%0 Journal Article %A 刘继中 %A 陈苏民 %A 李毅 %A 胡蕴玉 %A 纪宗玲 %A 杨彤涛 %T 人骨保护素在毕赤酵母中的分泌表达及表达产物的生物活性分析(英文) %D 2003 %R %J 中国生物化学与分子生物学报 %P 566-571 %V 19 %N 05 %X 为了在毕赤酵母表达系统中分泌表达人骨保护素 (osteoprotegerin ,OPG) ,以人骨肉瘤细胞系MG6 3的mRNA为模板 ,采用RT PCR法得到人OPG编码区cDNA ,克隆入毕赤酵母表达载体pPICZ B ,电转化毕赤酵母GS115 (Mut+) ,经 3%甲醇诱导分泌表达人OPG与组氨酸的融合蛋白 .SDS PAGE及Western印迹分析表明 ,有分子量约 6 6kD的目的蛋白表达 .纯化后的表达产物加入体外培养的小鼠骨髓细胞培养基中 ,当浓度为 10 0ng ml时 ,象牙片上骨吸收陷窝的数量及玻片上的TRAP阳性多核细胞的数量均减少 (P <0 0 5 ) .而同时加入人OPG的多克隆抗体后 ,这一抑制作用可被拮抗 ,在浓度为 5 0ng ml时则无此作用 .人OPG蛋白在酵母系统的成功表达 ,为该蛋白的进一步应用研究提供了依据 . %U http://cjbmb.bjmu.edu.cn/CN/abstract/article_20236.shtml