中国生物化学与分子生物学报

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李冬娜,肖国芝,ＳｃｈｍｉｄｔＪａｋｏｂ

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 353-357.

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采用凝胶阻滞实验比较分析了鸡烟碱样乙酰胆碱受体（ＡＣｈＲ）亚基基因－２７５／＋３６片段与分化／未分化肌细胞核抽提物的相互作用．发现未分化肌细胞核内存在两种直接识别ＡＣｈＲ启动子的结合活性，其结合反应不能被ＡＣｈＲα亚基基因增强子（含Ｅ盒子）竞争阻断，揭示此结合活性与ＭｙｏＤ家族无关，并表现为基因特异性结合；两种结合活性中一种结合活性既存在于未分化细胞，也存在于分化肌细胞，另一种结合活性只存在于未分化肌细胞．存在于未分化肌细胞、特异识别基因的结合活性不同于ＭｙｏＤ家族，也不同于已发现的Ｉｄ和Ｉ－ｍｆ（两者不能直接结合ＤＮＡ），可能与基因在未分化肌细胞中表达的负调控有关．

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人血小板生成素全长分子在酵母系统中的分泌表达及活性分析

田生礼,刘丽,芦兴武,孟岩,谢宝树,刘立忠,王颖,冷爱军

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 358-364.

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外源基因可通过整合型载体被整合到毕赤酵母（Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ）染色体上，获得遗传性稳定分泌表达株．利用酵母信号肽ＭＦα，对该信号肽蛋白酶识别位点的相关序列进行重新设计，使天然人ＴＰＯ成熟肽在毕赤酵母系统中分泌表达成功．表达产物经Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ进行分析，分子量约为６６ｋＤ处蛋白条带可被ＴＰＯ抗体识别；表达量约为０．１ｇ／Ｌ；Ｎ端氨基酸序列分析结果与设计的一致；表达产物对小鼠骨髓细胞形成巨核细胞集落形成单位（ｍｅｇａｋａｒｙ－ｏｃｙｔｅｃｏｌｏｎｙｆｏｒｍｉｎｇｕｎｉｔ，ＣＦＵ－Ｍｅｇ）具有明显的刺激作用．

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人肝金属硫蛋白-I_A基因在鱼腥藻中的克隆与表达

任黎,邵强,施定基,戴继勋,茹炳根

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 365-371.

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将人工合成的人肝金属硫蛋白（ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ，简称ＭＴ）－ＩＡ基因插入至中间载体ｐＲＬ－４３９上强启动子ｐｓｂＡ后，再将其与穿梭载体ｐＫＴ－２１０相连，得到大肠杆菌－蓝藻穿梭表达载体ｐＫＴ－ＭＴ，用三亲接合转移法将ｐＫＴ－ＭＴ转入丝状体蓝藻－鱼腥藻７１２０，经链霉素筛选，得到了稳定的转人肝ＭＴ－ＩＡ基因鱼腥藻．纯化单藻落，液体扩大培养．从鱼腥藻中提取的质粒经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析，确定人肝ＭＴ－ＩＡ基因已转入鱼腥藻７１２０中，Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析表明，金属硫蛋白在转人肝ＭＴ－ＩＡ基因鱼腥藻中得到了表达．经原子吸收光谱法测定表达量约为７００μｇＭＴ／ｇ鲜藻，重金属耐受性实验表明，得到了能耐受重金属－镉的转人肝ＭＴ－ＩＡ基因鱼腥藻，它将在清除水域中重金属污染和医药研究方面发挥重要作用．

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人睫状神经营养因子突变体基因克隆及高效表达

马红雨,蔡庆,朱美财,占志,陈友纯

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 372-376.

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为了提高人睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）的生物学活性，用ＰＣＲ方法获取Ｎ端缺失１４个氨基酸的ＣＮＴＦ基因片段，经酶切鉴定、核酸测序证实突变体的核苷酸序列，将其重组至表达质粒ｐＢＶ２２０，构建了ＣＮＴＦ突变体表达载体ｐＢＶ－ＣＮＴＦΔ．用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定其表达水平，鸡胚背根节无血清培养法检测表达蛋白的生物学活性．结果表明，ｐＢＶ－ＣＮＴＦΔ能表达生物学活性高于天然ＣＮＴＦ的约２６ｋＤ蛋白质，表达水平达３０％．为今后通过基因工程方法获得ＣＮＴＦ突变体，从而制备高效的ＣＮＴＦ制剂创造了条件．

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抗HIV-1 gp160独特型阳性抗体的序列分析及表达

赵云峰,王全立,杜芝燕,孙红琰,杨景庚,王海涛,马立人,殷震

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 377-381.

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为了确定从噬菌体抗体文库中筛选出的抗体的属性和方便目的基因的表达及其产物的纯化，对两株具有“１Ｆ７”独特型的抗ＨＩＶ－１ｇｐ１６０抗体基因进行了序列分析并构建了可溶性表达载体．发现３Ｂ株含有完整的Ｆａｂ段，１Ｄ株只有重链Ｆｄ段．序列测定表明两株克隆的Ｆｄ段基因完全相同，其可变区ＶＨ属于ＶＨⅠ亚群，而３Ｂ株的“轻链”序列与已知的人的κ和λ轻链无同源性．用从另外的Ｆａｂ抗体文库中筛选出来的３株抗乙肝表面抗原抗体的轻链与３Ｂ的重链重组，并选择一个ＨＩＶ－１ｇｐ１６０特异性较好的重组抗体株，命名为３Ｂｓ．构建了１Ｄ株与３Ｂｓ株的可溶性表达载体，免疫印迹实验证实了具有“１Ｆ７”独特型的抗ｇｐ１６０独特型阳性抗体的表达．

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神经营养因子GDNF编码顺序的克隆及表达产物的纯化

陈燕,张瑛,李金照,邓巍,夏另朝,邱蓉

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 382-385.

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根据基因库中的顺序，设计了胶质细胞源神经营养因子（ＧＤＮＦ）基因的ＰＣＲ引物，以此从人基因组ＤＮＡ中扩增并克隆了ＧＤＮＦ的编码序列，经ＤＮＡ测序确认后，该片段克隆到表达质粒ｐＥＴ－３ａ中，转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）．培养的重组菌经ＩＰＴＧ诱导，在Ｔ７启动子调控下表达出ｈＧＤＮＦ蛋白．经电泳分析表明ＧＤＮＦ主要存在于细菌包涵体中．从培养菌中制备包涵体，经充分洗涤，溶解于含８ｍｏｌ／Ｌ尿素的变性缓冲液中．经ＳＰ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ柱层析分离，梯度洗脱，以１５％ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检查含ＧＤＮＦ的部分．将含单体ＧＤＮＦ部分进行复性，再次用ＳＰ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子柱分离同源二体ＧＤＮＦ．最后经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ制备电泳纯化，纯度大于９５％．经Ｎ端测序表明序列正确．经测定，每升培养菌可得约１０ｍｇ纯化的ＧＤＮＦ．

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粘质赛氏菌胞外蛋白酶的氨基酸组成、N端序列及其部分性质

潘继承,汪劲松,向显智,黄阜峰,袁均林,梅星元

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 386-390.

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终浓度为５ｍｍｏｌ／Ｌ的ＥＤＴＡ可彻底抑制粘质赛氏菌４１００３（２）胞外蛋白酶活力，而Ｃａ２＋可以回复部分酶活力，表明Ｃａ２＋为酶活力所必需；Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｆｅ２＋等金属离子对酶具有不同程度的抑制作用；５－磷酸吡哆醛及对甲氧基苯甲醛对酶具有明显的激活作用；以酪蛋白为底物，采用双倒数法求得酶的Ｋｍ值为６．６７ｍｇｍｌ－１；Ｎ，Ｎ－二甲基酪蛋白也是酶的理想底物；经酸水解，测定出酶的氨基酸组成；利用蛋白质自动分析仪测定了酶的Ｎ端９个氨基酸序列．比较来源不同的粘质赛氏菌胞外蛋白酶的Ｎ端序列，发现它们之间存在一定程度的同源性，并且存在特定的通读结构Ａｌａ…Ａｓｐ…Ｇｌｙ．

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栝楼籽核糖体失活蛋白的纯化、性质及晶体生长研究

吴伸,陈毓荃,吕志强,闫军,董贻诚

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 391-395.

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栝楼（Ｔｒｉｃｈｏｓａｎｔｈｅｓｋｉｒｉｌｏｗｉ）籽经粉碎抽提、硫酸铵沉淀、阳离子交换及凝胶过滤柱层析等步骤，得到一种单链核糖体失活蛋白－Ｔｒｉｃｈｏｋｉｒｉｎ（ＴＣＫ）．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和ＩＥＦ显示为单一条带，其分子量为２９ｋＤ，ｐＩ≥９．３，含糖量约为１．７５％．该蛋白对兔网织红细胞裂解液系统的蛋白质合成具较强的抑制活性，ＩＣ５０为６．７×１０－１０ｍｏｌ／Ｌ．改进了纯化方法，提高了产率，并培养出晶体．

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FMRP蛋白6种异构体与FXR1蛋白间的相互作用

陈雨亭,Ａ．Ｓｉｔｔｌｅｒ,余珉,吴冠芸,Ｊ－Ｌ．Ｍａｎｄｅｌ,沈岩

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 396-401.

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脆性Ｘ综合征是最常见的遗传性智力低下疾病，其致病基因ＦＭＲ１存在复杂的选择剪接．ＦＭＲ１基因的功能及其选择剪接的生物学意义尚未阐明．ＦＭＲ１蛋白（ＦＭＲＰ）与脆性Ｘ相关蛋白１（ＦＸＲ１）可形成异源二聚体．采用酵母双杂交体系研究了由ＦＭＲ１第１２、１４、１５外显子不同选择剪接方式产生的６种ＦＭＲＰ异构体与ＦＸＲ１蛋白的相互作用，以期从蛋白质相互作用的角度探讨ＦＭＲ１基因选择剪接表达的生物学意义．结果表明各种异构体与ＦＸＲ１相互作用的强度随异构体蛋白肽链长度的增长而减弱．外显子１２、１４、１５的选择剪接虽然不能开关式控制ＦＭＲＰ与ＦＸＲ１的相互作用，但其Ｃ端亲水区在一定程度上影响相互作用的强弱．提示选择剪接对ＦＭＲＰ与ＦＸＲ１异源二聚体的稳定性产生影响．

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麻蝇幼虫肠道蛋白酶BGP的分离纯化及性质

卢晓风,程惊秋,裴炎

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 402-406.

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棕尾别麻蝇幼虫肠液经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后，Ｘ光片显影，呈现两条蛋白酶活性带．ＩＥＦ后，两条蛋白酶活性带的等电点分别为ｐＨ７．７和６．８．麻蝇幼虫肠液经５５％～７５％硫酸铵沉淀，以及连续两次制备等电聚焦，分离纯化出等电点约为ｐＨ７．７，分子量约为３５ｋＤ的蛋白酶ＢＧＰ．该酶能分解酪蛋白和类胰蛋白酶专一底物Ｂｚ－Ｐｈｅ－Ｖａｌ－ＡｒｇＮＡ，不能分解弹性蛋白酶专一底物ｅｌａｓｔｉｎ－ＣｏｎｇｏＲｅｄ和类胰凝乳蛋白酶专一底物Ｓｕｃ（Ａｌａ）２Ｐｒｏ－ＰｈｅＮＡ．ＳＢＢＩ，Ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ和ＰＭＳＦ能强烈抑制其活性．专一底物和抑制剂的结果表明，ＢＧＰ是一种类胰蛋白酶．其最适反应温度为５０℃，最适作用ｐＨ为８．５．不耐高温，５０℃保温３０ｍｉｎ活性急剧下降．Ｈｇ２＋，Ｚｎ２＋和Ｃｕ２＋能抑制酶活性．Ｃａ２＋，Ｍｇ２＋对酶无激活作用，ＥＤＴＡ无抑制作用．

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蚯蚓纤溶酶的成分分析

赵晓瑜,静天玉

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 407-411.

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蚯蚓纤溶酶（ｅａｒｔｈｗｏｒｍｆｉｂｒｉｎｏｌｙｔｉｃｅｎｚｙｍｅｓ，ＥＦＥ）是从蚯蚓体内提取的一类纤维蛋白水解酶，是一种新的溶栓药．利用亲和层析技术，自蚯蚓匀浆液一步提取蚯蚓纤溶酶，并对该酶的成分进行了分析．实验表明，蚯蚓纤溶酶是一组非均一的糖蛋白，含糖量为５％左右，以中性已糖为主；等电点（ｐＩ）在４．０以下；富含Ａｓｐ，而Ｍｅｔ、Ｔｒｐ和Ｌｙｓ含量很少；ｌｍｇ蚯蚓纤溶酶相当于２５０～３００尿激酶单位．

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蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)对BAEE的降解

杨嘉树,李令媛,茹炳根

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 412-416.

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以苯甲酰－Ｌ－精氨酸乙酯（ｂｅｎｚｏｙｌ－Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ，ＢＡＥＥ）为底物，研究了蚯蚓体内纤溶酶原激活剂（ｐｌａｓｍｉｎｏｇｅｎａｃｔｉｖａｔｏｒｆｒｏｍＥｉｓｅｎｉａｆｅｔｉｄａ，ｅ－ＰＡ）的酶学性质．酶促反应的最适ｐＨ为８．４，ｅ－ＰＡ降解ＢＡＥＥ的Ｋｍ为１．２４±０．１６×１０－５ｍｏｌ／Ｌ，Ｋｃａｔ为１３．８０±４．０２ｓ－１．测定了构成ｅ－ＰＡ的大，小亚基分别降解ＢＡＥＥ的Ｋｍ和Ｋｃａｔ．结果表明，大亚基的Ｋｍ与全酶的Ｋｍ相差不多，但比小亚基小约１０倍，即对底物的亲和力比小亚基强约一个数量级．大小亚基的Ｋｃａｔ比较接近，分别是全酶的１／６和１／３．研究了８种抑制剂对ｅ－ＰＡ降解ＢＡＥＥ活性的影响，其中ｐｅｐｓｔａｔｉｎ和Ｅ－６４（一种巯基抑制剂）对酶促反应有激活作用，ＴＰＣＫ，ＴＬ－ＣＫ，ＰＭＳＦ，ｃｈｙｍｏｓｔａｔｉｎ和ｌｅｕｐｅｐｔｉｎ对其有不同程度的抑制作用，ＥＤＴＡ对ｅ－ＰＡ的活性没有影响．对ｅ－ＰＡ的ＢＡＥＥ活性和ｅ－ＰＡ的纤溶活性之间作了比较．

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蚯蚓体内一种纤溶酶原激活剂(e-PA)对ATEE的降解

杨嘉树,李令媛,茹炳根

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 417-421.

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赤子爱胜蚓（Ｅｉｓｅｎｉａｆｅｔｉｄａ）体内的一种纤溶酶原激活剂（ｅ－ＰＡ）能够降解人工合成底物Ｎ－乙酰－Ｌ－酪氨酸乙酯（ＡＴＥＥ），该降解反应的最适ｐＨ为８．５，而且在０．２ｍｏｌ／ＬＮａ２ＨＰＯ４中的活性要强于在０．０５ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．５）中．分别测定了ｅ－ＰＡ的大小亚基及全酶在０．２ｍｏｌ／ＬＮａ２ＨＰＯ４与０．０５ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．５）两种体系中的Ｋｍ和Ｋｃａｔ．结果表明，在０．２ｍｏｌ／ＬＮａ２ＨＰＯ４中，全酶的ＡＴＥＥ活性远远高于大小亚基单独的ＡＴＥＥ活性，而在０．０５ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ８．５）中则没有这种现象．从蛋白质结构的角度对这一结果作了解释．用不同抑制剂和ｅ－ＰＡ作用，结果表明，ｐｅｐｓｔａｔｉｎ，Ｅ－６４和ＥＤＴＡ对ｅ－ＰＡ的ＡＴＥＥ活性都有不同程度的抑制，这一点与ｅ－ＰＡ的ＢＡＥＥ活性不同．

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箬叶多糖的分离纯化及其理化性质的研究

陈春英,丁玉强,Ｅ．Ａ．Ｅｌｍａｈａｄｉ,周井炎,李焰,徐辉碧

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 422-426.

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采用分步提取的方式从中药箬叶中分离得到８种多糖组分：酸性杂多糖ＦＳ、ＦＥ、ＦⅠ，β－Ｄ－葡萄糖醛酸聚糖ＦⅡ和四种半纤维素多糖α－Ｄ－木聚糖ＦⅢ－ａ、ＦⅢ－ｂ、ＦⅣ－ａ及ＦⅣ－ｂ．紫外光谱、红外光谱、凝胶色谱、元素分析等结果表明８种箬叶多糖为纯品．并采用纸层析，气相色谱分析确定其单糖组成．采用高效凝胶渗透色谱ＧＰＣ法测定了４种箬叶多糖ＦＥ、ＦⅠ、ＦⅢ－ａ及ＦⅣ－ａ的重均分子量Ｍｗ、数均分子量Ｍｎ，均为大分子，分子量分布较窄，纯度较高．

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箬叶多糖及其化学修饰物、亚硒酸钠和GSH对Cu~(2+)诱导的LDL氧化修饰的保护作用

陈春英,罗湘,周井炎,徐辉碧

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 427-431.

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研究了箬叶多糖ＦⅢ－ａ及其化学修饰物、亚硒酸钠和ＧＳＨ对Ｃｕ２＋诱导的低密度脂蛋白氧化修饰的保护作用．其结果表明箬叶多糖、硫酸酯多糖、硒酸酯多糖可显著抑制脂质过氧化产物（ＴＢＡＲＳ）及荧光物质的生成，彼此之间无明显差异．但对ＶＥ的消耗有着不同的保护作用，其顺序是ＦⅢ－ａ＞Ｓ－ＦⅢ－ａ＞Ｓｅ－ＦⅢ－ａ，并且具有明显的量效关系．硒或ＧＳＨ对Ｃｕ２＋诱导的ＬＤＬ氧化修饰无明显的抑制，但联合使用在０．１２５ｍｍｏｌ／ＬＮａ２ＳｅＯ３和０．２ｍｍｏｌ／ＬＧＳＨ及１２．５μｍｏｌ／ＬＮａ２ＳｅＯ３和０．０２ｍｍｏｌ／ＬＧＳＨ的浓度下能强烈地抑制ＴＢＡＲＳ的生成，甚至比正常的ＬＤＬ还要低．但是对ＶＥ的消耗只有较弱的保护作用，硒酸酯多糖与此相似．Ｎａ２ＳｅＯ３在０．１２５ｍｍｏｌ／Ｌ时可以明显抑制荧光物质的生成．

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应用RT-PCR检测基因的体外转录活性

卢震,沈孝宙,刘冬梅,陈洪,王永潮

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 432-436.

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体外转录分析已广泛应用于分子生物学领域．由于体外转录所产生的ＲＮＡ的量极少，需有灵敏的方法检测生成的ＲＮＡ．本研究发展了一种基于ＲＴ－ＰＣＲ技术鉴定体外转录产物的方法．将待研究基因的启动区与任何一段已知的含转录起始位点的编码序列相连，制备成体外转录的模板．体外转录后，用ＤＮａｓｅⅠ将ＤＮＡ模板完全降解；生成的ＲＮＡ经反转录合成ｃＤＮＡ；再以ｃＤＮＡ为模板，用相应的引物进行ＰＣＲ扩增，产物用琼脂糖凝胶电泳检测．该法灵敏度高，操作简便，无需同位素，且体外转录模板制备方便．还可结合其他技术，如Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析，能获得更高的灵敏度．

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MDR1反义RNA降低细胞KB_(v200)的耐药性

李勇,王玉芝

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 437-441.

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由ＭＤＲ１基因过度表达所引起的肿瘤细胞对化疗药物的耐药性，是导致化疗失败的主要原因之一．针对ＭＤＲ１中一段包含转录启始位点、翻译启始位点和转录正调控区的序列，设计了反义ＲＮＡ并将其克隆到逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ上．用脂质体包裹载体导入ＭＤＲ１高表达的耐药细胞ＫＢｖ２００中，在反义ＲＮＡ转染的细胞中，ＭＤＲ１在ｍＲＮＡ和蛋白水平的表达都有下降，细胞内药物的浓度有所提高，对长春新碱、阿霉素的耐药性分别下降了６５％和４７％．实验结果表明，反义ＲＮＡ对ＭＤＲ１的表达有抑制作用，从而使肿瘤细胞内的药物浓度升高，其耐药程度下降．

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PKC对人mdr1基因转录调控的研究

梁巍,杨纯正,熊冬生,袁泉,郑德先

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 442-446.

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研究了ＰＫＣα、β１和β２亚型对多药耐药基因ｍｄｒ１转录的调控作用．以ｍｄｒ１基因上游调控序列驱动的虫荧光素酶报告基因表达载体和ＰＫＣ基因表达载体共同转染ＣＯＳ７细胞后，测定虫荧光素酶报告基因表达水平．实验结果表明，ＰＫＣα、β１及β２对ｍｄｒ１基因的转录有下调作用，ＰＭＡ可进一步加强这一作用；在此转染体系中，ＰＫＣ抑制剂ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ也可抑制ｍｄｒ１基因的转录，但在只转染ｍｄｒｌｕｃ的细胞中，ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ对ｍｄｒ１的转录则没有影响，提示ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ仅在ＰＫＣ过量表达的细胞中抑制ｍｄｒ１基因的转录．

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维甲酸对鼻咽癌细胞生长、表型和瘤基因表达的作用

江宁,曹利,张询,姚开泰,李桂源

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 447-451.

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研究了维甲酸（ＲＡ）对鼻咽癌细胞生长、表型和癌基因表达的作用．用ＲＡ诱导鼻咽癌细胞，绘制诱导前后的细胞曲线，观察细胞形态，并用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交和ＤＮａｓｅⅠ超敏感区分析法检测基因表达和调控．结果表明，ＲＡ能显著抑制鼻咽癌细胞的生长，前５ｄ下降约５０％．ＲＡ处理后的细胞从典型的多边形形态变成扁平、细长，类似纤维细胞状的形态．ＲＡ诱导前ｃ－ｍｙｃ基因和ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因ＨＮＥ２细胞中高表达，而诱导后ｃ－ｍｙｃ基因表达水平急剧下降，ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因无明显改变．在实验中还发现ＲＡ诱导前后的ｃ－ｍｙｃ基因和ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因中一些重要的超敏感位点和它们的功能．由实验结果可得到如下结论：ＲＡ能促进鼻咽癌细胞分化，通过对染色体上调控位点的作用来抑制ｃ－ｍｙｃ基因的表达，ＤＮａｓｅⅠ超敏感位点与细胞的分化程度、细胞的组织特异性和基因表达状态有关，ｃ－ｍｙｃ基因可通过不同的调控方式而失活．

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大鼠红细胞葡萄糖代谢的异头物选择性

段有金,深津英夫,奥田润,李芳生

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 452-456.

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为研究大鼠红细胞对葡萄糖利用的异头物选择性及其作用机制，应用大鼠红细胞，对葡萄糖的两种异头物作了异构化速率、乳酸生成量、内流速度和大鼠红细胞已糖激酶作用下的磷酸化速度等进行了测定．结果指出，３７℃时大鼠红细胞的Ｄ－葡萄糖β－异头物和α－异头物代谢成乳酸的速度分别是０．２７μｍｏｌ／ｇＨｂ（３ｍｉｎ）和０．２１μｍｏｌ／ｇＨｂ（３ｍｉｎ），即前者快于后者３０％．同时β－Ｄ－葡萄糖向红细胞内转运速度也快于后者：分别是５．０和３．５μｍｏｌ／ｇＨｂ（３ｍｉｎ）．大鼠红细胞已糖激酶的葡萄糖磷酸化速率实验结果指出：β－异头物比α－异头物快３０％；对于该两种异头物已糖激酶的Ｋｍ值均为５３μｍｏｌ／Ｌ．红细胞与α－和β－Ｄ－葡萄糖保温１ｍｉｎ后，其葡萄糖浓度均达到１ｍｍｏｌ／Ｌ左右，说明至少在１ｍｉｎ内对于已糖激酶的磷酸化此两种异头物的葡萄糖浓度均已饱和．这些结果提示，大鼠红细胞葡萄糖利用的β－异头物优选性主要与其磷酸化速度有关，而与其转运速度关系不大．

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erbB-2与胃癌细胞恶性表型及其增殖调控的关系

姜琨,童坦君

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 457-462.

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应用基因重组、基因转染、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交、细胞生长曲线测定及裸鼠成瘤观察了反义ｅｒｂＢ－２逆转录病毒重组载体的转染对人胃癌细胞中ｅｒｂＢ－２过度表达的影响及其对ＥＧＦ的反应性．研究结果显示，ｅｒｂＢ－２的表达被其反义重组子特异抑制，伴有细胞增殖能力的下降及致瘤性的下降；在ＥＧＦ的刺激下，ｅｒｂＢ－２高表达肿瘤细胞生长速度提高的幅度显著大于ｅｒｂＢ－２反义重组载体转染细胞；ＥＧＦ促细胞增殖及促基因表达的功能在ｅｒｂＢ－２反义重组子转染后受到抑制，提示ｅｒｂＢ－２在细胞增殖调控中具有重要功能．

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鲑鱼降钙素及其类似物的合成

潘和平,王良友,陈正英,王芳,王会信

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 463-466.

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鲑鱼降钙素及其类似物的合成潘和平王良友陈正英王芳王会信（军事医学科学院基础医学研究所，北京１００８５０）ＳｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆＳａｌｍｏｎＣａｌｃｉｔｏｎｉｎａｎｄＩｔｓＡｎａｌｏｇｓＰａｎＨｅ－ＰｉｎｇＷａｎｇＬｉａｎｇ－ＹｏｕＣｈｅｎＺｈｅｎｇ－...

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两个不同启动子在COS7细胞中转录效率的比较

陈坚,刘小萍,曹韫旭,陆德如

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(04): 467-470.

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两个不同启动子在ＣＯＳ７细胞中转录效率的比较陈坚刘小萍曹韫旭陆德如（第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所，上海２００４３３）ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｔｈｅＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌＥｆｉｃｉｅｎｃｙｏｆＴｗｏＤｉｆｆｅｒｅｎｔＰｒｏｍｏｔｅｒ...

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