中国生物化学与分子生物学报

Select

徐秀璋,F.J.Morgan

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 129-134.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

利用DEAE-52离子交换层析和FPLC的Mono Q离子交换柱,从鼠的腹水液中提纯抗苯丙氨酸羟化酶单克隆抗体,再利用FPLC的Superose 12凝胶柱分离它们的轻链和重链。经SDS-凝胶电泳,氨基酸组成分析和N端顺序测定,确定轻链的分子量约为24 kD,约含有215个残基,轻链的N端的顺序是:D-V-V-M-T-Q-T-P-L-S-L-P-V-S-L-G-D-Q-A-S-I-S-C-R-S-D?-Q-N(D)-,并确认该轻链为鼠KaPPa轻链Ⅱ型。重链的分子量约为52 kD,它的末端被焦谷氨酰封闭。

Select

人胎盘谷胱甘肽S-转移酶的纯化和性质

李春海,张凯,谭子兴,陈毓兰

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 135-141.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

将人胎盘组织粗匀浆经105000×g超速离心后,用S-已基谷胱甘肽-琼脂糖-6B亲和层析一步纯化法获得电泳纯的人胎盘GST(简称GST-π)。其比活性较粗匀浆高194.7倍,回收率为50％。再经DE_(52)交换柱进一步纯化,用KCl浓度梯度洗脱后为单一锐峰,等电聚集电泳呈一条带,等电点(pI)为4.60。GST-π经TSKgel-G3000SW柱高效液相层析,也为单一对称锐峰,测得其分子量为45.2kD;在SDS-PAGE电泳也为单一区带,测得其亚基单位的分子量为22.5kD。GST-π氨基酸组成分析可检出十六种氨基酸,其中以谷氨酸、亮氨酸、丙氨酸、天冬氨酸及甘氨酸含量较高。 GST-π酶动力学研究证明GST-π以GST和CDNB为底物时km值分别为0.16mmol/L和0.55mmol/L,经测定表明,GST-π的最适作用pH值为7.5,在pH6.5—9的范围内较为稳定,体外GST-π在温度超过25℃对容易失活。以GST-π为抗原,得到兔抗人GST-π抗血清,其效价为1:32,与人肝GSTs不发生免疫交叉反应。

Select

分枝犁头霉α-半乳糖苷酶的氨基酸组成及化学修饰

朱静,严自正,张树政

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 142-146.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

α-半乳糖苷酶进行氨基酸组分分析,结果为含有较多的酸性及巯水性氨基酸,较少的组氨酸、酪氨酸及半胱氨酸。用几种蛋白质侧链修饰试剂对α-半乳糖苷酶进行化学修饰。在一定条件下,当巯基及酪氨酸残基分别被NEM、IAA及NAI修饰后,酶活力不受影响,说明这些基团与活力无关。当羟基、组氨酸及色氨酸残基分别被EDC、DEP、NBS及HNBB修饰后,酶活力大幅度下降,说明这些基团或者参与了酯催化作用或者位于酯活性位区附近。

Select

多肽的α螺旋结构对多肽与钙调蛋白亲合力的影响

阎虎生,何炳林

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 147-152.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

本文设计并采用固相法合成了4种钙调蛋白可结合多肽,这些多肽分成两组,每一组中两个多肽的碱性和疏水性相近,但形成α螺旋结构的倾向(预测)不同。研究了这些多肽与钙调蛋白的相互作用,在Ca~(2+)存在下,这些多肽与丹磺酰钙调蛋白结合,使丹磺酰钙调蛋白的荧光光谱发生显著变化,测定了多肽与钙调蛋白所形成的复合物的解离常数。结果表明,预测形成α螺旋结构倾向较大的多肽与钙调蛋白的亲合力也较大。

Select

正常及损伤后修复的内皮细胞合成的蛋白聚糖

杨小平,张英珊

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 153-158.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

用自制尼龙刷将培养至汇合的人脐静脉内皮细胞刮伤后,造成规则的内皮细胞缺失区。继续培养可见,原有的内皮钿胞很快迁移到缺失区,并分裂增殖。约48小时新生的内皮细胞即将缺失区全部修复而形成新的汇合单层。以DEAE-Sephacel离子交换及Sepharose 6B凝胶过滤柱层析分析损伤后修复的内皮细胞合成的蛋白聚糖时发现所合成的蛋白聚糖总量减少;硫酸乙酰肝素蛋白聚糖合成相对减少、而硫酸软骨素及/或硫酸皮肤素蛋白聚糖合成相对增多。说明:伴随着内皮细胞的损伤后修复其蛋白聚糖的合成也有质和量的改变。

Select

人胎肝超氧化物歧化酶的研究

袁海平,王少华

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 159-163.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

采用离子交换和凝胶过滤层析法,从正常人胎肝提取、纯化铜锌超氧化物歧化酶(Cu.Zn-SOD),并对其性质作了研究,结果测得人胎肝组织Cu·Zn-SOD平均含量为6.44unit/g湿重,并发现随着胎龄的增加人胎肝Cu.Zn-SOD含量上升;纯化后的Cu·Zn-SOD在聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上呈现单一区带;其活性受氰化钾抑制;以原子吸收光谱测得其铜、锌含量分别为0.39％和0.1％,采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得其亚基分子量为16kD;氨基酸自动分析仪测得其亚基的氨基酸残基数为151.5;在紫外吸收光谱上于265nm和258nm处分别出现两个吸收高峰。本研究结果表明,人胎肝Cu.Zn-SOD与成人肝及其他组织的Cu.Zn-SOD理化性质上基本一致。

Select

木菠萝凝集素结合部位糖的特异性

陈华堂,Liao J,Kabat E.A

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 164-170.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

用定量免疫沉淀法和定量免疫沉淀抑制法研究了从木菠萝(Arthrocarpus integrifolia)种子提取的凝集素(jacalin)结合部位糖的特异性。Jacalin最强烈地沉淀含有DGalβ1→3DGalNAc结构的无活性抗冻糖蛋白,不同程度非特异地沉淀各种血型物质。研究发现凝集素结合部位对DGalβ→3DGalNAc有最高特异性。最强抑制剂是DGalβ1→3DGalNAcal→φNO_2,其抑制活性分别比DGalNAc和DGal高380倍和1000倍。对于各种甲基化或对硝基酚化的糖苷以及寡糖,除methylaDGalNAc_f外,仅α-构型表现出抑制活性,所有β-构型的糖苷均无抑制活性,jacalin结合部位对糖的结合是构型依赖性的。

Select

解淀粉芽胞杆菌启动基因的克隆及其对地衣杆菌α-淀粉酶基因的调控

罗进贤,曹霞

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 171-176.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

用大肠杆菌启动基因探针质粒pHE5克隆了解淀粉芽胞杆菌的启动基因。供体菌DNA的HindⅢ片段与pHE5重组后转化大肠杆菌,获得一批带启动基因的抗四环素转化子,其中四株的抗性达到200μg/mL,从这四株高抗性转化子中提取质粒,并对其中的一个重组质粒pAE23的插入片段进行限制性图谱分析和缺失研究,获得了一个缺失了部份片段,四环素抗性仍达到200μg/mL的衍生质粒pAED23,经酶切分析证明其上的启动基因位于0.8kb的EcoR Ⅰ—HindⅢ片段上。点杂交分析证实该片段来自解淀粉芽胞杆菌的DNA。将地衣杆菌的α-淀粉酶基因亚克隆至pAED23启动基因下游的HindⅢ位点上能增强该基因在大肠杆菌中的表达。

Select

3β,20α-羟基甾体脱氢酶的动力学性质

陈清轩,Colin D.Nancarrow,Frederick Sweet

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 177-182.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

3β,20α-羟基甾体脱氢酶(3β,20α-Hydroxysteroid dehydrogenase,3β,20α-HSD)是从胎羊血中分离得到的。分子量为35kD。该酶以NADPH为辅酶,有两种底物。以孕酮为底物时,Km=30.8μmol/L,Vmax=0.7nmol min~(-1)(nmol enzyme)~(-1);以5α-二氢睾酮(5α-Dihydrotestosterone,5α-DHT)为底物时,Km=74μmol/L,Vmax=1.3nmol min~(-1)(nmol enzyme)~(-1)。5α-DHT竞争性抑制20α-还原活性,Ki=102μmol/L。16α-溴代乙酰氧基(16α-Bromo acetoxyprogesterone,16α-BAP)是3β,20α-HSD不可逆竞争性抑制剂,t_(1/2)=75min。对3β和20α还原活性的抑制常数Ki分别为23μmol/L和58μmol/L。

Select

转化相关蛋白p86的鉴定

赵晓航,董志伟,邓国仁,鄂征,戴寿芝

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 183-188.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

以转化细胞Rat3-3免疫大鼠,获得单克隆抗体E5(MeAb E5)。其对应抗原耐热,是分子量为86kD的蛋白质(P86)。它在c-Ha-ras癌基因转化的细胞上均有较高的阳性表达,而在其相应的非转化细胞上含量甚微。以人工合成的反义c-Ha-ras寡聚核苷酸As-Ⅱ处理Rat3-3细胞,该细胞生长受抑(44.2％),,此对p86的表达亦降低(39.1％)。P86在五种人胃癌细胞系中均有较高表达,在原发胃癌及其转移灶中阳性率达82.6％。p86不仅是一种与C-Ha-ras转化相关的蛋白,而且为胃癌相关抗原。

Select

1,25-(OH)_2D_3诱导HL-60细胞分化后胞液Ca~(2+)浓度、磷酸化酶a和微粒体Ca~(2+)-ATP酶活性的改变

赵宝昌,骆宗军,欧阳启楣,李刚毅,姚晓丹,顾淑珍,杜国忠,林钧材

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 189-194.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

1,25-(OH)_2D_3对HL-60细胞具有促分化作用。本文报道了1,25-(OH)_2D_3在促进HL-60细胞分化前后胞液Ca~(2+)浓度、磷酸化酶a和微粒体Ca~(2+)-ATP酶活性的改变。结果表明,1,25-(OH)_2D_3加入HL-60细胞培养液后72小时,细胞NBT染色阳性率高于70％,形态向正常分化的细胞转化。同对,胞液Ca~(2+)浓度和微粒体Ca~(2+)-ATP酶活性明显降低,而磷酸化酶a活性显著升高。结果提示,在1,25-(OH)2_D_3作用下,HL-60细胞不仅杀菌功能增强,细胞内胞液Ca~(2+)浓度趋向正常,与钙恒稳有关的酶活性也同样发生改变。即1,25-(OH)_2D_3对HL-60细胞的诱导作用伴有钙恒稳的改变。这些变化与DMSO的作用相同。

Select

多巴胺类似物抑制二氢蝶啶还原酶的研究

陈震华,沈荣森,陈刚

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 195-200.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

多巴胺类似物对二氢蝶啶还原酶有明显的非竞争性抑制作用(Ki或I_(50)值为10~(-5)—10~(-6)mol/L)。其中阿朴吗啡是最强的抑制剂之一(Ki或I~(50)=1-2×10~(-6)mol/L)。由于酪氨酸羟化酶和二氢蝶啶还原酶包含于同一酶促反应过程中,且限制了多巴胺合成的决定速度的那一步。这些结果可能提示出被多巴胺抑制的酪氨酸羟化作用包含着对这二种酶的抑制作用。

Select

超氧化物歧化酶和乳酸脱氢酶在凝胶板上同时显色的方法

周虞灿,何新霞,邵邻相

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 201-205.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

本文报道一种能使乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)同工酶在同一块电泳凝胶板上经同一种染色液一次处理达到同时显色的方法。显色结果,LDH为有色区带,SOD为无色透明区带,两者一目了然。而且前者泳动慢,后者泳动快,两种区带互不重迭,不发生干扰,结果可靠。此法不需光照,显色效率高,有利于同一样品同时进行此两种同工酶的电泳分析,达到一举两得的效果。

Select

精脒与疟原虫抗氯喹关系的研究

常惠玲,王琴美,王聚君,蓝勤娴

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 206-210.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

抑制伯氏疟原虫感染RBC中50％精脒量,抗氯喹株需要喂服400mg/kg氯喹,而敏感的为20mg/kg,相差至少20倍。两株感染鼠同样喂服氟喹20mg/kg和400mg/kg一次,3小时后,在全血和感染RBC中的氯喹量,低剂量组接近,400mg/kg组抗氯喹的更高,而积聚在疟原虫中的氯喹量则抗氯喹的低于敏感。抗氯喹感染RBC中的精脒,78‰集中在疟原虫,故认为精脒量的提高,可能与氯喹进入疟原虫产生竞争性抑制。MGBG抑制抗氯喹鼠中的疟原虫生长,精脒能逆转其作用。

Select

羊红细胞超氧化物歧化酶的研究

张大志,张玉林,王丽容

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 211-215.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

自羊红细胞分离得到一种高等电点的铜.锌-超氧化物歧化酶(Cu.ZnSOD)。其沉降系数(S)为3.23,亚基分子量为16600,等电点为8.50,紫外最大吸收峰位于259nm,酶分子中含有铜和锌,氨基酸组成特点与其它动物来源的Cu.Zn-SOD相同。该酶的比活性为5500U/mg(黄嘌吟氧化酶—细胞色素还原法);对KCN的抑制作用敏感,最适pH值为6。

Select

SV40 T抗原与人U_1和U_2 snRNA基因的特异结合

韩玉珉

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 216-220.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

利用DNA结合免疫分析证明,编码人U_1和U_2 snRNA基因的5′端区域含有与SV40 T抗原特异结合的序列。SV40 T抗原与U_2基因的亲和力大于U_1基因。DNasel足印(footprinting)分析取得与DNA结合免疫分析一致的结果。U_1和U_2基因的5′端区域含有能被T抗原所保护的,免于DNasel降解的序列。这两个基因的两条链上都含有约30bp长的DNA被T抗原所保护。U_1基因被保护的区域在-11bp—-42bp之间,而U_2基因被保护区域是在-58bp—-90bp之间。

Select

赤小豆抑制剂对胰蛋白酶不可逆抑制作用的动力学探讨

杨同成

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 221-224.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

本文从中药赤小豆(Phaseolus Calcaratus,Roxb)中分离出一种胰蛋白酶抑制剂。通过一系列酶促反应动力学的研究表明,赤小豆抑制剂对胰蛋白酶有较强的不可逆竞争性抑制作用。其Km和ki值分别为1.43×10~(-3)mmol/L和2.4×10~(-6)mmol/L。

Select

人肿瘤坏死因子与人γ干扰素重组双功能融合蛋白的研制

张德震,吴淑华,智刚,张智清,金奇,金冬雁,赵小侠,侯云德,苏成芝

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 225-229.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

肿瘤坏死因子与γ干扰素具有非常相似的生物学活性,并在一些主要的生物活性方面表现有较强的协同作用。本文采用寡核苷酸指导下的定位缺失-插入体外基因突变技术,删除了干扰素与肿瘤坏死因子串联基因之间的非编码区,去徐了γ干扰素的翻译终止信号,插入了一个人工设计的连接肽,使γ干扰素与肿瘤坏死因子基因在不改变读码框架的条件下融合起来,并在大肠杆菌表达系统中表述了兼有γ干扰素和肿瘤坏死因子功能的融合蛋白。

Select

我国大豆种子中球蛋白2S组分的分离纯化及部分性质的研究

张崇本,吴显荣

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 230-236.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

根据大豆种子球蛋白和清蛋白溶解性不同的原理,分离出我国红丰3号大豆种子球蛋白2S粗制剂,再用SephadexG-100柱层析对其进行纯化。纯化后的球蛋白表现SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳非均一性。对这样纯化过的2s球蛋白进行DEAE-纤维素离子交换柱层析分离,用0.1—0.5mol/L pH7.6磷酸盐缓冲液进行线性梯度洗脱,得到四个洗脱峰,每个峰都获得了PAGE单一条带。四个组分分别命名为SⅡP_1,SⅡP_2,SⅡP_3和SⅡP_4。然后对这四种蛋白质的某些性质进行了研究,结果表明四者的分子量按以上顺序分别为22800,21500,19200和17800。所含残基数分别为191,179,163和147个。SⅡP_1,SⅡP_2和SⅡP_3三者的沉降系数(S_(20),w)分别为2.1S,1.9S和1.8S。N-末端分析表明这四种蛋白质的N-末端均为天门冬氨酸.还发现SⅡP_2具有能抑制α-胰凝乳蛋白酶的活性。本实验所提纯的这个抑制剂的一个ATEE(N-乙酰-L-酪氨酸乙酯)单位为0.4μg抑制剂蛋白(仅指对α-chymotrypsin发生作用)。α-chymotrypsin与此抑制剂相互作用时的摩尔数比初步判断为E/I=2/1。

Select

比较不同类型白内障形成过程中非蛋白质巯基与蛋白质巯基的动态变化及关系

商福,张家萍,张昌颖

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 237-241.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

本文报道了在亚硒酸钠、平阳霉素及半乳糖诱发大鼠产生白内障过程中晶状体中非蛋白质巯基及蛋白质巯基的动态变化,并探讨了其变化机理及相互关系。在亚硒酸钠诱发白内障过程中,给药24h后晶状体中非蛋白质巯基减少到正常的二分之一,以后又逐渐回升,但始终未达到正常水平,至第7天,非蛋白质巯基又再度减少。在平阳霉素及半乳糖诱发白内障过程中,晶状体中非蛋白质巯基分别在给药后的第7天及第3天开始大量减少,以后继续减少,至第15天时,其含量分别为正常的十分之一及五分之一。在体外,亚硒酸钠有促进还原型谷胱甘肽自氧化的作用,半乳糖对此作用无影响,而平阳霉素可阻止其进行,但能加强亚硒酸钠的促进作用。在三种白内障晶状体中,蛋白质巯基开始减少的时间均较非蛋白质巯基为晚,这表明只有非蛋白质巯基减少到一定程度后蛋白质巯基才会被大量氧化,同时也说明非蛋白质巯基具有保护蛋白质巯基免受氧化的作用。只有这种保护作用减弱后,才会使蛋白质巯基遭受氧化而导致白内障。

Select

正常与患白内障大鼠晶状体中脲溶性蛋白质性质的研究

商福,张家萍,张昌颖

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 242-248.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

本文研究了正常及三种类型白内障大鼠晶状体中脲溶性蛋白质的含量及性质的变化,发现在每种类型白内障晶状体中,水溶性蛋白质均减少,水不溶性蛋白质则都相对增加。经SephadexG-200柱层析及SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳发现,晶状体中脲溶性蛋白质主要是由二硫键交联而成的高分子聚合物。经巯基乙醇还原后,绝大部分高分子聚合物可分解成低分子量蛋白质,其分子量与水溶性的γ晶体蛋白相同。这提示晶状体中脲溶性蛋白质的主要成分很可能是以二硫键交联而成的γ晶体蛋白聚合物。此结果与本实验室所得白内障晶状体水溶性蛋白质的变化相吻合。

Select

模式匹配分析方法检索免疫球蛋白样功能区

王槐春,吴加金,白炎,唐佩弦

中国生物化学与分子生物学报. 1991, 7(02): 249-256.

摘要 ( ) PDF全文 ( )

可视化

运用计算机进行核酸和蛋白质的序列分析是分子生物学研究的一个较新发展,这项技术已越来越多地用于研究大量积累的序列数据。蛋白质功能区是蛋白质分子中能独立折叠成具有一定结构并执行特定功能的结构域,所有具有同一类功能区的分子统称为一个蛋白质的超族(protein superfamily)。本文通过对免疫球蛋白(Ig)超族及其功能区序列所进行的分析,建立了一种根据功能区之保守片段残基组成的模式匹配分析检索蛋白质功能区的方法,它先根据多序列的对准比较确定某一类功能区之保守片段,再对已知的保守片段各位置上氨基酸残基组成进行统计分析,然后根据与统计数值相匹配的方法,计算待检序列残基组成的统计学意义,由此确定功能区的存在。该方法的优点在于它不仅可以检出已知的具有某一类功能区的分子,而且还可能发现新的具有该功能区的分子,从而推测后者的功能。

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

过刊目录

模态框（Modal）标题

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

过刊目录