中国生物化学与分子生物学报

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王童隋立乾康翠洁

中国生物化学与分子生物学报. 2013, 29(12): 1097-1105.

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Syntenin蛋白是在原核生物及真核生物中广泛存在的一类胞内衔接蛋白（adaptor proteins）. Syntenin由N端结构域（N-terminal domain,NTD）、两个串联的PDZ结构域(postsynaptic density protein, disc large and zonula occludens, PDZ)和C端结构域（C-terminal domain,CTD）组成,在生物进化过程中相对保守. Syntenin蛋白的PDZ结构域可与不同膜受体C端的PDZ结合基序（PDZ-binding motif，PBM）特异性结合， PDZ结构域结合受体的多样性导致了syntenin功能的多样性. 本文综述了syntenin蛋白的发现与分布及其结构特征，对syntenin在肿瘤转移、细胞质膜蛋白组装、参与动物免疫等领域的研究成果进行了较为详细的综述，同时介绍了syntenin在参与动物胚胎发育调控、血管生成和轴突生长等方面的研究进展.

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Notch信号通路对免疫细胞的调节作用

董丽孔令蕊王恬

中国生物化学与分子生物学报. 2013, 29(12): 1106-1112.

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Notch家族是一组进化上高度保守的跨膜蛋白，可以广泛调节细胞的发育和分化.越来越多的研究发现，Notch信号通路可以通过调节多种免疫细胞的发育和功能来调节机体的免疫功能.本文综述了Notch家族的组成，其调控因素及其靶基因，Notch信号通路对造血干细胞、固有免疫细胞和适应性免疫细胞的调节作用以及Notch信号通路参与的免疫相关疾病.Notch信号通路对造血干细胞、巨噬细胞、树突状细胞、肥大细胞、T和B淋巴细胞的发育和功能的发挥都有重要的调节作用，并参与肿瘤、病毒感染、炎症反应和自身免疫疾病等免疫相关疾病的发生.

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线粒体融合、分裂与神经变性疾病

许美芬何轶群管敏鑫

中国生物化学与分子生物学报. 2013, 29(12): 1113-1119.

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线粒体是一种处于高度运动状态的频繁地进行融合与分裂的细胞器.在生理状态下,线粒体的融合与分裂处于一种平衡的状态，这种平衡受线粒体融合蛋白1/2（Mfn1/2）、视神经萎缩蛋白1（OPA1）和动力相关蛋白1（Drp1）的调节. Mfn1/2介导线粒体外膜的融合，而OPA1则参与线粒体内膜的融合，这些蛋白受泛素化和蛋白水解的调控. Drp1参与线粒体的分裂过程，受多种翻译后修饰的调节，如磷酸化、泛素化、SUMO化和S硝基化.对于神经元来说,线粒体融合分裂的动态平衡对保证神经元末梢长距离运输和能量平均分布是非常重要的.因此,线粒体融合分裂异常可能是许多神经变性疾病的致病因素之一.对线粒体融合而言,Mfn2错义突变将导致遗传性运动感觉神经病2型（CMT2A）；OPA1错义突变将引起显性遗传性视神经萎缩(ADOA)，而就线粒体分裂而言，Drp1突变与多系统功能障碍的新生儿致死性相关.

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糖原合酶激酶-3，一个信号通路的重要调控因子

宾晓芸姜明国翁汉荣

中国生物化学与分子生物学报. 2013, 29(12): 1120-1127.

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糖原合酶激酶-3 (glycogen synthase kinase-3,GSK-3) 是一种多功能的丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶，在蛋白质合成、信号传递、细胞增殖、细胞分化、神经功能、肿瘤形成及胚胎发育等众多细胞进程中均扮演重要的角色.GSK-3 能够使多种底物发生磷酸化，并参与胰岛素、Wnt及Hedgehog 等多个信号通路的调控. GSK-3抑制剂在信号通路中能有效地抑制病理情况下GSK-3活性的异常增高，达到治疗的目的.GSK-3的抑制剂将作为一种潜在的药物对治疗糖尿病、阿尔海默茨症、肿瘤等疾病发挥效用.

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microRNAs在骨形成中的作用——运动调控骨代谢的新机制

陈祥和李世昌孙朋

中国生物化学与分子生物学报. 2013, 29(12): 1128-1135.

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microRNAs(miRNAs)是一类具有组织或发育阶段特异性的小分子、非编码单链RNA，通过转录后与靶基因特定序列结合来发挥其调控作用. 作为骨中的最重要的两种重要细胞——成骨细胞和破骨细胞，其代谢平衡与骨形成密切相关.研究发现，miRNAs在调节成骨细胞和破骨细胞分化及功能发挥上具有重要作用，并且运动训练可通过调节miRNAs进而调控骨细胞分化. 一般来说，适宜强度运动训练可上调某些miRNAs表达来促进成骨细胞或破骨细胞分化及功能；当失重或过量运动时，则会产生抑制作用. 本文就miRNAs调控干细胞向成骨细胞和破骨细胞分化及功能发挥的分子生物学机制以及运动训练调节与骨代谢相关miRNAs表达的研究进展进行综述.

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大肠杆菌（Escherichia coli）LexA蛋白的结构与功能

孙宏伟范丽菲莫日根

中国生物化学与分子生物学报. 2013, 29(12): 1136-1144.

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LexA蛋白首先在大肠杆菌（Escherichia coli）中作为SOS反应的重要调节因子之一被发现. LexA蛋白含有202个氨基酸，由N端DNA结合结构域和C端催化核心结构域构成. 细胞中LexA蛋白大都以二聚体形式存在，并且有可切割和不可切割两种构象. 在正常生理条件下，LexA特异性结合16 bp的保守序列5′-CTGTN8ACAG-3′，即SOS盒，抑制约50个基因的表达. 当发生DNA损伤时，活化的RecA蛋白通过稳定LexA蛋白可切割构象，促进LexA蛋白Ala84-Gly85间肽键的切割，产生的C端LexA85202和N端LexA184被蛋白酶ClpXP和Lon快速降解. LexA蛋白切割后，SOS基因以一定的顺序开始表达，并且完成DNA损伤修复. 本文回顾和总结了LexA蛋白分子结构，自我切割分子机制和影响因素，以及在SOS反应中的作用等方面的研究进展. 同时，也讨论了LexA蛋白在原核细胞中的进化保守性.

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miR-124和miR-520b下调Eps8表达并抑制HeLa细胞增殖

李新鑫陈成王芳妹丁小凤

中国生物化学与分子生物学报. 2013, 29(12): 1145-1152.

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Eps8是一个多功能的信号分子,参与肌动蛋白重排、受体内吞和肿瘤的发生发展. 为了寻找靶向Eps8的microRNAs (miRNAs)并研究其在宫颈癌中的调控作用,本文采用软件预测获得4个可能调控Eps8表达的miRNAs. 利用双荧光素酶报告系统和Western印迹研究发现，miR-124 和miR-520b结合到人EPS8 mRNA的3′非翻译区(untranslated region, UTR)并有效抑制Eps8蛋白的表达. 进一步细胞存活检测、MTT法和克隆形成实验分析显示，miR-124和miR-520b过表达显著抑制HeLa细胞的生长和增殖.而且,miRNA调节的Eps8下调能提高HeLa细胞对化疗药物顺铂的敏感性. 同时证明，miR-124和miR-520b激活肿瘤抑制基因p53与下游基因p21报告基因转录活性,也相应地上调了p53与p21的蛋白表达. 这些结果提示，miR-124和miR-520b下调癌基因EPS8表达,从而抑制HeLa细胞增殖，负调控宫颈癌细胞生长.

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抑癌基因MTUS1在结直肠癌的表达与其淋巴结转移呈负相关

向相汤为学向征骆赞

中国生物化学与分子生物学报. 2013, 29(12): 1153-1158.

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微管相关肿瘤抑制基因1(MTUS1)是一个新的肿瘤抑制基因，编码血管紧张素II AT受体结合蛋白（ATIPs）. MTUS1基因表达下调可促进肿瘤细胞增殖，但MTUS1基因表达在结直肠癌转移中的作用尚不知晓.本文以接受根治性手术、经病理检查证实的50例结直肠癌患者新鲜癌组织、癌旁组织和远癌组织为材料，探索MTUS1基因表达与结直肠癌淋巴结转移的关系. 荧光定量PCR及蛋白质免疫印迹揭示，有淋巴结转移的结直肠癌患者的癌及癌旁组织MTUS1 基因表达的mRNA及蛋白质水平明显低于无淋巴结转移的患者. MTUS1 蛋白质在淋巴结转移的结直肠癌患者的癌及癌旁组织表达下调，并进一步得到免疫组织化学的验证.实验结果提示，MTUS1的表达量与肿瘤的侵润深度有明显的负相关性.结合临床资料，推断抑癌基因MTUS1在肿瘤的发生、发展及淋巴转移中发挥重要作用.

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NFY结合位点缺失下调NPCEDRG基因启动子转录活性和效率

侯德富关瑞万恂恂陈主初

中国生物化学与分子生物学报. 2013, 29(12): 1159-1165.

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NPCEDRG基因是一个鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)相关基因. NPCEDRG基因启动子为TATA-less启动子，其核心启动子区域位于-146 ～-8 bp区，该区域包含NFY、STAT1和cMYB等转录因子结合位点. 前期研究结果提示,转录因子NFY可能参与NPCEDRG基因的转录调控. 为明确NFY转录因子在NPCEDRG基因转录中的作用，本研究应用报告基因载体系统分析方法对NPCEDRG基因核心启动子区进行NFY结合位点（或CCAAT-box）缺失突变及其功能分析，分别构建NPCEDRG基因核心启动子区NFY结合位点缺失突变的Luc和EGFP报告基因表达载体. 比较核心启动子和NFY结合位点缺失突变体报告基因载体的转录活性和效率. 结果表明，在MCF7和CNE2细胞中，NFY结合位点缺失突变体的转录活性分别约为其核心启动子转录活性66.94%和75.72%，即NFY结合位点缺失致使该启动子转录效率在MCF7和CNE2细胞中分别降低了33.06%和24.28%；EGFP报告基因表达载体系统研究结果与Luc报告基因载体系统结果基本吻合. 本研究再次证实,转录因子NFY通过结合NPCEDRG基因启动子的核心元件NFY结合位点参与NPCEDRG基因的转录调控，并提高其基因转录活性和效率.

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NF-κB p65的敲减加重结肠上皮HCT116细胞氧化损伤

周雪宏卢瑶曹继祥李淑艳

中国生物化学与分子生物学报. 2013, 29(12): 1166-1171.

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炎症细胞诱导的活性氧类生成和肠道氧化应激与慢性炎症性肠疾病以及结直肠肿瘤的发病密切相关。NF-κB信号通路参与氧化应激反应以及在结直肠炎症和肿瘤发生中的作用还并不完全清楚。本研究将化学合成一对编码小干扰RNA 序列、靶向人NF-κB 基因的长60 bp寡核苷酸链定向克隆至pSUPER小干扰RNA表达载体中，通过单酶切、双酶切及测序证实重组RNA干扰载体构建成功. 将构建成功的质粒转染至结肠上皮细胞HCT116中敲减p65，分别采用Western blot方法检测NF-κB p65蛋白表达水平，（3-(4，5-二甲基噻唑-2)-3，5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）方法检测细胞存活情况. 结果显示，pSUPER-NF-κB p65载体可特异性下调NF-κB p65蛋白表达；下调p65表达可导致过氧化氢诱导的HCT116内活性氧类物质生成增高，存活细胞数目显著减少，氧化损伤加重。研究表明，在人结肠上皮细胞内NF-κB p65通路的抑制显著加重了结肠上皮细胞氧化损伤情况.

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鳌虾血细胞中一种新的astakine样造血因子基因的克隆及表达

仉晓文夏晓华王可可彭方林王林嵩

中国生物化学与分子生物学报. 2013, 29(12): 1172-1179.

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甲壳动物的血细胞参与多种免疫反应，能够激活酚氧化酶原，产生抗菌肽或进行血细胞的封装、吞噬等. 本研究在克氏原螯虾血细胞中发现一种造血激素astakine，是与脊椎动物细胞因子前动力蛋白prokineticin同源的基因，命名为PcAst，该基因的开放阅读框为357 bp，编码118个氨基酸，具有保守的半胱氨酸残基. 半定量PCR结果显示，该基因只在血细胞中表达. 实时荧光定量PCR结果显示，在金黄色葡萄球菌和鳗弧菌刺激后，其mRNA表达量大幅上调. 白斑综合征病毒刺激后，该基因也呈持续上调表达趋势. 为进一步研究其功能，重组表达了PcAst蛋白，并对其蛋白水平表达模式进行了分析. 所有结果表明，该基因可能参与鳌虾血细胞的固有免疫应答反应，在抗细菌和抗病毒中起重要作用.

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莱茵衣藻中Limp77基因干涉后油脂含量升高

王蒙费小雯徐立新邓晓东

中国生物化学与分子生物学报. 2013, 29(12): 1180-1186.

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随着能源危机问题日益严重，可再生能源的研究渐渐成为目前研究的热点.微藻生物能源又以众多的优点成为目前可再生能源的研究重点.我们发现,在减氮培养下的莱茵衣藻,其油脂含量增加,Limp77基因的表达量明显下降.Limp77基因编码的是一类CCCH型锌指蛋白，具有通过与DNA、RNA结合来实现转录的调控或通过调控其它基因转录的锌指蛋白来实现转录调控的功能,极可能参与到莱茵衣藻油脂代谢调控中.通过利用RNAi干涉技术构建Limp77基因的干涉载体,并通过玻璃珠法转入莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）2A38中，研究其与油脂相关的生理生化指标的变化.实验结果表明，Limp 77基因明显抑制莱茵衣藻油脂的积累.

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低浓度多聚甲醛固定对蛋白免疫印迹技术的改良

孙忠权陆文艾恒

中国生物化学与分子生物学报. 2013, 29(12): 1187-1193.

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蛋白质免疫印迹（protein immunoblot,或Western blot）是一种广泛应用于检测细胞或组织蛋白质表达及蛋白质翻译后修饰的方法．前期的研究发现，使用低浓度（0.4%）多聚甲醛在蛋白质免疫印迹封闭环节前做膜固定，有助于提高蛋白质的检测效果．本文通过设置多聚甲醛的不同浓度和固定时间，进一步探索其在蛋白质免疫印迹技术中的应用．结果发现，低浓度（≤0.4%）多聚甲醛处理30 min，能明显提升蛋白质的检测效率．通过检测不同大小蛋白质的固定效果发现，大分子量的蛋白质使用多聚甲醛固定效果不明显，中等分子量和小分子量的蛋白质的固定效果较佳．综上研究表明，在中等或小分子量的蛋白质免疫印迹检测中，封闭环节前加入低浓度多聚甲醛固定，可以提高蛋白质的检测效果．

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