中国生物化学与分子生物学报

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沈勤,顾晓松,张沛云,姚登兵,谭湘陵,曹铮

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 235-240.

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提取与纯化诱向生长因子是神经生物化学研究中的一个重要课题．采用自然系统凝胶电泳，分离周围神经损伤过程中产生的具有诱向生长作用的１８ｋＤ蛋白，再以等电聚焦凝胶电泳与神经组织联合培养，揭示了ｐＩ为５．２的１８ｋＤ蛋白具有诱神经生长的作用．经高效液相色谱仪分析获得较纯的１８ｋＤ诱向因子．蛋白／多肽测序仪检测，１８ｋＤ蛋白Ｎ端氨基酸序列为：ＰＥＰＡＷＳＡＰＡＰ．

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金属硫蛋白 - 潜伏膜蛋白融合基因的体外转录调控

肖志强,关勇军,陈主初,姚开泰

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 241-247.

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ＥＢ病毒（ＥＢＶ）是一种与地区性伯基特氏淋巴瘤、鼻咽癌、何杰金氏病等多种人体肿瘤有关的疱疹病毒．已往的研究表明，潜伏膜蛋白（ＬＭＰ）基因是ＥＢＶ最可能的致瘤基因．为制备ＬＭＰ基因转基因小鼠，探讨ＬＭＰ的体内致瘤作用，首先构建了含鼠金属硫蛋白－１（ＭＴ－１）基因调控区和ＬＭＰ基因编码区的ｐＢＲ３２２－ＭＴ－ＬＭＰ质粒，并用电击法将该质粒与ｐＫＪ１－Ｎｅｏ质粒共转染人胃癌细胞株ＭＧＣ，对ＭＴ－ＬＭＰ基因在转染细胞中的整合、转录情况及重金属镉和镍对该融合基因的转录调控进行了研究．结果表明：（１）两质粒共转染效率为８６．７％；（２）ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析显示，完整的ＭＴ－ＬＭＰ基因已整合入转染的ＭＧＣ细胞基因组，且在不同的转染细胞克隆中，ＭＴ－ＬＭＰ基因整合的方式及拷贝数不同，拷贝数从１到１９不等；（３）ＲＴ－ＰＣＲ和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析证实，ＭＴ－ＬＭＰ基因不仅在转染的ＭＧＣ中能够转录，而且在１０μｍｏｌ／Ｌ镉诱导下，ＭＴ－ＬＭＰ基因转录增强，平均增高约１．４倍．结果说明，在ＭＴ－１基因调控区指导下，ＬＭＰ基因不但有ｍＲＮＡ水平的表达，而且其表达受重金属镉的调控，上述结果为制备ＭＴ－ＬＭＰ转基因小鼠

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人腺苷酸环化酶激活多肽cDNA克隆和序列分析

余焱林,刘飞鹏

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 248-253.

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以人睾丸组织总ＲＮＡ为材料，用ＲＴ－ＰＣＲ方法合成了人腺苷酸环化酶激活多肽（ＡＣＡＰ）编码区（５３０ｂｐ）和全长ｃＤＮＡ（１９３０ｂｐ）片段．并分别将这些ｃＤＮＡ片段克隆入ｐＵＣ１８载体的ＳｍａⅠ限制性内切酶位点．对重组质粒分别采用直接ＤＮＡ双链末端终止法和在核酸外切酶Ⅲ和核酸酶Ｓ１作用下连续缺失ＤＮＡ后，相继克隆，构成一系列连续缺失的缺失体的方法，测定了全部核苷酸顺序．结果表明：ＡＣＡＰ编码区的ｃＤＮＡ顺序与已报道的有１２处碱基的改变，其中１１处碱基顺序的改变不引起编码的氨基酸变化，只有第３８５位的Ｔ→Ａ后，才引起其编码的氨基酸由Ｓｅｒ→Ｔｈｒ，但由于Ｓｅｒ和Ｔｈｒ的理化性质极其相似，这一变化可能并不导致蛋白质的生物活性的变化．这些改变可能是由于种族、群体或个体的差异．

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黑曲霉3.795glaA基因及其5'调控区的克隆和序列分析

乔殿华,钟丽婵,唐国敏,杨开宇

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 254-257.

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黑曲霉Ｔ２１是由黑曲霉３．７９５经诱变育种获得的糖化酶高产菌株，为阐明其高产的分子机制，由黑曲霉３．７９５克隆了糖化酶结构基因及其５′旁侧序列，并与黑曲霉Ｔ２１的相应序列进行了比较．由黑曲霉３．７９５菌丝体分离染色体ＤＮＡ，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析表明，糖化酶结构基因位于～２．５ｋｂ的ＥｃｏＲⅠ－ＥｃｏＲⅤ染色体ＤＮＡ片段上，在此ＥｃｏＲⅠ位点上游约１．０ｋｂ处有一ＳａｌⅠ位点．为构建糖化酶结构基因及其５′旁侧序列的基因组文库，该染色体ＤＮＡ分别用ＥｃｏＲⅠ＋ＥｃｏＲⅤ和ＥｃｏＲ＋ＳａｌⅠ消化，琼脂糖凝胶电泳分离并回收长度在１．０ｋｂ左右和２．５ｋｂ左右的ＤＮＡ片段，分别与ｐＵＣ１９载体连接后转化入Ｅ．ｃｏｌｉＤＨ５．用原位杂交方法筛选到了携带糖化酶基因编码区及其１５０５ｂｐ５′旁侧序列的阳性克隆．对克隆片段的ＤＮＡ序列进行了测定并与黑曲霉Ｔ２１的相应序列进行了比较，结果表明，在糖化酶基因编码区及其１５０ｂｐ３′非编码区内，未发现碱基差异，但在－３４０～－１５０５的５′上游区内发生了９个位置的碱基变化，包括缺失、插入和替换．这些结果表明，黑曲霉Ｔ２１与３．７９５的糖化酶产量的差异与其结构基因无关，但可能与其

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人纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)在Pichia pastoris中的表达

田昱,李平,朱运松

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 258-263.

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用ＰＣＲ方法从ｐＰＡＩＪ．７中扩增人纤溶酶原激活剂抑制物２型（ＰＡＩ－２）基因，与ｐＰＵＣ１８重组，经限制性内切酶片段分析与核苷酸序列分析，获得全长人ＰＡＩ－２基因．ＰＡＩ－２基因与表达载体ｐＰＩＣ９重组，构建受乙醇氧化酶１基因（ＡＯＸ１）启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒，转化ＧＳ１１５宿主菌，经表型筛选和ＰＣＲ扩增筛选阳性克隆，用甲醇诱导表达，重组ＰＡＩ－２以分泌型表达，占分泌总蛋白的３０％，具ＰＡＩ－２抗原性，与低分子量尿激酶形成了抗ＳＤＳ复合物，具抑制纤溶的活性（９１．４ＡＩＵ／ｍｌ）．对培养条件也进行了探讨．

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天花粉蛋白Y14F/R22L定点突变及其活性研究

姚宏兵,吴伸,董贻诚,邵鹏柱

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 264-268.

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利用多聚酶链式反应（ＰＣＲ）技术，对天然天花粉蛋白（ｎＴＣＳ）基因在Ｔｙｒ１４和Ａｒｇ２２两个保守残基处同时进行定点突变，即Ｔｙｒ１４变成Ｐｈｅ，Ａｒｇ２２变成Ｌｅｕ，然后克隆到ｐＥＴ－８ｃ高效表达载体上，构建成重组质粒ｐＥＴＹ１４Ｆ／Ｒ２２Ｌ．经序列分析，定点突变的结果与预先设计的完全一致，突变后的天花粉蛋白命名为Ｙ１４Ｆ／Ｒ２２ＬＴＣＳ．将ｐＥＴＹ１４Ｆ／Ｒ２２Ｌ转化到Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３，ｐＬｙｓＳ）中，进行表达．经ＣＭ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ柱纯化，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定，纯度可达９０％．ＲＩＰ活性测定显示，Ｙ１４Ｆ／Ｒ２２ＬＴＣＳ的活性比ｎＴＣＳ降低了７．５倍，活性变化不显著，因此，ＴＣＳ的Ｔｒｙ１４和Ａｒｇ２２对维持其活性部位构象并不是必需的．但由于Ｙ１４Ｆ／Ｒ２２ＬＴＣＳ在Ｅ．ｃｏｌｉ中的表达量与ｎＴＣＳ相比明显下降，因此，Ｔｙｒ１４和Ａｒｇ２２可能与ＴＣＳ翻译后的折叠有关．

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Bruton酪氨酸激酶在昆虫细胞中表达的初步研究

韩苇,药立波,Ｔ．Ｋａｗａｋａｍｉ

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 269-273.

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用杆状病毒表达载体系统表达小鼠Ｂｒｕｔｏｎ酪氨酸激酶（Ｂｒｕｔｏｎｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅ，Ｂｔｋ）．构建重组转染载体时，于Ｂｔｋ起始码的上游插入了一段Ｈ９０２序列．用重组转染载体、苜蓿夜蛾核型多角体病毒线性ＤＮＡ和质脂体共转染Ｓｆ９昆虫细胞，经过对重组杆状病毒三轮扩增后，用Ｈ９０２抗体检测表明，昆虫细胞中Ｂｔｋ的表达已达最高水平．对表达后Ｂｔｋ自身磷酸化检测表明，该激酶具有自身磷酸化活性．从而证实Ｂｔｋ在昆虫细胞中的表达获得了成功

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人TNF-α双顺反子逆转录病毒载体的构建及其在成纤维细胞中的表达

赖冠华,唐展云,陈诗书

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 274-279.

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利用脑炎心肌炎病毒的内核糖体进入位点连接人ＴＮＦ－αｃＤＮＡ和选择基因ＮｅｏＲ基因，使ＴＮＦ－α及ＮｅｏＲ基因均受控于病毒ＬＴＲ启动子，将两基因同时转录至同一ｍＲＮＡ，从而构建成人ＴＮＦ－α双顺反子逆转录病毒载体ｐＧＣＥＮ／ＴＮＦ－α．在ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ介导下将其导入包装细胞ＰＡ３１７，Ｇ４１８筛选得单克隆，病毒滴度为１０６ＣＦＵ／ｍｌ重组病毒分泌的细胞株．经ＰＣＲ证明外源基因已整合至细胞基因组，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹显示出单一ＬＲＴ转录本．持续Ｇ４１８筛选能明显促进目的基因ＴＮＦ－α的表达．用重组病毒上清感染小鼠成纤维细胞ＮＩＨ３Ｔ３，Ｇ４１８筛选获得的混合抗性克隆持续高表达ＴＮＦ－α，４０Ｇｙγ线照射后能维持高效表达至７ｄ．实验结果表明，含ＩＲＥＳ的双顺反子逆转录病毒载体将是一个很好的基因转移载体．

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肿瘤坏死因子与其受体相互作用的计算机模拟研究

王国力,周晓巍,黄培堂,黄翠芬

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 280-288.

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利用同源模建方法，以ＴＮＦＲ５５受体胞外区的晶体结构为参考模板，预测了ＴＮＦＲ７５受体胞外区Ｃｙｓ１８～Ｐｈｅ１４７片段的三维结构．根据Ｒ５５受体胞外区与ＬＴ相结合的复合物的晶体结构，预测了ＴＮＦ与Ｒ５５及Ｒ７５胞外区的复合物的三维结构，模拟了ＴＮＦ与受体之间的相互作用．由于ＴＮＦ与受体的作用形式是三聚体对三聚体，因此在模拟ＴＮＦ与受体相互作用时选择了包括一个非对称的ＴＮＦ三聚体和一个受体（Ｒ５５或Ｒ７５）单体的模拟系统．结合已有的突变体实验结果，利用计算机模拟分析手段，发现了一些ＴＮＦ突变体之所以具有受体选择性的三维结构基础和发挥了关键作用的氨基酸残基以及这些残基之间的主要作用形式．研究深化了对已有的突变体实验结果的认识，建立了不同的实验结果之间的内在关联，为以后有目的的新型突变体设计和实验研究打下了基础．

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脂多糖增加小鼠巨噬细胞多磷酸肌醇脂代谢转换

刘彦,王寅,朱正美,崔肇春

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 289-294.

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多磷酸肌醇脂（这里指ＰＩＰ和ＰＩＰ２）的代谢在细胞信息传递和膜运转中起着重要的作用．脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）于激活小鼠腹腔巨噬细胞（Ｍφ）初期（０．５～１ｈ）和后期（１６ｈ）明显增加来自［γ－３２Ｐ］ＡＴＰ的３２Ｐ参入Ｍφ的ＰＩＰ和ＰＩＰ２，３２Ｐ参入ＰＩＰ２的显著性大于ＰＩＰ．ＬＰＳ的这种作用在其激活Ｍφ的初期不受酪氨酸蛋白激酶抑制剂ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ、蛋白激酶Ａ激动剂（ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ）及百日咳毒素的影响；但佛波酯（ＰＭＡ）长时间预处理的Ｍφ（其ＰＫＣ活性被耗竭）再受ＬＰＳ刺激，［３２Ｐ］ＰＩＰ２水平较ＬＰＳ刺激未受ＰＭＡ预处理的Ｍφ明显降低．结果表明，ＬＰＳ于激活Ｍφ的初期和后期更显著增加ＰＩ４Ｐ－５激酶的活性，导致ＰＩＰ２合成增加，ＰＩＰ２合成的增加可能与Ｍφ激活时不同时期所表达的功能相关．

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氧化诱导K_(562)细胞凋亡机制的初步探讨

高颖,许彩民,杨洋,潘华珍

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 295-299.

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以过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）诱导人慢性髓细胞白血病（Ｋ５６２）细胞为凋亡模型，采用流式细胞仪（ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，ＦＣＭ）和激光共聚焦扫描显微镜（ｌａｓｅｒｃｏｎｆｏｃａｌｓｃａｎｎｉｎｇｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ，ＬＣＳＭ）研究细胞凋亡，形态观察出现核固缩，核碎裂及凋亡小体等典型凋亡特征．ＤＮＡ电泳图谱出现“Ｌａｄｄｅｒ”．ＦＣＭ检测在Ｇ０／Ｇ１峰前出现一低ＤＮＡ含量的凋亡峰．ＬＣＳＭ显示凋亡细胞ｃ－Ｆｏｓ．ｃ－Ｊｕｎ和ＮＦκＢ表达量均有不同程度的增加．该结果提示上述三种转录因子可能参与氧化诱导凋亡过程中基因的调控作用．

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小檗胺对大鼠糖尿病性白内障模型中DNA损伤修复及致障过程的影响

何浩,何海鹰,张家萍,张昌颖

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 300-303.

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利用链脲佐菌素（ＳＴＺ）引起的大鼠糖尿病性实验性白内障模型，观察小檗胺对晶状体上皮细胞ＤＮＡ损伤、修复及致障过程的影响．发现ＳＴＺ对照组在腹腔注射ＳＴＺ后３～４ｄ开始出现有显著意义的ＤＮＡ单链断裂（ｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｎｄｂｒｅａｋｓ，ＳＳＢ），并持续存在于发病全程直至晶状体完全混浊．而在注射ＳＴＺ后１２ｈ再腹腔注射３．４８ｍｇ／ｋｇ体重，１．７４ｍｇ／ｋｇ体重小檗胺后，一周后才出现有显著意义的ＳＳＢ．３．４８ｍｇ／ｋｇ体重组在５周后白内障形成率明显低于ＳＴＺ组的同时，ＳＳＢ也恢复到对照水平，而１．７４ｍｇ／ｋｇ体重组第７周才恢复到对照水平．提示抗氧化药物小檗胺能在一定程度上阻止白内障发生过程中的ＤＮＡ损伤．

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小檗胺对糖尿病性白内障的预防及SOD、CAT和GSH-Px酶活性变化研究

何浩,张家萍,张昌颖

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 304-308.

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用抗氧化剂及自由基清除剂小檗胺（中药提纯单体化合物）对ＳＴＺ诱发的大鼠糖尿病性白内障进行腹腔注射的预防实验结果显示：１）在白内障出现早期小檗胺给药组晶状体空泡出现时间比未给药的糖尿病组推迟２周．２）小檗胺有对抗诱发动物模型晚期晶状体混浊出现的功能，以３．４８ｍｇ／ｋｇ体重剂量的效果最好．３）ＳＯＤ，ＣＡＴ，ＧＳＨ－Ｐｘ酶活性的动态变化，未给药的糖尿病组第２周即开始出现，两个剂量小檗胺给药组均比糖尿病组延迟２周出现．这与裂隙灯观察结果相吻合，但形态学变化晚于酶活性变化．这证明早期使用抗氧化剂及自由基清除剂小檗胺对动物实验性糖尿病性白内障的发生、发展有明显的预防作用．

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细胞凋亡过程中bcl-2基因的甲基化

王文恭,童坦君

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 309-313.

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为探讨凋亡过程中，ｂｃｌ－２基因下调与该基因甲基化状态的关系，用５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）诱导小鼠成纤维细胞ＮＣ３Ｈ１０，ＴＣ３Ｈ１０及人乳腺癌细胞ＭＣＦ－７的凋亡，分别检测了这三种细胞凋亡过程中ｂｃｌ－２的表达变化，与其调控区及编码区的甲基化状况．我们曾观察到５－Ｆｕ作用２４～４８ｈ出现细胞存活率下降，ＤＮＡ梯状断裂及细胞周期凋亡峰显现等典型凋亡现象．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交显示，在５－Ｆｕ作用１２ｈ时ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ水平已明显降低．由此，我们用小鼠ｂｃｌ－２（ｍｂｃｌ－２）及人ｂｃｌ－２（ｈｂｃｌ－２）基因调控区ＰＣＲ扩增片段及ｂｃｌ－２编码区（ｃＤＮＡ）片段作为探针，与５－Ｆｕ作用１２ｈ的细胞ＤＮＡ的ＭｓｐⅠ／ＨｐａⅡ酶切产物进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，以未作用的细胞ＤＮＡ同样酶切杂交为对照．通过杂交带谱的变化，分析ｂｃｌ－２基因的甲基化状况．结果显示：ｍｂｃｌ－２及ｈｂｃｌ－２在５－Ｆｕ作用１２ｈ后调控区甲基化水平增高，但其编码区甲基化状态皆未出现可检出的变化．上述结果提示：ｂｃｌ－２基因调控区甲基化水平升高可能与该基因下调有关

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细胞凋亡过程中c-erbB-2基因的表达

王文恭,童坦君

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 314-317.

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据文献报道ｃ－ｅｒｂＢ－２可以介导细胞凋亡，为检验这一结论是否具有普遍性，用５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）诱导小鼠成纤维细胞ＮＣ３Ｈ１０，ＴＣ３Ｈ１０及人乳腺癌细胞ＭＣＦ－７的凋亡．用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹法检测ｃ－ｅｒｂＢ－２的表达状况．结果显示：ｃ－ｅｒｂＢ－２基因表达在５－Ｆｕ作用６ｈ开始降低，１２ｈ降低更为明显．作用２４～４８ｈ出现细胞存活率下降，ＤＮＡ梯状断裂及细胞周期凋亡峰等凋亡典型现象．实验结果并不支持ｃ－ｅｒｂＢ－２可介导细胞凋亡的观点．该基因在细胞凋亡过程中有何作用尚待探讨．

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小鼠成纤维细胞凋亡过程中P53与bcl-2表达的时序性

王文恭,童坦君

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 318-321.

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为探讨细胞凋亡过程中，ｂｃｌ－２与Ｐ５３，这两种凋亡关键性基因的相互关系，用５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）诱导小鼠正常与恶性转化的成纤维细胞的凋亡，观察了这两种基因在凋亡过程中表达变化的时序．经流式细胞计检测，这两种细胞在５－Ｆｕ作用２４ｈ均出现了凋亡峰，细胞存活率随之下降，ＤＮＡ电泳显现梯状断裂．Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交结果显示，在５－Ｆｕ作用６ｈ后两种细胞Ｐ５３ｍＲＮＡ水平已明显增高，而ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ水平则在作用１２ｈ方明显降低．Ｐ５３上调与ｂｃｌ－２下调的明显时序性，说明Ｐ５３具备作为ｂｃｌ－２基因负调控转录因子的条件．由此，为进一步了解凋亡过程的ｂｃｌ－２基因下调机理提供了线索

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反义RNA调节肿瘤细胞O~6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶活性

季守平,由英,吴英,章扬培

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 322-327.

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报道了逆转录病毒载体介导的反义ＲＮＡ对肿瘤细胞Ｏ６－甲基鸟嘌呤－ＤＮＡ甲基转移酶（ＭＧＭＴ）活性的调节作用．构建了三个表达ＭＧＭＴ反义ＲＮＡ的逆转录病毒载体并用它们转染ＨｅＬａＳ３肿瘤细胞，观察细胞在转染前后ＭＧＭＴｍＲＮＡ水平、ＭＧＭＴ活性及其对ＡＣＮＵ抗药性的变化．发现针对ＭＧＭＴｍＲＮＡ５’端的反义ＲＮＡ能够有效地降低ＭＧＭＴｍＲＮＡ水平和ＭＧＭＴ活性并使细胞对ＡＣＮＵ的敏感性提高４．６倍；针对ＭＧＭＴｍＲＮＡ全长的反义ＲＮＡ也能在一定程度上调节细胞的ＭＧＭＴｍＲＮＡ水平和ＭＧＭＴ活性并增加细胞对ＡＣＮＵ的敏感性，而针对３’端序列的反义ＲＮＡ对ＭＧＭＴ活性没有调节作用．

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巨噬细胞产生NO.和O_2~-自由基的分子机理

赵保路,李海涛,侯京武,忻文娟

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 328-333.

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建立了用顺磁共振（ＥＳＲ）和化学发光技术测定巨噬细胞产生ＮＯ和氧自由基的方法．捕捉到了巨噬细胞受佛波酯刺激产生的ＮＯ．和Ｏ－２自由基．测定了在不同浓度Ｌ－精氨酸存在时佛波酯刺激后巨噬细胞产生的ＮＯ自由基．研究了巨噬细胞产生的ＮＯ和氧自由基的分子机理．结果表明巨噬细胞不仅产生氧自由基而且产生ＮＯ自由基．ＮＡＤＰＨ氧化酶产生氧自由基的部位位于巨噬细胞膜的外侧．ＮＯ合成酶活化产生ＮＯ自由基比ＮＡＤＰＨ氧化酶活化产生氧自由基晚几分钟．

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人突变appE基因在转基因鼠体内的表达及血清脂质变化

孙明增,琦祖和

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 334-338.

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为了研究人突变ａｐｏＥ７基因在血脂代谢中的作用．采用微注射的方法建立了人ａｐｏＥ７转基因鼠，三个首建鼠（ｔｇ１，ｔｇ２，ｔｇ３）整合目的基因的拷贝数相差２倍左右，其血中表达的人ａｐｏＥ７的水平也不相同，低水平表达的ｔｇ１为１．２６ｍｇ／ｄｌ，高水平表达的首建鼠ｔｇ３血清中ａｐｏＥ７浓度可高达２１．１ｍｇ／ｄｌ．异常ａｐｏＥ基因的表达导致了转基因鼠血清甘油三酯和胆固醇明显升高，为对照的１．５～３倍．高密度脂蛋白ＨＤＬ降低，低密度脂蛋白ＬＤＬ和极低密度脂蛋白ＶＬＤＬ升高．经２０ｍｍｏｌ／ＬＺｎＳＯ４诱导后，Ｆ１代Ｔｇ３鼠系血清甘油三酯（ＴＧ）水平高达４４４ｍｇ／ｄｌ，胆固醇（ＴＣ）高达２３４ｍｇ／ｄ１．ＨＤＬ升高和ＬＤＬ／ＶＬＤＬ降低十分明显，表现了高脂血症的指征．

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亲和层析法分离纯化玉米精细胞质膜特异糖蛋白

陈丽,邵邻相,汪洁,杨中汉

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 339-341.

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亲和层析法分离纯化玉米精细胞质膜特异糖蛋白陈丽邵邻相汪洁杨中汉（北京大学生命科学学院，北京１００８７１）ＩｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＳｐｅｒｍＣｅｌＰｌａｓｍａＭｅｍｂｒａｎｅＧｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓｏｆＺｅａｍａｙｓｂｙＡ...

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6-磺基脱氧葡萄糖甘油二酯对脂质体的稳定作用

韩兴,李刚

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 342-345.

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６┐磺基脱氧葡萄糖甘油二酯对脂质体的稳定作用＊韩兴李刚（北京医科大学生物物理系，北京１０００８３ＴｈｅＳｔａｂｉｌｉｚｉｎｇＥｆｆｅｃｔｏｆＳｕｌｐｈｏｑｕｉｎｏｖｏｓｙｌｄｉａｃｙｌ┐ｇｌｙｃｅｒｏｌｏｎＬｉｐｏｓｏｍｅｓＨａｎＸｉｎｇＬｉＧａｎｇ...

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质膜H~+-ATPase磷酸化对其活性的调节

凌启阆,向左云,刘华,尚克进

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 346-349.

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质膜Ｈ＋┐ＡＴＰａｓｅ磷酸化对其活性的调节＊凌启阆向左云刘华尚克进（南开大学生物化学及分子生物学系，天津３０００７１）ＲｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＰＭＨ＋┐ＡＴＰａｓｅＡｃｔｉｖｉｔｙｂｙＩｔｓＰｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎＬｉｎｇＱｉ－ＬａｎｇＸｉａｎ...

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人胎盘c-fms胞外功能区基因片段的扩增

王昕,蔡辉国,陈佩珍,吴克复,郑德先

中国生物化学与分子生物学报. 1998, 14(03): 350-352.

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人胎盘ｃ┐ｆｍｓ胞外功能区基因片段的扩增＊王昕蔡辉国陈佩珍吴克复郑德先（中国医学科学院，中国协和医科大学血液学研究所，天津３０００２０）Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｃ┐ｆｍｓＥｘｔｒａｃｅｌｕｌａｒＤｏｍａｉｎｆｒｏｍＨｕｍａｎＰｌａｃｅｎｔａＷａ...

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