%0 Journal Article %A 李玲玲 %A 闫倩云 %A 丛方地 %A 周学永 %A 刘海学 %A 邢克智 %A 任健 %A 王英超 %A 李涛 %T 器壁固定化脂肪酶Pseudomonas cepacia lipase的非水活性与稳定性 %D 2014 %R 10.13865/j.cnki.cjbmb.2014.10.11 %J 中国生物化学与分子生物学报 %P 1025-1030 %V 30 %N 10 %X 许多脂肪酶在有机体系中表现出催化作用,可用于绿色有机合成. 但其催化活性和稳定性明显低于水/油(有机相)界面上的表现. 为了提高脂肪酶在有机反应体系中的活性和稳定性,依据脂肪酶的界面活化机制,以水为酶蛋白构象优化剂、羧甲基纤维素为赋形剂,通过物理吸附的方式,将典型的假单胞菌脂肪酶(Pseudomonas cepacia lipase)固定在锥形瓶的内壁上,形成简易的生物反应器. 为方便检测器壁固定化酶促反应动力学,选择特征吸收为640 nm的生化指示剂2,6-二氯靛酚为反应底物,乙酸乙烯酯为酰化试剂,丙酮为溶剂. 光谱检测表明,催化反应0.5 h后,器壁固定化脂肪酶转化底物的能力是脂肪酶粉的6倍. 在每次催化5 h共10次的循环催化中,器壁固定化脂肪酶的催化活性平均每次仅降低3.2%,而酶粉降低11.8%. 结果表明,该器壁固定化脂肪酶的活性和稳定性相对于酶粉明显提高,这将为通过固定化有效提高脂肪酶的非水催化作用提供重要的参考. %U http://cjbmb.bjmu.edu.cn/CN/10.13865/j.cnki.cjbmb.2014.10.11