用ZFN删除转基因猪细胞中的多拷贝EGFP基因

任广彩张英丛佩清陈瑶生何祖勇

中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(8): 837-842.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

锌指核酸酶（zinc finger nuclease, ZFN）是由特异性识别DNA的锌指结构域和Fok I切割结构域组成，能够在基因组特定位点上切割DNA，引起DNA双链断裂（double-strand break, DSB）. 通过DSB修复机制，可以使基因修饰的效率比传统方法提高102～104倍．目前,利用ZFN对动物内源基因进行敲除的研究较多，但对转基因动物中外源多拷贝基因进行敲除的报道较少．本研究首先利用荧光定量PCR法对本实验室培育的两头转基因猪中增强型绿色荧光蛋白（enhanced green fluorescent protein, EGFP）基因的拷贝数进行鉴定，发现其拷贝数分别为11.95和17.36拷贝；然后将靶向EGFP的一对ZFN转染进拷贝数为1736的EGFP转基因猪的成纤维细胞中，并通过流式和CEL-1酶切方法检测敲除效率. 结果表明,转染400 ng、800 ng和1 200 ng ZFN的切割效率分别为0.97%、1.39%和1.76%，可见随着转染ZFN剂量的增加，ZFN的切割效率逐渐提高．但是,不发绿色荧光的细胞比例却没有明显提高，因此认为,ZFN敲除转基因动物中多拷贝基因的效率还是比较低．

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

过刊目录

模态框（Modal）标题

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

过刊目录