过刊目录

  • 全选
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    综述
  • 高燕,盛静浩,许正平
    中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(4): 315-320.
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    血管生成素是核糖核酸酶A超家族成员之一,具有较弱的核糖核酸酶活性. 最新研究发现,血管生成素参与细胞内多种RNA的代谢过程. 在生长条件下,血管生成素可以发生核转位聚集于细胞核中,促进rRNA转录,并可参与其剪切加工,同时它也调控一系列mRNA基因的转录,最终促进细胞的生长和增殖;在应激条件下,血管生成素能降解tRNA形成tiRNA,抑制细胞内整体蛋白质的翻译水平,并促进应激小体的形成,激活细胞内应激保护机制,从而促进细胞存活. 此外,血管生成素还可参与非编码小RNA等RNA代谢过程. 本文概述了血管生成素在RNA代谢中的作用与分子机制等方面的进展,并探讨了其在疾病发生和发展中的作用,以期开拓血管生成素的研究新思路.
  • 纪元,龙建纲,刘健康
    中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(4): 321-327.
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    活性氧是细胞代谢中产生的有很强反应活性的分子,易将邻近分子氧化,并参与细胞内多种信号转导途径,对相关生理过程进行调控.自噬是真核细胞通过溶酶体机制对自身组分进行降解再利用的过程,在细胞应激及疾病发生等过程中发挥重要作用.本文对活性氧和自噬相关调节进行分类介绍,根据新近研究进展,从活性氧参与的自噬性死亡、自噬性存活以及线粒体自噬3方面探讨了相关信号转导机制,对活性氧作为信号分子参与的自噬调控途径做一总结和介绍.
  • 成捷 刘新光 熊兴东
    中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(4): 328-335.
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    近年来,心血管疾病在我国的发病率和致死率呈逐年上升趋势,已成为威胁我国公众健康的重要疾病之一. 尽管长期的研究使人们对心血管疾病有了一定的了解,但是其发病机制尚未完全清楚. 非编码 RNA(non-coding RNA,ncRNA)是指转录组中不编码蛋白的功能性RNA分子,包括微小RNA(microRNA,miRNA)和长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)等. miRNA是一类在进化上高度保守,具有转录后调节活性的单链非编码小分子RNA. 而lncRNA是一类转录本长度超过200个核苷酸的功能性非编码RNA分子. 研究表明,这些功能性ncRNA不但在细胞增殖、分化和衰老过程中发挥着重要作用,还参与了癌症、神经退行性疾病和心血管疾病等疾病的病理进程. 本文将着重概述miRNA 和lncRNA在心血管疾病中的作用及其最新研究进展.
  • 满朝来 常杨 唐高霞
    中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(4): 336-342.
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    在细胞中,过氧化物酶体增长因子活化受体(PPARs)和microRNAs相互制约和调控从而影响相关细胞、组织和器官的功能,在脂肪细胞分化与代谢、炎症、癌症和心血管疾病等生理和病理过程中发挥重要作用.本文首先简要总结了PPARs发挥作用的分子机制;并分别以PPARs家族每一个成员(PPARα、PPARβ和PPARγ)为对象,分析了PPARs调控下的microRNAs表达及功能,探讨了microRNAs调控下的PPARs表达活性变化,并归纳了PPARs与microRNAs之间的调控关系;最后对PPARs相关microRNAs的应用前景进行了简单探讨.研究PPARs与microRNAs间的网络调控关系,可以为PPARs与microRNAs在理论和实践中的深入研究和应用提供参考.
  • 王阳 骞爱荣 商澎
    中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(4): 343-348.
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    斯钙素(stanniocalcin,STC)是一种最早在硬骨鱼中发现的糖蛋白类激素. 哺乳动物斯钙素在体内钙磷代谢、肌肉骨骼系统的发育等方面均起到重要作用,并且在心血管疾病、肿瘤发展以及神经系统疾病中也扮演重要角色. 近年,斯钙素在骨骼发育中的作用逐渐引起科学界的关注. 骨组织中STC由成软骨细胞、成骨细胞分泌,并以自分泌/旁分泌的形式作用于局部组织细胞中,主要影响软骨形成和骨重建过程.本文以斯钙素为主题,综述了其生化分子特性、其在骨组织中的表达分布特点,以及该分子在成熟骨组织骨重建过程中的作用机制. 本文将为深入了解斯钙素在骨组织代谢中的作用提供帮助.
  • 张金阳 宋玉竹 夏雪山
    中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(4): 349-354.
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    活性蛋白质表达谱(activity-based protein profiling, ABPP)分析技术是功能蛋白质组学的一种策略,属于化学蛋白质组学的一部分.它借助化学小分子从功能角度直接切入蛋白质组的研究,能够直接对蛋白质组中感兴趣的靶酶蛋白的活性进行检测,为药物的发现提供强有力的支持.因此,ABPP技术被认为是基于功能的新一代蛋白质组学技术.随着ABPP分析技术和方法的不断成熟,其应用领域也不断扩展.最近一系列研究表明, 今后ABPP分析技术可能成为病毒学研究的又一重要武器.本文综述了ABPP分析技术的基本原理及其在病毒学研究中的应用.
  • 研究论文
  • 宋莉 尉文霞 常姣 李卓玉
    中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(4): 355-361.
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    结肠腺瘤息肉蛋白(APC)是一个肿瘤抑制因子,它不仅参与Wnt信号通路的传导,而且对细胞粘附、细胞骨架的组织和迁移等都有影响.APC突变发生于大多数结肠癌中.为了探讨APC突变对细胞粘附的影响及机制,本研究利用细胞粘附实验分析了MDCK-APC-N1和对照MDCK-GFP稳定表达细胞株系的细胞粘附情况.实验结果显示,在MDCK细胞中过表达APC-N1导致细胞-细胞间的粘附减少,细胞-基质间的粘附增加.荧光定量PCR和Western印迹实验表明,在MDCK-APC+N1细胞中,E-cadherin表达水平降低,CD29、P-FAK (Y397)、β-catenin和 P-AKT (T308)表达水平升高. 在MDCK-APC-N1细胞中,敲减β-catenin导致E-cadherin表达量升高,而CD29表达没有明显变化.进一步利用PI3K抑制剂LY294002处理MDCK-APC-N1细胞,结果发现,E-cadherin表达量明显升高,CD29表达量明显降低.这些结果揭示,APC-N1可活化 PI3K/AKT 信号通路,进而改变粘附蛋白E-cadherin和CD29影响细胞粘附.
  • 王超男 赵冰海 李洪志 刘洁婷 张春雷 王晓莉 马洪闯 冯彪 初彦辉
    中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(4): 362-368.
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    MicroRNAs(miRNAs)通过与靶基因的相互作用发挥其生物学功能. miR-23b作为抑癌基因,参与了许多肿瘤和自身免疫疾病的发生过程,但其在糖尿病肾病中的作用尚不清楚.为了探讨miR-23b与靶基因TAB2/3作用对糖尿病肾病纤维化的影响,本实验通过建立糖尿病小鼠模型和糖尿病HK-2细胞模型,利用实时定量荧光PCR方法,检测糖尿病小鼠模型肾mRNA表达,发现miR-23b在糖尿病组(Dia组)表达低于正常组(P<0.001).利用Western印迹检测相关蛋白,结果显示,与正常组相比,TAB2/3,FN和α-SMA在糖尿病组高表达,并且TAB2/3在糖尿病组中持续高表达.利用基因转染技术过表达miR-23b可以同时在mRNA和蛋白水平上抑制TAB2/3,P38和ERK1/2的表达,FN表达也显著降低.以上结果显示:miR-23b可能通过作用靶基因TAB2/3及其信号通路下游,抑制糖尿病肾病纤维化.
  • 张燕虹 李长清 牛陵川
    中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(4): 369-376.
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    环腺苷酸(cAMP)作为细胞内的重要第二信使之一,主要通过激活下游cAMP依赖性蛋白激酶A(PKA),进一步激活转录因子-cAMP效应元件结合蛋(CREB),达到促进损伤轴突再生的作用.精氨酸酶Ⅰ主要是通过促进多胺的表达,从而克服髓鞘相关抑制因子对轴突再生的抑制作用,达到促进轴突再生的效果.在脑缺血中,cAMP促进轴突再生的过程是否有精氨酸酶Ⅰ的参与及其与RhoA信号通路的关系尚不清楚.本研究采用线栓法制备脑缺血再灌注模型(MACO),采用Longa 5评分法对大鼠运动功能进行评分,利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western蛋白印迹方法分别检测缺血灶周边脑组织生长相关蛋白43(GAP-43)和RhoA的mRNA和蛋白表达,免疫组化法进行GAP-43的形态学检测,作为轴突再生的标志.通过尾静脉注射cAMP类似物db-cAMP增加脑缺血后大鼠脑组织内cAMP的浓度后发现:db-cAMP处理可明显降低MACO大鼠的运动功能评分,且可促进GAP-43 mRNA及蛋白的表达,抑制RhoA mRNA及蛋白的表达,由此可见db-cAMP处理可促进脑缺血后大鼠运动功能的恢复,且这一过程与抑制RhoA通路,进而促进轴突再生有关;通过在db-cAMP的基础上给予精氨酸酶Ⅰ拮抗剂NOHA来降低精氨酸酶Ⅰ的活性发现:给予NOHA的大鼠运动功能评分明显增加,这一变化趋势与RhoA mRNA及蛋白表达的变化趋势相一致,而与GAP-43 mRNA及蛋白表达的变化趋势相反. 因此可推断:精氨酸酶Ⅰ参与了db-cAMP促进轴突再生、改善脑缺血后大鼠运动功能的过程,且与钝化RhoA通路有关.
  • 张鹏 李书涛 付春华 周蓬蓬 宋发军 余龙江
    中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(4): 377-382.
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    本文通过克隆3′-N-去苯甲酰紫杉醇N-苯甲酰转移酶(3′-N-debenzoyltaxol-N-benzoyltransferase,DBTNBT)基因Dbtnbt,构建其表达载体p1303-SDbtnbtN,转化中国红豆杉细胞,经潮霉素抗性筛选获得转基因细胞系. 转基因细胞分析结果表明,T-DNA及其包含的基因与宿主细胞染色体成功整合;转基因细胞中报告基因GusA-mgfp5正常表达;转基因细胞的Dbtnbt mRNA表达量是未转化细胞的1.33 倍;转基因细胞的紫杉醇产量约为27.3 μg/g,是未转化细胞的1.37倍. 本研究结果表明,过表达Dbtnbt基因将中国红豆杉细胞的紫杉醇产量提高约37%.
  • 肖亚飞 吴更
    中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(4): 383-389.
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    Amer1 (APC membrane recruitment protein 1)又称为WTX(Wilms’ tumor X),是首个发现位于X染色体上的抑癌基因.由于其定位的特殊性,Amer1近年来成为研究的热点之一.研究表明,Amer1作为骨架蛋白在细胞内与多种蛋白(APC,β-catenin,Axin等)直接结合,在Wnt信号通路中发挥着重要功能.据报道Amer1/WTX含有3个肿瘤抑制蛋白质APC (adenomatous polyposis coli, APC)的结合位点,对于APC在细胞膜上的定位过程中发挥着重要的作用.但是,通过序列比对发现,Amer1可能存在第4个被忽略的APC的结合位点,定位于A1和A2之间.为了验证该片段能否与APC结合,分别构建了GST-Amer1 (365-375)和His-APC (407+775)两种重组蛋白.通过GST-pull down,证明了这两个片段存在相互作用,并进一步通过ITC (isothermal titration calorimetry) 实验测定了两者结合的亲和力.本研究结果不仅在体外证实了Amer1第4个APC结合位点的存在,也为APC和 Amer1/WTX复合物的结构和功能的研究打下了良好的基础.
  • 韩悦 陈德喜 侯庆生 公维鹏 朱振宇 郭洪亮
    中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(4): 390-394.
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    为研究ASPP2对奥沙利铂诱导的结肠癌细胞系HCT116 p53+/+(野生型)凋亡及周期的影响.利用ASPP2(rAd-ASPP2)及p53腺病毒(rAd-p53)感染HCT116 p53+/+细胞,经奥沙利铂50 μmol/L诱导细胞凋亡及周期改变.Western印迹检测ASPP2及p53的表达水平;MTT法检测ASPP2腺病毒对奥沙利铂诱导的HCT116细胞活性的影响;Calcein/PI吸收试验检测细胞凋亡情况;流式细胞术分析细胞周期分布. 结果显示,ASPP2、p53共同过表达,或者ASPP2单独过表达均能增强奥沙利铂诱导的HCT116 p53+/+细胞增殖抑制,以及S期抑制并伴有细胞凋亡水平的升高;而无奥沙利铂诱导时,ASPP2对HCT116 p53+/+细胞的活性、细胞周期及细胞凋亡水平的影响无统计学意义. 上述结果表明,ASPP2能够增强奥沙利铂诱导HCT116 p53+/+细胞的增殖抑制、细胞周期抑制和细胞凋亡.
  • 王卓然 侯晓明 曲波 王杰 高学军 李庆章
    中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(4): 395-401.
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    Pten作为抑癌基因,参与调控细胞生长、粘附、凋亡以及其它细胞活动.目前,国内外关于Pten在奶牛乳腺发育过程中表达及调节的研究鲜有报道.为了揭示Pten的表达与奶牛乳腺发育与泌乳之间的关系,本研究应用qRT-PCR技术检测Pten在不同泌乳时期和不同乳品质的奶牛乳腺组织中的表达差异,进而应用脂质体转染方法,通过siRNA介导的RNA干扰技术改变Pten基因在奶牛乳腺上皮细胞中的表达量,CASY法检测细胞活力,用ELISA试剂盒检测细胞分泌β-酪蛋白的含量,采用qRT-PCR、Western 印迹等技术检测Pten对奶牛乳腺上皮细胞中乳蛋白相关信号通路基因表达的影响.结果显示,泌乳期高乳品质奶牛乳腺组织中Pten表达水平显著低于泌乳期低乳品质及干乳期奶牛;Pten基因沉寂后,细胞活力提高,β-酪蛋白质量浓度增加,CSN2、AKT、MTOR、STAT5表达量增加.研究表明,Pten可通过抑制细胞活力和乳蛋白分泌而影响泌乳.
  • 张东芳 肖鹏 韩晨露 李卫国 王坤英
    中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(4): 402-408.
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    表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate, EGCG)具有抗氧化、抗癌、抗炎等多种生物学特性,但对巨噬细胞中表达TNF-α及IL-1β的报告尚存在争议. 本文旨在探索EGCG对脂多糖(LPS)诱导的小鼠腹腔巨噬细胞和RAW264-7细胞促炎细胞因子Tnf-α和Il-1β基因表达的影响.MTT结果显示,0~100 μmol/L EGCG对RAW264-7细胞活力没有影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和ELISA分析显示,1 mg/L LPS可显著升高小鼠腹腔巨噬细胞和RAW264-7细胞Tnf-α和Il-1β mRNA和蛋白水平,EGCG单独处理对巨噬细胞Tnf-α和Il-1β的基因表达与蛋白生成没有影响,但可以抑制LPS诱导的巨噬细胞Tnf-α和Il-1β的基因表达与蛋白生成,并存在剂量依赖效应.上述结果提示,EGCG可以剂量依赖方式抑制LPS诱导的巨噬细胞促炎细胞因子Tnf-α和Il-1β的表达,这可能与EGCG的抗炎效应有关.
  • 技术与方法
  • 张梅超 刘勇 韦有恒 马维骏
    中国生物化学与分子生物学报. 2014, 30(4): 409-414.
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    TIS11是转录后调控因子TTP在果蝇中的同源物,在果蝇幼虫免疫、发育和代谢等多种生理过程中都发挥重要作用.为研究TIS11的功能,需要利用GAL4/UAS系统获得整体高干扰效率的Tis11 RNAi果蝇幼虫.为平衡GAL4转基因果蝇高活性启动子的致死效应,需要使用带有成蝇卷翅标记CyO的第二染色体的平衡子,但CyO标记在幼虫中无可见表型,因此无法区分杂交幼虫的基因型.为解决这一问题,引入了带有CyO-GFP标记的平衡子.携带CyO-GFP平衡子的G-Actin果蝇与携带Tis11 RNAi序列的101765果蝇杂交,杂交幼虫可以通过GFP标记进行区分,剔除带有CyO-GFP平衡子的幼虫,从而挑选出表达Tis11 RNAi序列的幼虫,最后经real-time PCR检测所得幼虫具有整体高干扰效率.