%0 Journal Article %A 孙秋丽 %A 赵春澎 %A 张俊河 %A 王小引 %A 王天云 %T MAR提高重组CHO细胞中转基因表达的分子特征分析 %D 2016 %R 10.13865/j.cnki.cjbmb.2016.01.09 %J 中国生物化学与分子生物学报 %P 64-68 %V 32 %N 1 %X 分析核基质结合区(matrix attachment region,MAR)调控转基因表达的分子序列特征,鉴定能有效提高CHO细胞转基因表达的MAR特征性元件。将人β-珠蛋白MAR片段从5′到3′ 端分为6个分段(1~540,421~1 020,901~1 500,1 381~1 980,1 861~2 460,2 341~2 999位置),分别采用PCR进行克隆,经测序证实正确后,分别连接到含有氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)报告基因的表达载体SV40启动子及上游,构建β-珠蛋白MAR渐次片段介导的表达载体,转染CHO细胞,G418筛选出稳定表达细胞株,ELISA分析CAT报告基因的表达水平,生物信息学分析MAR序列特征。结果表明,β-珠蛋白MAR全长能显著提高转基因的表达,6个渐次片段相比较,421~1 020位的第2个分段和 901~1 500位的第3个分段提高转基因表达作用显著。生物信息学分析结果显示,MAR-like motif有助于转基因表达提高。 %U http://cjbmb.bjmu.edu.cn/CN/10.13865/j.cnki.cjbmb.2016.01.09